高效液相色谱法测定盐酸利多卡因胶浆的含量

董 煜

（辽宁省大连市药品检验所，辽宁 大连 116021）

盐酸利多卡因胶浆是局部麻醉药，临床上用于消化道内窥镜检查时的局部麻醉。药典中[1]采用有机溶剂提取蒸干后电位法测定含量。本试验采用高效液相色谱（HPLC）法测定盐酸利多卡因含量，具有简单、灵敏度高、专属性强、准确可靠等优点，报道如下。

1 仪器与试药

Waters2695型高效液相色谱仪（二极管阵列紫外检测器）。盐酸利多卡因胶浆（A1，A2，市售品）；盐酸利多卡因对照品（批号为100341-200301，含量为93.5%，中国药品生物制品检定所）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：Alltima C18不锈钢柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相[1]：磷酸盐缓冲液（取1 mol/L磷酸二氢钠溶液1.3 mL和0.5 mol/L磷酸氢二钠溶液32.5 mL，置1 000 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用磷酸调 pH至 8.0）-乙腈（50∶50）；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：20 μL。在此色谱条件下，盐酸利多卡因峰的保留时间约为13 min，理论塔板数按盐酸利多卡因峰计为7 000。高效液相色谱图见图1。

2.2 溶液制备

精密称取样品1 g（约相当于盐酸利多卡因20 mg），置10 mL量瓶中，加流动相适量溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得供试品溶液。另取对照品适量，精密称定，用流动相溶解并定量稀释每1 mL约含2 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察：取盐酸利多卡因对照品约53.00 mg，精密称定，置25 mL量瓶中，加流动相适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀。在上述色谱条件下，分别进样 10，16，20，24，30 μL（n=3），记录色谱图，以质量浓度 X为横坐标、峰面积 Y为纵坐标绘制标准曲线，线性回归方程为 Y=2 685 764 X+65 301，r=1.000 0（n=6）。结果表明质量浓度在0.991～2.973 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

加样回收试验:取已知含量的样品6份（A1），精密称定，按2.2项下方法制备供试品溶液，精密量取续滤液5.0 mL，各精密加入对照品溶液5.0 mL，摇匀，分为3组，按2.1项下色谱条件测定，3 组样品分别进样 16，20，24 μL（相当于标示量的 80% ，100% ，120%），计算回收率。结果见表1。

图1 高效液相色谱图

表1 盐酸利多卡因加样回收试验结果（n=6）

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，1，2，4，8 h时进样。结果峰面积基本不变，表明溶液稳定性良好，能满足测定要求。

精密度试验：取同一对照品溶液，连续5次进样测定。结果峰面积的 RSD为0.9%（n=5）。

2.4 样品含量测定

取样品，依法制备供试品溶液并测定，按外标法以峰面积计算含量，与电位法[1]测定结果比较，见表2。

表2 样品含量测定结果

3 讨论

采用有机溶剂提取蒸干后电位法测定含量，操作烦琐、费时、误差大。采用HPLC法测定其含量，简单、灵敏度高、专属性强、准确可靠。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[M].北京：化学工业出版社，2005：518.