白灰树花菌丝体最适营养生长条件的研究

周永斌，张志军，刘连强，訾惠君，李凤美

（天津市林业果树研究所，天津 300112）

灰树花 （Grifola frondosa）又名栗子蘑、舞茸。属担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、多孔菌科、树花菌属。子实体形同盛开的莲花，柄短呈珊瑚状分枝，菌盖扇形，重叠成丛；菇体因品系差异呈白色、灰色、褐色等，孢子无色、光滑，卵圆形至椭圆形。在自然界，夏秋季多发生于板栗、青冈等阔叶树的树干周围，土质多为含有腐叶的沙质土。灰树花是十分珍贵的食 （药）用菌，它不仅香气浓郁，肉质柔嫩，口感鲜美，而且还具有极高的医疗保健功能，近年来以日本为主的许多国家对灰树花药理作用的研究表明，灰树花具有抗癌和免疫增强作用，并具有抗高血压，降低血糖、血脂和抗各类肝炎病毒的作用[1]。

白灰树花是灰树花的一种，从原基形成到子实体成熟均洁白如玉，商品价值略高于其它品种。尽管我国从80年代就开始了灰树花的人工栽培研究，但对白灰树花的人工栽培直到2004年才开始进行，且规模较小，远不能满足市场需求，并且国内关于白灰树花菌生物学特性研究的报道很少[2]。本研究通过对白灰树花菌丝生长进行不同碳源、氮源的单因子试验及最适生长温度试验，旨在探究其最适的菌丝营养生长条件，掌握其生物学特性，为进一步本地化示范推广奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种

白灰树花引自日本鹿岛农产合作会社。

1.1.2 培养基

培养基1：蛋白胨0.2%、KH2PO40.15%、MgSO40.075%、VB12片 （每片10 mg）、琼脂2%，蒸馏水1000 mL，pH值自然。

培养基2： 葡萄糖2%、KH2PO40.15%、MgSO40.075%、VB12片 （每片10 mg）、琼脂2%，蒸馏水1000 mL，pH值自然。

马铃薯综合培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨 2 g、 KH2PO41.5 g、 MgSO4·7H2O 0.75g、 VB120 mg、琼脂20 g，水1000 mL，pH值自然。

1.2 试验方法

1.2.1 碳源利用试验

在培养基1中分别添加2%的蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、玉米粉、红糖、果糖。将培养基装入试管 （20 mm×200 mm）， 制成斜面， 并灭菌 （121℃，30 min）、 接种，每个处理重复5次，于25℃条件下培养一定时间，以菌丝体在斜面上的直线生长距离及长势的强弱作为生长量指标，记录菌丝生长速度、菌丝长势和平均满管天数。

1.2.2 氮源利用试验

在培养基2中分别添加 0.2%的 （NH4）2SO4、NH4NO3、蛋白胨、酵母膏、麦麸、黄豆粉。制作、培养及检测指标同1.2.1。

1.2.3 温度影响试验

将马铃薯综合培养基装入20 mm×200 mm的试管内，制成斜面，高压灭菌 （121℃，30 min）后接菌种，于不同温度条件下黑暗培养一定时间，每个处理重复5次，以菌丝体在斜面上的直线生长距离及长势的强弱作为生长量指标。

2 结果与分析

2.1 白灰树花菌对碳源营养的利用

试验发现白灰树花菌接种到各种培养基上，要经5 d～6 d后才开始萌发，而且在这5 d～6 d期间用肉眼无法看出试管斜面的变化，满管时间相比其他食用菌要长，需15 d～20 d。对碳源营养的利用结果见表1。

表1 不同碳源对白灰树花菌丝生长的影响

从表1可以看出，白灰树花对果糖的利用最差，在以果糖为碳源的培养基上菌丝基本不萌发。白灰树花菌丝生长速度和长势，在其他5种不同碳源培养基上表现差异明显。其中菌丝生长速度在以葡萄糖为碳源时最快，达0.55 cm·d-1，其次是可溶性淀粉、红糖；再次是玉米粉和蔗糖。以葡萄糖、可溶性淀粉为碳源时，菌丝长势相近，菌丝生长浓白、细密、健壮。同时发现白灰树花在以红糖为碳源的培养基上菌丝长势要明显好于以蔗糖为碳源的培养基，可能是红糖中含有部分可刺激菌丝生长的物质。在玉米粉培养基上菌丝浅白，生长较弱。

2.2 白灰树花菌对氮源营养的利用

比较了6种氮源对白灰树花菌丝生长的影响，结果见表2。

表2 不同氮源对白灰树花菌丝生长的影响

从表2可以看出，有机氮比无机氮更适合白灰树花菌丝的生长，菌丝体萌发时间、满管时间和不同碳源培养基上培养的情况一致。2种无机氮 （NH4）2SO4和NH4NO3为氮源的培养基上，白灰树花菌丝基本不萌发。菌丝生长的最适氮源是蛋白胨，在以蛋白胨为氮源的培养基中菌丝生长浓白、细密、健壮，且日生长速度高达0.55 cm·d-1；其次是酵母膏，以麦麸和黄豆粉为氮源的培养基上，菌丝生长较稀疏，不理想。

2.3 白灰树花菌丝体最适生长温度的确定

温度对白灰树花菌丝生长的影响见表3。

表3 温度对白灰树花菌丝生长的影响

由表3可以看出，白灰树花菌丝在5℃～30℃范围内均能生长，35℃时菌丝不再生长。适宜生长温度为20℃～25℃，培养温度为25℃时，菌丝生长最快。

3 小结与讨论

通过试验发现，白灰树花菌丝体生长周期较长，且要经4 d～6 d后才开始萌发。培养白灰树花菌丝的最适碳源为葡萄糖，菌丝生长速度为0.55 cm·d-1，菌丝长势在所试验的碳源中表现最强，这说明白灰树花菌与其它大部分食用菌一样都能很好的利用以葡萄糖为碳源的培养基[3]。同时发现白灰树花菌丝体在无机氮中的铵态氮和硝态氮培养基上不萌发，这可能与无机氮提供的氮源营养单一有关。有机氮更适合菌丝体的生长，最适氮源是蛋白胨，其次是酵母膏、黄豆粉，在以蛋白胨为氮源的培养基中菌丝生长旺盛、洁白、浓密。菌丝体适宜生长温度在20℃～25℃，培养温度为25℃时，生长最快。

[1]兰进.食药用菌栽培技术图解[M].北京：中国农业出版社，2004.

[2]鲍正光.白色灰树花栽培技术[J].食用菌，2006(10)：48.

[3]杨国良.蘑菇生产全书[M].北京：中国农业出版社，2004.