应用HPLC测定米非司酮的含量

鄂立勋 魏强 朱 晶 阚朋甲

1 白城市食品药品监督管理局药品稽查分局（137000）

2 白城市食品药品检验所（137000）

米非司酮（Mifepristone，代号为RU486）是20世纪80年代初期由法国Roussel-Uclaf公司研制成功批准上市的抗早孕甾体化合物，它具有孕激素和抗肾上腺皮质激素的作用，在靶细胞上竞争性抑制孕激黄素、黄体期和妊娠期的激素，目前主要作为避孕药物。该药含量测定方法的研究是Roussel-Uclaf公司提供非水滴定法，但该法专属性差；Matlin提出用HPLC法分离RU486及其代谢物，未做含量测定[1-3]。本文选用C18色谱柱，以乙腈-水（75∶25）为流动相，苯佐卡因为内标，对国产RU486原料进行了含量测定。方法准确、快速、灵敏，为制定RU486质量标准提供了实验依据。

1 仪器、试剂及对照品

美国安捷伦AGILENT-1200型高效液相色谱仪。

乙腈色谱纯；其他试剂均为分析纯；水为纯化水，CQ250型超声波发生器（功率：500 W）。

RU486对照品（法国Roussel-Uclaf公司）；苯佐卡因（中国药品生物制品检定所）；国产RU486原料药。

2 色谱条件

色谱柱：AGILENT C18TC 5 μm（4.6 mm×25 mm）；流动相为乙腈-水（75∶25）（经脱气后使用）；流速1mL/min；检测波长302 nm。

3 内标选择

经大量筛选试验，选用苯佐卡因为内标较合适，分离度较好，且不影响杂质峰。色谱分离如图1。

图1 RU486及苯佐卡因HPLC色谱图

4 线性关系和校正因子

内标溶液的配制：精密称取苯佐卡因适量，加甲醇溶解并定量配制成每1mL中约含3mg的溶液。

RU486对照品溶液的制备：精密称取RU486对照品适量，用氯仿溶解并定量配制成每1mL约含3 mg的溶液。

精密吸取上述对照品溶液20、40、60、80、100μL，用甲醇稀释至刻度，摇匀。苯佐卡因内标溶液50μL，用甲醇稀释至刻度，摇匀。在上述色谱条件下进样5μL，并以重量比为横坐标，峰面积比为纵坐标绘图，得一通过原点的直线，回归方程y = 0.00196 + 0.8564x，r= 0.9999。结果表明，当进样量为5μL时，在0.06～0.3mg/mL范围内，RU486面积与浓度线性关系良好。

5 样品测定

精密称取RU486样品适量，用氯仿溶解并定量配制成每1mL中约含3mg的溶液，用微量进样器精密吸取该溶液60μL，置1mL容量瓶中，在精密加入苯佐卡因内标溶液50μL，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件下测得国产RU486原料药品的含量，结果如表1。

表1 国产RU486原料药含量（%，n =3 ）

6 讨 论

RU486作为抗早孕药物，含量测定方法尚未见文献报道，本为采用反相高效液相色谱法，以苯佐卡因为内标，测定了各批RU486的含量，结果较满意。

与非水法相比，本文建立的高校液相色谱法灵敏、准确、快速，完成一次分析只需10min。

苯佐卡因内标与RU486线性关系良好，测得RU486含量较满意，建议该法可应用于制定RU486质量标准。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2005版二部[S].北京:化学工业出版社,2005:287.

[2]姜民慧,翁梨驹.全国米非司酮在妇产科的应用及其机理探讨学术研讨会纪要[J].中华妇产科杂志,1999,34(5):266-267.

[3]王慧群,靳家玉.米非司酮对子宫肌瘤及子宫肌层组织的影响[J].中华妇产科杂志,2000,35(2):79-81.