关附胺醇在大鼠体内的药代动力学

李晓天，杜 斌，王素军，王广基

(1.中国药科大学药物代谢动力学重点实验室，江苏 南京 210009;2.郑州大学药学院，河南 郑州 450001;3.广东药学院，广东 广州 510000)

关附甲素(guanfu base A，GFA)为抗心律失常一类新药［1-3］，目前正在进行Ⅳ期临床研究。GFA在大鼠及人体内可代谢产生关附胺醇(guanfu alcohol-amine，AA)［4-5］，为了进一步了解关附甲素的体内代谢规律，有必要对其代谢产物AA的体内代谢过程作进一步的研究，由于iv给药AA后大鼠体内的药动学已有文献报道［6］，因此，本文采用文献报道［6］的方法，研究大鼠口服关附胺醇后的药代动力学，以了解该药不同途径给药后的药动学特点。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 LC-MS2010型液相-质谱联用系统 包括双高压泵，在线真空脱气机，自动进样器，柱温箱，LCMS solution version 2.04 Sul-H3工作站;AA由中国药科大学植化教研室提供;盐酸菲洛普(内标，DDPH)由中国药科大学药化教研室提供;乙腈为色谱纯，美国 Fisher公司产品;其余试剂均为分析纯。

1.2 色谱条件及质谱检测条件 与文献报道的方法［6］相同。

1.3 血浆样品处理方法 与文献报道的方法［6］相同。

1.4 实验方案 Sprague-Dawley(SD)大鼠6只，体质量(200±20)g，♀♂各半，实验前12 h禁食不禁水。分别口服关附胺醇 20 mg·kg-1，于给药前 0 min 及给药后 5、15、30、45、60、90、120、240、360 min，采血约 0.25 ml，按“血浆样品处理方法”项下提取测定。

2 结果

2.1 色谱行为 采用选择性离子检测方式，AA和DDPH的保留时间分别为2.24 min和4.46 min，方法的专属性强，灵敏度高，血浆中杂质不干扰样品的测定。

2.2 关附胺醇在大鼠血浆中的标准曲线 取大鼠空白血浆0.1 ml，精密加入不同量的关附胺醇标准溶液，制成含关附胺醇浓度分别为 0.05、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 mg·L-1的系列溶液，按文献报道中“血浆样品处理方法”项下操作，分别记录峰面积，以关附胺醇峰面积(AS)对内标的峰面积(AIS)比值为纵坐标(f)，以关附胺醇血浆浓度为横坐标(C)进行线性回归，得标准曲线方程为:f=1.8246C-0.2293(r=0.9989)。

2.3 方法回收率 配制含关附胺醇浓度为0.05、1.0、20.0 mg·L-1的血浆样品，加人内标，按“血浆样品处理方法”项下操作。另配制0.05、1.0、20.0 mg·L-1浓度的纯品水溶液，加入内标，同法操作，计算绝对回收率，结果表明低、中、高3种浓度的绝对回收率(n=5)分别为(82.4±8.5)%，(89.7±4.9)%和(88.4±6.1)%。

2.4 日内及日间RSD 配制含关附胺醇浓度为0.05、1.0、20.0 mg·L-1的血浆样品，按“血浆样品处理方法”项下操作，测定日内的 RSD分别为9.3%，7.1%，4.4%。连续5 d的RSD分别为14.7%，10.9%，6.5%。符合生物样品测定要求。

2.5 大鼠口服给药后药代动力学 6只大鼠单剂量口服关附胺醇20 mg·kg-1后，测定不同时间的血药浓度，将数据用3P87药代动力学程序处理，求算出各主要药动学参数见Tab 1。

Tab 1 Main pharmacokinetical parameters of AA after oral administration of 20 mg·kg-1in rats(±s，n=6)

Tab 1 Main pharmacokinetical parameters of AA after oral administration of 20 mg·kg-1in rats(±s，n=6)

Parameter ±s Cmax 5.11±1.79 Tmax 0.60±0.26 Vc/L·kg-1 1.24±0.18 T 12/h 2.07±0.46 AUC/mg·h·L-1 4.85 ±1.63 CLs/L·kg-1·h-1 3.94 ±1.19 MRT/h 1.92±0.24

3 讨论

大鼠口服关附胺醇20 mg·kg-1后血药浓度-时间曲线下的面积(AUC)与iv关附胺醇20 mg·kg-1后AUC［6］之比为86.8%，即该药物的生物利用度为86.8%，说明该药物口服后的生物利用度较高;关附甲素的另一个活性代谢物关附壬素口服后的生物利用度为71.3%［7］，大鼠口服关附胺醇后的生物利用度比大鼠口服关附壬素后的生物利用度高约15.5%，由此提示，关附胺醇在大鼠体内较少被代谢，可能与关附胺醇化学结构中没有乙酰基，而关附壬素相化学结构中有一个乙酰基有一定的关系，药物结构中的乙酰基容易被血浆或其他组织中的酶水解，具体原因正在进行进一步的研究。

大鼠口服关附胺醇后的主要药物动力学参数与iv关附胺醇后的主要药物动力学参数［6］相似，大鼠口服后消除半衰期约2 h，表明口服给药后药物在大鼠体内消除较快，口服给药后达峰时间约0.6 h，说明该药口服后吸收较迅速，与关附壬素吸收达峰时间0.5 h［7］相比吸收稍慢，可能与该药的脂溶性比关附壬素小有关，因为该药在结构上比关附壬素少一个乙酰基，因此水溶性增加，脂溶性减少，导致吸收减慢。

［1］ Chen W Z，Dong Y L，Zhang Y F.Anti-arrhythmic effects of guanfu base A［J］.Acta Pharmacol Sin，1983，4(4):247-50.

［2］ 董月丽，陈维州.关附甲素对实验性心律失常和心肌收缩力的影响［J］.药学学报，1995，30(8):577-82.

［2］ Dong Y L，Chen W Z，Effects of Guanfu base A on experimental cardiac arrhythmias and myocardial contractility［J］.Acta Pharm Sin，1995，30(8):577-82.

［3］ 陈 伟，陈维州.从中草药发现的新型特异性减慢心律药关附甲素［J］.中国药学杂志，1998，33(3):132-5.

［3］ Chen W，Chen W Z.A new type specificity drug of reduction of heart rate was discovered from trandition chinese medica［J］.Chin Pharm J，1998，33(3):132-5.

［4］ 阿基业，柳晓泉，江丹云，等.高效液相质谱联用法对盐酸关附甲素在大鼠尿中代谢物的研究［J］.药学学报，2002，37(4):283-7.

［4］ A J Y，Liu X Q，Jiang D Y，et al.Study on the meteboletes of Guanfu base A Hydrochloride in rat urine by high performaance liouid chromatograph-mass spectrum［J］.Acta Pharm Sin，2002，37(4):283-7.

［5］ A J Y，Wang G J，Sun J G，et al.Identification of phaseⅠand phaseⅡ metabolites of Guanfu base A hydrochloride in human urine［J］.Eur J Drug Metab Pharmacokinet，2003，28(4):265-72.

［6］ 李晓天，王广基，王素军，等.关附甲素代谢产物关附胺醇在大鼠体内的药代动力学研究［J］.中国药科大学学报，2005，36(2):142-5.

［6］ Li X T，Wang G J，Wang S J，et al.Studies on pharmacokinetics of Guanfu alcohol-amine，a Metabolite of Guanfu base A，in Rats Joumal of［J］.China Pharm Univ，2005，36(2):142-5.

［7］ Li X T，Wang G J，Wang S J，et al.Pharmacokinetics of guanfu baseⅠ，a metabolite of guanfu base A，in rats［J］.Biol Pharm Bull，2006，28(8):1363-5.