生津利咽含片对小鼠抗炎镇痛作用影响的研究

刘瑞敏，朱立鸣，梁玉杰，段永强，虎俊瑞

(1.甘肃省人民医院，甘肃兰州 730000;2.甘肃中医学院基础部，甘肃兰州 730000)

生津利咽含片中药复方是在中医理论的指导下，根据阴虚津亏、生热生燥的理论，结合临床经验，以中医古方与导师经验方相结合，采用滋阴生津、润燥利咽的治法研制出的治疗慢性咽炎的中药制剂。根据以往的研究，临床运用养阴利咽治疗慢性咽炎有着明显确切的疗效。本课题着重从生津利咽含片的抗炎、镇痛角度，为中医药防治慢性咽炎的新药开发提供一些实验依据，以促进提高中医药对慢性咽炎的理论认识和防治水平。

1 材料

1.1 动物

SPF级昆明种小鼠(合格证号SCXK甘2004-0006-0000197)，雌雄各半，体重20g±2g，由甘肃中医学院医学实验中心提供。

1.2 仪器

电子天平，规格型号:Sartorius BL150，北京赛多利斯仪器系统有限公司。

1.3 药物

生津利咽含片(粉末)组方:生甘草、乌梅、玄参、桔梗、青果、制大黄由威海迪沙药业集团公司提供制剂。金果饮咽喉片(市售)，山东绿因药业有限公司生产，批号070213，临用前蒸馏水配成所需浓度;冰醋酸(乙酸)(分析纯)，广东汕头市西陇化工厂，批号 0502161;甲醛，成都化学试剂厂，批号830920-2;琼脂，上海中秦化学试剂有限公司，批号20070921;二甲苯，北京五二九五二化工厂，批号870317。

2 方法

下列各项实验将小鼠随机分为5组，即计量高、中、低组和阳性药物(金果饮咽喉片)及蒸馏水对照组。等效剂量以60 kg成人常规剂量按人与动物体型系数折算。

2.1 琼脂所致小鼠肉芽肿反应

给药前1 h在小鼠背中线同一部位将毛剪尽，行浅麻(腹腔注射10%乌拉坦0.15ml·20g－1)，背部皮下无菌快速注射2%琼脂0.2ml，各组动物每天分别给药1次，连续14d。第14天将小鼠断头处死，仔细剥离并取出各组动物的琼脂肉芽组织，剔除结缔组织，电子天平称重，并换算每100g体质重肉芽肿重量。

2.2 二甲苯所致小鼠耳肿胀

连续给药7d，末次给药后30min后，以二甲苯棉球接触小鼠左耳5s，15min后将动物拉颈处死，用直径7mm打孔器将小鼠双耳相同部位等面积切下称重，以左右两耳耳片重量差作为肿胀厚度。

2.3 甲醛所致小鼠足肿胀的影响

连续7d，末次给药1h后，小鼠右足注射0.05ml 2.5%甲醛致炎，致炎后分别于 0.5h、1h、2h、4h、6h用数显千分卡尺测定小鼠右足肿胀厚度。

2.4 镇痛实验(醋酸致小鼠扭体法)

每天灌胃给药1次，连续给药7d，末次给药后1h，小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.20ml/只，观察记录各组小鼠15min内的扭体次数并计算出每分钟扭体次数。

2.5 统计学方法

数据输入计算机，采用SPSS13.0软件统计，实验数据以均数±标准差(s)表示，根据方差齐性采用单因素方差分析(One-Way-ANOVN)。

3 结果

3.1 生津利咽含片对琼脂所致小鼠肉芽肿的影响

表1 生津利咽含片对琼脂所致小鼠肉芽肿的影响(s)

表1 生津利咽含片对琼脂所致小鼠肉芽肿的影响(s)

注:与蒸馏水对照组比较:*P<0.05，**P<0.01;与金果饮组比较:△P<0.05，△△P<0.01

组别 动物数(n)剂量(g/kg)肉芽肿(g/100g体重)蒸馏水对照组 10 —0.43±0.21生津利咽大剂量组 10 0.88 0.11±0.04**生津利咽中剂量组 10 0.44 0.17±0.06**生津利咽小剂量组 10 0.22 0.25 ±0.07**△金 果 饮 组 10 0.50 0.14±0.05**

3.2 生津利咽含片对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

表2 生津利咽含片对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(s)

表2 生津利咽含片对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(s)

注:与蒸馏水对照组比较:*P<0.05，**P<0.01;与金果饮组比较:△P<0.05，△△P<0.01

组别 动物数(n)剂量(g/kg)肿胀度(g)蒸馏水对照组 10 —0.0060±0.0020生津利咽大剂量组 10 0.88 0.0018±0.0006**生津利咽中剂量组 10 0.44 0.0018±0.0005**生津利咽小剂量组 10 0.22 0.0029±0.0011*△金 果 饮 组 10 0.50 0.0022±0.0007**

3.3 生津利咽含片对甲醛所致小鼠足肿胀的影响

表3 生津利咽含片对甲醛所致小鼠足肿胀的影响(s)

表3 生津利咽含片对甲醛所致小鼠足肿胀的影响(s)

注:与蒸馏水对照组比较:*P<0.05，**P<0.01;与金果饮组比较:△P<0.05，△△P<0.01

组别 动物数(只)剂量(g/kg)0.5h 1h 2h 4h 6h蒸 馏 水 对 照 组 10 — 0.75±0.29 0.63±0.22 0.72±0.25 0.79±0.26 0.75±0.20生津利咽大剂量组 10 0.880.10±0.03** 0.09±0.03** 0.16±0.07** 0.18±0.08** 0.17±0.08**△生津利咽中剂量组 10 0.440.10±0.05** 0.08±0.02** 0.08±0.01**△△ 0.15±0.02**△ 0.13±0.02**△生津利咽小量组 10 0.220.09±0.03** 0.11±0.04** 0.15±0.06** 0.21±0.07** 0.26±0.07**金 果 饮 组 10 0.500.08±0.03** 0.10±0.05** 0.16±0.07** 0.20±0.08** 0.24±0.09**

3.4 生津利咽含片对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

表4 生津利咽含片对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(s)

表4 生津利咽含片对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(s)

注:与蒸馏水对照组相比:*P<0.05，**P<0.01;与金果饮组比较:△P<0.05，△△P<0.01

组每分钟扭体次数蒸馏水对照组 10 —别 动物数(n)剂量(g/kg)1.95±0.35生津利咽大剂量组 10 0.88 0.92±0.23**生津利咽中剂量组 10 0.44 1.07±0.22**生津利咽小剂量组 10 0.22 1.28 ±0.26**△金 果 饮 组 10 0.50 0.96±0.31**

4 讨论

结果表明，生津利咽含片对二甲苯致小鼠耳肿胀具有良好的抑制作用，并且对甲醛致小鼠足肿胀具有良好的抑制作用，表明生津利咽含片对炎症早期的渗出有抑制作用，从而减轻或消除咽部黏膜弥漫性充血及组织内渗出液积聚而引起的黏膜肿胀。生津利咽含片能显著抑制琼脂致小鼠肉芽肿炎性反应增生，说明其对炎症后期的结缔组织增生有抑制作用。以上作用提示，生津利咽含片可能对急慢性咽炎均有一定的治疗作用。

慢性咽炎患者咽部常伴有微痛感。痛觉是一种复杂的感觉，常伴有不愉快的情绪反应。疼痛与炎症的关系是密不可分的，炎症介质如组胺、5-羟色胺、缓激肽、白三烯等均可激活伤害性感受器而产生疼痛作用。前列腺素虽不能引起明显的疼痛，但可降低痛觉感受器靶细胞的痛阈而对其他致痛因子有增敏作用。在本论文所采用的镇痛实验模型中，醋酸致小鼠扭体主要是间接通过腹腔产生急性炎症反应所致。实验结果发现，生津利咽含片能显著降低醋酸引起的小鼠扭体次数，提示其具有良好的镇痛作用。该作用有利于缓解慢性咽炎伴随的疼痛感觉。