寻常型银屑病患者的外周血T淋巴细胞亚群和血清肿瘤坏死因子α的变化及临床意义

缪界萍

银屑病是一种由多基因遗传决定的、多环境因素刺激诱导的免疫异常性慢性炎症性和增生性皮肤病[1]。目前，关于本病的免疫发病的机制尚未完全清楚，我们检测了寻常性银屑病患者血液中T淋巴细胞亚群和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量，进一步探讨T细胞免疫和TNF-α在寻常型银屑病的发生及持续存在中的机制和临床意义，为临床的治疗及疗效观察提供依据。

1 资料与方法

1.1 对象

寻常型银屑病患者组 50例，均为2006年5月至2007年4月江苏省中医院皮肤科经门诊确诊病例，男性 26例，女性24 例，年龄 19～64岁。正常对照组32例，年龄 24～63 岁，男性16例，女性 16例。均为江苏省中医院健康体检者，无心、肝、肾等重要脏器疾患，无皮肤病及自身免疫性疾病，无免疫制剂应用史。

1.2 检测方法

1.2.1 T淋巴细胞亚群

美国Becton Dickinson公司 FACScalibur 流式细胞仪，采用美国Becton Dickinson公司Simultest IMK-Lymphocyte试剂盒，试剂盒中的双色荧光抗体均是FITC和PE标记的鼠抗人单克隆抗体，catalog No.340182。取肿瘤患者的外周静脉血，肝素抗凝，采用BD公司生产的Smultest IMK-Lymphocyte双色直标的免疫荧光试剂盒，按试剂盒操作说明进行染色，使用BD公司提供的质控微球调校流式细胞仪使其分辨率达到最佳工作状态。采用BD公司的SimulSET自动软件进行T淋巴细胞亚群测定和分析，计数成熟的T淋巴细胞亚群所占的百分率，T淋巴细胞（CD3+）、T辅助/诱导细胞亚群T抑制/毒性细胞亚群同时还可以得到T辅助细胞/T抑制细胞的比值

1.2.2 TNF-α血清含量测定

由上海森雄生物技术有限公司提供，采用ELISA操作方法，均按试剂盒说明要求进行。

1.3 统计方法

表1 寻常性银屑病患者和对照组外周血T淋巴细胞亚群测定结果（±s）

表1 寻常性银屑病患者和对照组外周血T淋巴细胞亚群测定结果（±s）

银屑病组与正常对照组比较，**P＜0.01，*P＜0.05

组 别 n CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+银屑病组 50 64.92±9.81 34.44±6.33** 27.74.±6.74 1.32±0.49*正常对照组 32 65.97±5.44 38.00.±4.96 25.81±4.87 1.54±0.41

2 结 果

2.1 寻常型银屑病患者和对照组外周血 T淋巴细胞亚群测定结果 银屑病组的比值均低于对照组，有显著性差异，分别为P＜0.01和P＜0.05。银屑病组的CD8+（%）结果较对照组略有增高，但无显著性差异，见表1。

2.2 寻常型银屑病患者和正常对照组TNF-α 测定结果

寻常型银屑病组的TNF-α结果显著高于对照组，有显著性差异（P＜0.01），见表2。

表2 寻常型银屑病患者和正常对照组TNF-α结果（±s）

表2 寻常型银屑病患者和正常对照组TNF-α结果（±s）

银屑病组与正常对照组比较，**P＜0.01

组 别 n TNF-α(pg/mL)银屑病组 50 40.26 ±32.56**对照组 32 24.35 ±12..85

3 讨 论

银屑病的病因和发病机制至今尚不清楚，近年来的研究认为银屑病是多基因遗传背景下的T细胞免疫功能异常的疾病。T细胞免疫功能异常是银屑病的一个重要的因素，T-淋巴细胞是机体免疫系统中主要的调节及效应细胞，可通过对抗原的识别、处理、递呈引起多种细胞因子同多种细胞之间的网络联系，构成维持免疫功能的生理状态平衡。T淋巴细胞是银屑病发病过程中的主要效应细胞，激活的T淋巴细胞及多种炎症细胞释放的细胞因子等在发病过程中起重要作用。在我们的实验结果中显示，寻常型银屑病患者外周血细胞所占的百分率和比值显著低于对照组，提示T淋巴细胞免疫功能发生紊乱，T淋巴细胞确实参与了银屑病的发生和发展过程。现在普遍的观点认为：银屑病的发病机制与细胞免疫，尤其是与T细胞密切相关，异常的T细胞功能导致继发性的表皮KC（角质形成细胞）过度增生[2]。Kastelan等[3]认为，具有特殊活性的细胞在皮肤局部聚集，同时分泌细胞因子，产生一个I型细胞因子环境，为CD8+T细胞进一步活化提供了基础。细胞的活化提供最终触发了银屑病复杂的级联应，银屑病的发生、发展过程是细胞，特别是Th1型细胞、I型细胞毒性T细胞与KC之间交互作用的过程，表明T细胞在银屑病皮损的发生，发展及维持中起着关键性作用。

寻常型银屑病在以T淋巴细胞为主的作用中又涉及了一系列复杂的细胞因子反应，共同参与了银屑病的发生，我们的实验结果表明寻常型银屑病患者血清中TNF-α的水平明显高于正常人（P＜0.01），说明在寻常型银屑病患者的疾病过程中，其血清中TNF-α确实存在高于正常人水平的TNF-α，其结果与Chodorowska[4]报道结果一致。冯峥等[5]应用双抗体夹心ELISA方法及免疫组织化学检查检测16例寻常型银屑病患者及10例正常人血清中TNF-α浓度和皮肤标本中TNF-α及其受体的分布。TNF-α水平在寻常型银屑病患者血清及皮肤组织中均高于正常人。TNF-α是由单核-巨噬细胞产生的具有广泛生物活性的多肽调节因子，除了有杀伤或抑制肿瘤细胞的生物学活性外，还有促炎症作用和免疫调节作用，与机体的炎症免疫有着十分密切的关系。TNF-α是-种与银屑病免疫炎性反应密切相关的细胞因子，不仅能够诱导皮肤内粘附分子的表达，促进淋巴细胞的浸润，加速朗格罕细胞的成熟，增强其活化T细胞的能力，而且还能够促进角质形成细胞的增殖[6]。TNF-α可促进角质形成细胞增生，其机制为TNF-α可增加角质形成细胞TNF-α受体结合而促进增生，同时TNF也是重要的促炎性细胞因子，促进皮损的炎症形成[7]。TNF-α作为促炎性因子，在银屑病的发生、发展中起到重要的作用[8,9]。因此，银屑病是T细胞免疫功能紊乱和细胞因子的表达异常可能是银屑病发病的主要环节，免疫活性细胞和TNF-α等细胞因子通过免疫-炎症网络形式的相互作用而共同参与银屑病的致病过程并在银屑病的发生，发展及维持中起着重要的作用。检测寻常型银屑病患者外周血中的T淋细胞亚群和TNF-α对银屑病的治疗和疾病发展的机制探讨都有重要的参考价值，同时为进一步研发银屑病药物治疗提供实验依据。

虽然T淋巴细胞和TNF-α在银屑病的发病机制中占有非常重要的地位，这些因素可能是整个机体防御系统对致病因素反应的一部分，银屑病的免疫发病机制中的许多细节尚未阐明，还在不同程度上受到许多包括遗传在内的各种其它因素的影响，需要我们从分子水平对环境因素和遗传因素等各个角度对这一疾病有更进一步研究，相信随着研究的深入，将会发掘出更好的治疗策略。

[1]郑敏.银屑病发病机制研究中若干问题的思考[J].中华皮肤科杂志,2006,39(3):121-123.

[2]郑敏.银屑病是细胞免疫介导性疾病?[J].中华皮肤病科杂志,2002,35(2):85-87.

[3]Kastelan M,Massari LP,Pasic A,et al. New trends in the immunopathogenesis of psoriasis[J].Acta Dermatovenerol Croat,2004,12(1):26-29.

[4]Chodorowska G.Plasma concentrations of IFN-r and TNF-α in psoriatic patients before and after Local treatment with dithranol ointment [J].J Eur Acad Der matol Venereol,1998,10(2):147-151.

[5]冯峥,葛萍,李恒进,等.银屑病患者血清TNF2α浓度及其在皮损中的表达研究[J].军医进修学院学报,2005,26 (2):81-83.

[6]Schopf RE,Aust H,Knop J. Treatment of psoriasis with the chimeric monoclonal antibody against tumor necrosis factor alpha, infliaimab[J]. J Am acad Dermatok,2002,46(6):886-891.

[7]杨志波,向亚萍,欧阳恒.银屑病患者口服竹黄颗粒剂前后血清白介素-6和肿瘤坏死因子-α的水平的比较[J]. 中华皮肤科杂志,2002,33(6):423.

[8]Gisondi P,Gubinelli E,Cocuroccia B,et al. Targeting Tumor Necrosis Factor- alpha in the Therapyof Psoriasis[J]. CurrDrug Targets Inflamm Allergy,2004,3 (2 ):175-183.

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