抗环瓜氨酸抗体在类风湿关节炎诊断中的临床意义

张琳 王春燕

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是常见的以关节滑膜慢性炎症病变为主要表现的自身免疫性疾病，发病两年内出现不可逆的骨关节破坏，严重危害患者健康及降低生活质量。近年来，在RA患者中发现了多种新的抗体，特别是环瓜氨酸肽(CCP)的自身抗体，因其在RA中的高度敏感性和特异性而倍受关注［1］。笔者应用酶联免疫吸附试验(ELl-SA)，检测53例RA患者血清中的抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体，旨在探讨其对RA的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 RA组53例，来自我院2007年6月至2008年3月风湿病科门诊、住院患者，以上患者符合美国风湿病学会1987年修订的RA诊断分类标准。其中男17例，女33例，年龄14～65岁，平均48.3岁。对照组42例，其中男13例，女29例，年龄14～70岁，平均51.2岁。包括系统性红斑狼疮(SLE)10例，原发性干燥综合征7例，强直性脊柱炎8例，结缔组织病8例，系统性硬化病3例，痛风性关节炎2例，多发性皮肌炎2例，骨关节炎l例，反应性关节炎1例，诊断符合各自的诊断标准。

1.2 检测方法 采集空腹静脉血3 ml，分离血清，-20℃保存待测。抗CCP抗体检测采用ELISA，试剂由欧蒙(德国)医学实验诊断有限公司提供，检测结果＞5 U/ml为阳性。抽取静脉血2 ml，离心分离血清，将待测血清用样本缓冲液按1:100稀释，加入已包被的微孔中，每孔100 μl，室温孵育30 min，洗板3次后加人辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体100 μl，室温孵育 30 min，洗板 3 次后加入底物 100 μl 30 min，最后加入终止液100 μl，酶标仪上检测，设定波长为450 mn，每份样本设立空白对照、阳性对照、阴性对76照及正常对照。类风湿因子(rheumatoid factor，RF)采用Beckman Coulter公司的Immage特定蛋白分析仪及其配套试剂，使用免疫比浊法检测RF水平，检测结果＞20 U/ml判为阳性。同时检测RA患者血沉(ESR)、免疫球蛋白(Ig)、C反应蛋白(CRP)、血小板(PLT)等指标。

1.3 统计学方法 采用SPSS 12.0统计软件处理，多组样本均数比较采用方差分析，两变量之间的相关性采用Spearman相关性分析。

2 结果

RA组血清抗CCP抗体阳性率对RA诊断敏感性为56.6%，RF阳性率对RA诊断敏感性为61.4%，两者间差异无显著性(P＞0.05);抗CCP抗体和RF对RA诊断的特异性分别为95.1%、71.4%，差异有显著性(P＜0.05)。RA组血清抗CCP抗体阳性率阳性率56.6%明显高于对照组2.1%，差异有显著性(P＜0.05)。经Spearman相关性分析发现抗CCP抗体与 ESR、CRP、RF间呈正相关(r=0.531、0.524、0.574，均 P ＜0.05)。

3 讨论

类风湿关节炎(RA)是一种自身免疫性疾病，以滑膜的炎症为基础，呈慢性、进行性、侵蚀性关节破坏，最终导致关节畸形和功能丧失。RA为常见风湿免疫性疾病，可发生于任何年龄，在我国的发病率达0.32% ～0.36%。目前对于RA的诊断仍延用美国风湿病协会(ACR)1987年修订的RA分类标准，但该标准要求病程长，关节X线损害明显，血清学指标仅有特异性相对较低的类风湿因子(RF)，对于X线关节损害不典型及RF阴性RA患者早期诊断困难，失去最佳诊治时机，如何早期及时诊断RA成为研究的重点。

研究发现瓜氨酸是RA血清抗聚丝蛋白相关抗体识别的主要抗原决定簇，并建立了以人T合成CCP为抗原的ELISA检测法，也证明抗CCP抗体在诊断RA中有着较高的特异度。抗CCP抗体存在于早期的RA患者，且特异性高，与RF相比有较高的特异性［3］。对于 RF阴性的患者，抗CCP抗体也可以提供可靠的早期诊断依据。文献报道抗CCP抗体与RA患者病情严重程度有关［4］。本研究显示，RA患者的抗CCP抗体浓度明显高于其他结缔组织病和正常对照组，并且与某些炎症指标有相关性，如将抗CCP抗体与RF及抗角蛋白抗体等指标结合起来将大大提高诊断RA的特异性，有助于RA的早期诊断，早期治疗，最大程度的缓解病情，促进康复，改善生活质量。由于ELISA方法成熟、方便，可能在临床上有广泛的应用前景。

本研究结果显示，抗CCP抗体对RA的敏感性与RF相比较，其对RA诊断的敏感性差异无显著性，而特异性明显高于RF。提示在RA血清中存在特异性识别CCP的抗体，对RF诊断是一个非常有价值的临床检测指标。抗CCP抗体除了对RA的诊断具有一定的价值外，其对于RA的早期诊断、病情活动性及预后也有一定的价值。有研究表明，抗CCP抗体的出现先于RF，可用于对极早期滑膜炎的诊断研究。进一步的研究表明:在RA患者，抗CCP抗体阳性组和阴性组在晨僵时间、受累关节夜间痛发生率、关节肿胀指数、X线病情分期、医师和患者对病情活动性的评分、IgG、ESR和CRP水平差异均有显著性［5］。有研究人员对RA患者的影像学评分进行连续观察，发现抗CCP抗体阳性者的骨破坏较抗体阴性者严重，提示抗CCP与RA病情严重程度及其发展有关。

［1］姜东林，孙钧铭，姜升阳，等.类风湿关节炎患者抗MCV、抗CCP抗体与RF诊断价值比较.临床检验杂志，2009，27(2):137-138.

［2］Habib HM，Mosaad YM.Youssef HM.Anti.cyclic citrullinated peptide antibodies in patients with juvenile idiopathic arthritis.Immunol Invest.2008，37(8):849-857.

［3］彭晓冬.李夔新，白杨娟，等.抗CCP抗体、AKA及RF对类风湿性关节炎的诊断价值.四川大学学报，2006，37(2):317-318.

［4］Fabien N.Goetz J，Sordet C，et al.New autoanti-bodiesinrheumstoid arthritis:anti-citmllinated protein or peptide autoanti-bodies and the others.Pressc Med，2008，1(1):20.

［5］Mortia Y，Muro Y，Sugiura K，et al.Anti-cyclic citrullinated peptide antibody in systemic sclerosis.Clin Exp Rheumatol，2008，26(4):542-547.