气相色谱质谱法检测蔬菜中多效唑的残留

吕 燕，赵 健，杨 挺，王立君

（农业部农产品质量安全监督检验测试中心，浙江 宁波 315040）

1 引 言

多效唑（Paclobutrazol）是三唑类植物生长延缓剂，广泛应用于蔬菜生产中，具有延缓植物生长、抑制茎枝伸长、促进分蘖、促进成花和座果、增强抗旱及抗寒性、提高耐盐性和延缓植物衰老等多种效应[1-7]。现在国内已有水果[8-9]、粮谷[10]等多效唑的检测方法，而蔬菜中残留的检测方法仍少见，用气相色谱-质谱测定蔬菜中多效唑残留量的方法却未见报道。该文采用乙腈作为提取液，通过对弗罗里硅土净化柱洗脱行为的优化，建立了用气相色谱-质谱选择离子方式测定蔬菜中多效唑的方法，该方法简便、快捷、准确。

2 实验部分

2.1 试剂与材料

丙酮（色谱纯），正己烷（色谱纯），氯化钠（分析纯），乙腈（分析纯），固相萃取柱（弗罗里硅土，1 g/6 mL），多效唑标准品（纯度99.0%Dr.Ehrenst orfer GmbH）。

淋洗液：取5mL丙酮，用正己烷稀释至100mL；

洗脱液：取15 mL丙酮，用正己烷稀释至100mL。

2.2 标准储备液和工作液的配制

多效唑标准储备液：用少量丙酮溶解，正己烷定容，配制成1000mg/L，再于4℃冰箱中冷藏保存，有效期3个月。

标准工作液：将储备液用正己烷稀释成浓度为0.050～1.0mg/L标准工作液。

2.3 仪器与设备

Agilent 6890N GC/5973 MS气质联用仪（配备电子轰击离子源（EI））；梅特勒-托利多AX205型精密分析电子天平，感量0.01 mg；梅特勒-托利多PL3002型电子天平，感量0.01g；BUCHI V850型旋转蒸发仪；德国IKA T25型匀浆机；高速冷冻离心机（SIGMA 3K15）；固相萃取仪（Supeclo）。

2.4 实验步骤

2.4.1 提取

准确称取25.00 g匀浆后的抽取样品，置于250mL匀浆瓶中，加入50.0mL乙腈，10000r/min匀浆2 min后静置10 min，用滤纸过滤，滤液收集到装有10 g氯化钠的100 mL具赛量筒中，收集滤液40～50 mL，盖上盖子剧烈震荡1 min，在室温下静置30min，使乙腈相和水相分层。

2.4.2 净化

从100 mL具塞量筒中吸取乙腈相10.00 mL至250mL烧杯中，烧杯在70℃水浴锅上加热，杯中缓缓通入氮气，蒸发近干，加入2.0mL淋洗液溶解，待净化。

将弗罗里硅土固相萃取小柱，用5.0 mL正己烷预处理，活化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用10.0mL淋洗液淋洗弃去全部流出液，然后用30.0mL洗脱液洗脱，收集洗脱液于50 mL浓缩瓶中，将盛有洗脱液的浓缩瓶置于旋转蒸发仪上，在40℃水浴条件下，旋转蒸发至近干，残渣用正己烷溶解并定容至2.0mL，待测定。

2.5 添加回收率实验

设添加水平为 0.040 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，并设空白对照，重复5次，处理同“2.4”。

2.6 仪器参数与测定条件

2.6.1 气相色谱部分

HP-5MS弹性石英毛细管柱：30m×0.25mm（i.d.），0.25 μm；程序升温：起始温度 100℃，以 20℃/min升温至220℃，再以5℃/min升温至250保持8 min；进样口温度：280℃；传输线温度：280℃；进样模式：不分流进样；进样量：1μL；载气流速：1.1mL/min。

2.6.2 质谱部分

四极杆温度：150℃；离子源温度：230℃；电子能量：70eV。数据采集方式：选择离子监测方式（SIM），监测离子 125，167，236。

3 结果与讨论

3.1 实验条件选择

3.1.1 提取剂的选择

分别选用丙酮、乙腈、乙酸乙酯、丙酮-乙酸乙酯提取样品中的多效唑，实验结果表明，单独用丙酮作为提取溶剂，提取液浓缩后溶液的粘稠度高，使净化工作无法进行；用乙酸乙酯或丙酮-乙酸乙酯进行提取，虽然不影响净化，但是提取效率低；选用乙腈作为提取溶剂，样品回收率在85%以上，故选用乙腈作为提取溶剂。

3.1.2 洗脱剂的选择

分别用正己烷、5%丙酮-正己烷、10%丙酮-正己烷、15%丙酮-正己烷、30%丙酮-正己烷进行洗脱实验。结果表明，用正己烷和5%丙酮-正己烷作为洗脱剂时，多效唑不能被洗脱下来；选用10%丙酮-正己烷多效唑可被洗脱下来，但定量回收所需溶剂多；采用15%丙酮-正己烷和30%丙酮-正己烷溶液均可只用少量洗脱剂定量洗脱组分，但后者同时使大量的杂质洗脱下来。故选用10mL 5%丙酮-正己烷淋洗，用15%丙酮-正己烷洗脱收集，洗脱溶剂用量少，样品也得到了较好的净化。

3.2 线性范围与检测限

取多效唑标准储备液，用正己烷稀释配置成浓度为 0.050 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.0 mg/L系列标准工作液液，按2.5仪器条件测定，获得不同浓度的多效唑响应峰面积，以定量离子的峰面积（Y）对相应多效唑标液质量浓度（X）作线性回归，结果表明多效唑在0.050～1.0mg/L范围内线性关系良好，其回归方程为Y=5.71×105X-7.58×103（R2为0.9998）。通过计算空白样品信噪比S/N=3获得该方法检出限为量0.01mg/kg。图1～图5为标准溶液、空白样品和添加样品的总离子流图和质谱图。

3.3 准确度和精密度

在未检出多效唑的白菜和黄瓜样品中分别添加3个不同含量水平的农药标准液，涡旋混合2 min，静置30 min，使添加浓度分别为0.040 mg/kg，0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，每个水平做5次平行实验，按照2.4处理后进样，计算加标回收率和相对标准偏差（RSD），结果见表1。此结果回收率良好，相对标准偏差小于10%，符合农药残留检测要求。

对于实际样品，白菜和黄瓜中多效唑的最低检出浓度为0.01mg/kg。

4 结束语

实验以乙腈高速匀浆提取，再经弗罗里硅土固相萃取小柱净化，建立了蔬菜中多效唑残留量的气相色谱-质谱检测方法，该方法灵敏度高，选择性好，通过选择离子的相对丰度，可以对检测结果进行确证。经考察，该方法在选定的浓度范围内，多效唑回收率高，测定精密度好。

表1 蔬菜中多效唑的添加回收率

目前，我国规定了花生中多效唑的最大残留限量值为0.5mg/kg[11]，但尚未制定白菜和黄瓜中多效唑的最大残留限量值，而日本肯定列表中未见白菜和黄瓜的最大残留限量，所以两种蔬菜中多效唑最大残留限量归为“一律标准”，即为0.01 mg/kg。该研究方法符合残留分析试验要求，能够用于检测蔬菜中多效唑的农药残留。

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