乐肝口服液对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

黄贵明 王冬梅 莫遗盛 李丽

乐肝口服液由鸡血藤、党参、绞股蓝、黄芪等组成，具有提高机体免疫功能、益气护肝等作用。本研究通过该药对小鼠急性肝损伤的影响，为其临床应用提供实验依据，现将实验报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物与试剂 将方中的中药用水提取两次，过滤后浓缩至适量备用。联苯双酯滴丸(浙江万邦药业有限公司，批号:070427);四氯化碳(CCL4，分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司，批号W20010202);丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒及丙二醛(MDA)测定试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供。

1.1.2 动物 清洁级小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g，由广西中医学院实验动物中心提供，合格证号:桂医动字11004号。

1.1.3 仪器 紫外可见分光光度计(Agilent 8453);高速微量离心机(LG16-W，北京医用离心机厂);高速低温离心机(德国Biofugestrutos);日本岛津电子天平(LIBROR.AEU-210);超声波细胞破碎机(JY92-IID，宁波新芝科器研究所);数显恒温水浴锅(HH-8，国华电器有限公司);液体快速混合液(YKH-1，江西医疗器械厂)。

1.1.4 方法 将小鼠随机分成正常组、模型组、乐肝口服液高、中、低剂量组，阳性对照组(联苯双酯100 mg/kg·d)共6组，每组12只。实验组适应性喂养3 d后，分别灌胃给予生理盐水或相应药物，1次/d，连用7 d，第7天给药1 h之后，除正常组外其余各组腹腔注射含0.5%CCL4花生油10 ml/kg，造模后再给药2次，末次给药后禁食不禁水24 h，称体重，摘眼球取血，剖取肝脏［1］。血样3500 r/min离心10 min，取血清，按试剂盒操作说明检测AST、ALT。准确称取相同位置肝脏0.5 g，加生理盐水5 ml，制成10%肝匀浆液，按试剂盒说明检测MDA。

1.1.5 统计学处理 采用统计软件包SPSS11.0统计分析。各组数据以表示，组间差异用t检验判断有无显著性。

2 结果

乐肝口服液对急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的影响，以及对小鼠肝组织MDA影响，结果见表1。

表1 乐肝口服液对小鼠血清ALT、AST活力和肝匀浆中MDA的影响( ± s，n=12)

表1 乐肝口服液对小鼠血清ALT、AST活力和肝匀浆中MDA的影响( ± s，n=12)

注:与正常对照组比较*P＜0.05，与模型组比较＊＊P＜0.05

组别 剂量(mg/kg·d)ALT(IU/L)AST(IU/L)MDA(nmol/mg)正常对照组-27.61±2.15 45.36±3.42 6.5±1.7模型组 - 398.23±60.47* 436.58±53.64* 11.2±2.8*乐肝高剂量组 55 150.14±25.11＊＊ 193.22±33.02＊＊ 8.8±1.5＊＊乐肝中剂量组 27.5 101.56±18.65＊＊ 147.68±28.93＊＊ 7.3±2.3＊＊乐肝低剂量组 13.7 89.07±22.87＊＊ 121.15±11.26＊＊ 6.9±1.6＊＊阳性对照组 100 77.49±14.34＊＊ 85.41±25.49＊＊ 8.0±2.1＊＊

由表1可知，与正常对照组比较，模型组小鼠ALT、AST，MDA水平明显升高(P＜0.05)，表示造模成功。实验结果表明，与模型组比较，乐肝口服液高、中、低剂量组的血清AST、ALT活力及肝脏MDA含量有显著性降低(P＜0.05)，表明乐肝口服液可抑制CCL4造成的ALT、AST、MDA活性升高，对肝损伤有一定的保护作用。

3 讨论

CCL4所致急性肝损伤为目前国际常用的肝炎模型之一，其中毒机制主要是CCL4进入机体后产生自由基，导致膜结构和功能完整性破坏，使血清中ALT和AST含量增高;同时由CCL4产生的自由基会启动肝细胞脂质过氧化，致使肝脏组织中的MDA含量升高［2］。因此检测血清中ALT、AST含量及肝组织中MDA含量是评价肝损伤的重要指标。

本实验结果表明，CCL4造模组与正常组比较，ALT、AST、MDA明显升高，给予乐肝口服液后三个指标明显降低，提示乐肝口服液具有保护肝细胞膜作用，使细胞膜通透性降低，抑制细胞内酶释放，维持细胞膜的正常结构;且可以清除自由基，抑制脂质过氧化反应，从而改善肝损伤，促进肝功能恢复，对肝损伤有一定的保护作用，为该药的临床应用提供科学依据。

［1］陈奇.中药药理研究方法学.人民卫生出版社，2000:943.

［2］杨莉，梁泰刚.养心草对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用.山西中医学院学报，2009，10(6):17-18.