妇宁洗剂的药效学实验研究

谢朝晖，王宇红，房 赤，唐 应

（湖南中医药大学附属第一医院，湖南长沙 410007）

妇宁洗剂由蛇床子、龙胆草、百部、地肤子、黄柏、败酱草等组成，具有清热解毒、消炎止痛、杀虫止痒、消肿止痛的功效，临床用于霉菌、滴虫、细菌性阴道炎、宫颈炎、外阴瘙痒、湿疹及淋病的辅助治疗,具有较好疗效。为了进一步证实其抗菌、消炎、止痒作用，就其药效学进行实验研究,为临床提供理论依据，现报道如下：

1 材料与试药

1.1 材料

健康ICR雄性小鼠[50只，体重：8～22 g，上海西普尔-必凯实验动物有限公司，许可证号：SCXK（沪）2003-0002，合格证号：0029731]；SD 系 SPF 级雄性大鼠[50 只，体重：180～220 g，上海西普尔-必凯实验动物有限公司，许可证号：SCXK（沪）2003-0002，合格证号：0029731]；普通级豚鼠[40 只，雌雄各半，体重：200～250 g，长沙开福区东创实验动物科技服务部，许可证号：scxk（湘）2006-0001，合格证号：002606]；实验动物环境设施合格证号：SYXK（湘）2003-0001。

1.2 试药

妇宁洗剂（本实验室配制）；洁尔阴洗液（成都恩威制药有限公司，国药准字 Z10930008，批号：0806026）；氨苄青霉素（华北药业股份集团，1 g 干粉/瓶，批号：20080721）；氟康唑（湖南康普药业有限公司，50 mg/粒，批号：20080201）；金黄色葡萄球菌（编号：26001，湖南省疾控中心的保存菌种）；大肠埃希菌（编号：44136，湖南省疾控中心的保存菌种）；消化道链球菌（临床分离菌，湘雅医学检验室）；白色念球菌、变形杆菌、淋病双球菌均为临床分离株（湖南中医药大学微生物教研室）；金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、变形杆菌均采用普通营养琼脂培养基，消化道链球菌、淋病双球菌采用血琼脂培养基，白色念珠菌采用沙氏培养基。

2 方法与结果

2.1 抗感染作用

2.1.1 对二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀的抑制作用 取ICR雄性小鼠50只，随机分成5组，分别为空白对照组（蒸馏水）、洁尔阴组、妇宁洗剂低、中、高剂量组（1.0、2.0、4.0 g/kg）。用乙醚浅麻小鼠，将20 μl二甲苯涂于右耳两面，30 min按表1剂量将相应药物涂于右耳两面，15 min后处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，用8 mm打孔器在两耳同一部位打下圆耳片，立即称重，计算肿胀率=（右耳重量-左耳重量）/左耳重量×100%。结果见表1。由表1可知，与空白对照组比较，妇宁洗液高、中剂量组动物耳缘肿胀率有显著性差异，其耳缘肿胀明显减轻，其低剂量组也有减轻趋势，表明妇宁洗剂对二甲苯引起的小鼠耳缘肿胀有明显治疗作用，具有较好的抗感染作用。

2.1.2 对角叉菜致炎大鼠足跖肿胀的抑制作用 取雄性SD系SPF级大鼠，体重180～220 g，随机分成5组，分别为空白对照组、洁尔阴组、妇宁洗剂低、中、高剂量组（0.7、1.4、2.8 g/kg），将相应药物涂于大鼠足部，每天1次，连续3 d，第3天测定每只大鼠右后足跖厚度为致炎前足跖厚度，于末次给药后1 h，每只大鼠右后足跖皮下注射1%角叉菜混悬液（0.05 ml/只），随后每隔1 h测定足跖厚度1次，用游标卡尺测量膝关节下1 cm处足跖中央厚度，连续5次，计算肿胀率并加以比较。肿胀率=（致炎后足跖厚度－致炎前足跖厚度）/致炎前足跖厚度×100%。结果见表2。由表2可知，与空白对照组比较，妇宁洗剂中、高剂量组大鼠足跖肿胀率在2～4 h内均有显著性差异，其肿胀率明显降低，表明对角叉菜致大鼠足跖肿胀有明显的抑制作用，可见妇宁洗剂可抑制由角叉菜引起的大鼠足跖肿胀，具有一定的抗感染作用。

表1 妇宁洗剂对小鼠耳缘肿胀的影响（）Tab.1 The effect on mouse ear swelling from Fu'ning Lotion()

表1 妇宁洗剂对小鼠耳缘肿胀的影响（）Tab.1 The effect on mouse ear swelling from Fu'ning Lotion()

与空白对照组比较，*P＜0.05

组别 剂量（g/kg） 耳肿胀左耳重（mg） 肿胀率（%）空白对照组DW22.1±2.676.5±8.9洁尔阴组2.521.7±2.563.3±19.0*妇宁洗剂低剂量组1.021.9±2.464.5±16.9妇宁洗剂中剂量组2.022.3±3.061.7±16.0*妇宁洗剂高剂量组4.022.5±3.660.5±17.2*

表2 妇宁洗剂对角叉菜致大鼠足跖肿胀的影响（）Tab.2 The effect on food-induced rat sole swelling mode by diagonal side from Fu'ning Lotion()

表2 妇宁洗剂对角叉菜致大鼠足跖肿胀的影响（）Tab.2 The effect on food-induced rat sole swelling mode by diagonal side from Fu'ning Lotion()

与空白对照组比较，*P＜0.05

组别 空白组 洁尔阴组 妇宁洗剂低剂量 中剂量 高剂量剂量（g/kg）DW2.00.71.42.8给药前足跖厚（mm）4.9±0.35.0±0.55.0±0.25.2±0.35.1±0.2致炎后不同时142.6±12.041.9±5.141.9±14.939.9±5.443.6±5.9间的肿胀率(%)243.6±12.241.5±6.042.6±13.837.7±9.035.1±7.6346.2±10.740.1±8.541.2±11.337.7±7.236.8±7.2*446.8±10.437.1±8.6*38.8±10.535.9±12.1*36.2±9.2*544.3±11.136.5±10.038.1±11.932.9±13.636.3±9.3640.7±12.030.6±12.331.5±13.329.8±14.829.8±14.5

2.2 止痒作用

对组织胺致豚鼠局部瘙痒的影响进行试验。普通级豚鼠40只，雌雄各半，体重200～250 g，按体重随机分成5组，每组8只，分别为模型对照组、阳性对照组（洁尔阴洗液）、妇宁洗剂组3个剂量组（相当于临床拟用剂量的0.5、1、2倍）。用粗砂纸擦伤右后足背部剃毛处（面积：1 cm2），局部再给药1次，末次给药后10 min除去受试物，在创面处滴0.01%磷酸组织胺（0.05 ml/只），此后每隔 3 min 依 0.01%，0.02%，0.03%，0.04%……递增浓度，每次均为0.05 ml/只，直至出现豚鼠回头舔右后足为止。实验前2天各豚鼠右后足剃毛，并涂药，每日2次，连续2 d。第3天用粗砂纸擦伤右后足背部剃毛处（面积：1 cm2），局部再给药1次，末次给药后10 min除去受试物，按造模方法，累计各组豚鼠所用磷酸组织胺总量为致痒阈（μg）。结果见表3。由表3可知，妇宁洗剂能显著提高磷酸组织胺对豚鼠致痒反应的致痒阈，经组间t检验，与空白对照组比较，有非常显著性差异。结果提示妇宁洗剂有明显的止痒作用。

2.3 体外抑菌作用

2.3.1 琼脂平板扩散法（打孔法） 取37℃培养24 h的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、变形杆菌、消化道链球菌、淋病双球菌，28℃培养48 h的白色念球菌。无菌平皿先倒入下层琼脂培养基，待干后，再倒入上层含菌培养基，用直径6 mm打孔器打孔，抗菌试验时用药物原液，每个菌种每次做3孔/平皿，重复3次。同时设培养基对照、加菌不加药的阳性对照。结果见表4。

表3 妇宁洗剂对组胺致豚鼠局部痒阈值的影响（）Tab.3 The effect on guinea pig's localized itching threshold mode by histamine from Fu'ning Lotion()

表3 妇宁洗剂对组胺致豚鼠局部痒阈值的影响（）Tab.3 The effect on guinea pig's localized itching threshold mode by histamine from Fu'ning Lotion()

与模型对照组比较，*P≤0.05

组别 致痒阈（μg）空白对照组68.75±24.70洁尔阴洗液组135.63±47.84*妇宁洗剂组146.25±38.70*妇宁洗剂组140.00±30.89*妇宁洗剂组98.75±25.98

2.3.2 试管法 取细菌同上。药物用液体培养基作对倍稀释，浓度分别为 1∶1、1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64。 于试管加入稀释后的被试药液，再加入等量菌液。同时设培养基对照、加菌不加药的阳性对照。试管法每菌2管，重复3次。结果见表5。

表4 琼脂扩散法的检测抑菌环结果（mm）Tab.4 The detection of antimicrobial rings results of agar diffusion method(mm)

表5 试管法检测的最低抑菌浓度（MIC，n=6）Tab.5 Tube minimum inhibitory of concentration detection(MIC,n=6)

由表4、5可知，妇宁洗剂对以上细菌具有一定的体外抑制作用。

3 讨论

阴道炎、外阴瘙痒症是妇科常见、多发病,中医学认为,此类疾病多由湿热、虫蚀或肝肾阴虚所致,发病时阴痒难忍,伴灼热刺痛,白带多且有浓臭味等。方中蛇床子、龙胆草、败酱草清热解毒、燥湿,地肤子利小便，清湿热。黄柏善清下焦湿热、解毒，蛇床子、百部等共助化湿杀虫止痒之功，诸药配伍具有清热解毒、消炎止痛、杀虫止痒之功。

现代药理研究证明，本方中多味药所含的有效成分具有杀菌、止痒、杀虫的功效，如蛇床子的止痒有效成分R2具有拮抗组胺和抑制肥大细胞脱颗粒以及止痒、抗感染、抗变态反应等药理作用，可用于急、慢性皮炎所致皮肤瘙痒和皮肤瘙痒症的治疗[3]。研究显示败酱草有抗菌作用；最低抑菌浓度（MIC）结果表明，金黄色葡萄球菌（13/27）、表皮葡萄球菌（18/22）的 MIC≤3.13 mg/ml,普通变形杆菌（2/2）,淋病奈瑟氏菌（2/2）的MIC≤0.78 mg/ml[4]。黄柏所含小檗碱对白喉杆菌、草绿色链球菌、痢疾杆菌、链球菌、金黄色葡萄糖球菌有抑制作用[5]。龙胆有抗病原微生物和寄生虫的作用。通过本文药效学实验,证明了该洗剂中诸药合用具有抗菌、消炎、止痒的功效,为临床应用提供了理论依据。

[1]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科技出版社,1991.

[2]杨宝丽,杨景云,宋清霞.念珠菌性蛇床子止痒小鼠模型的建立[J].中国微生态学杂志,2005,17(3):168-169.

[3]周然,王永辉,李彦艳,等.蛇床子止痒有效成分R2的药效学实验研究[J].世界中西医结合杂志,2007,2(2):75-78.

[4]殷网虎.3味中药前列腺主要致病菌抑制作用的观察[J].实用中西医结合临床,2003,3(2):538-541.

[5]吴葆杰.中草药药理学[M].北京:人民卫生出版社,2005:74,230,226.

[6]王芃,徐淑兰,朱燕,等.痔宁洗剂药效学研究[J].时珍国医国药,2000,11(7):97-99.