不同培养基对硫酸庆大霉素注射液含量的影响

何作民，申 放，黄旺潮

（广东省佛山市药品检验所，广东 佛山 528000）

硫酸庆大霉素为氨基苷类抗生素，2005年版《中国药典（二部）》规定[1]其含量测定方法为抗生素微生物检定法，包括管碟法和浊度法。管碟法是目前最常用的方法。由于管碟法测定抗生素效价的影响因素较多，除检验操作技术、抑菌圈的测量、供试品与标准品溶液的配制等人为因素外，培养基的质量也是重要的影响因素之一。鉴于目前生产干粉培养基的厂家较多，为探讨培养基对检定结果的影响情况，笔者对使用的干粉培养基进行了比对检测分析，报道如下。

1 仪器与试药

ZY-300IV型多功能微生物自动测量分析仪（北京先驱威锋技术开发公司）；Metlier AE240型电子天平；HHBⅡ420型电热恒温培养箱。硫酸庆大霉素注射液（规格为2 mL∶4万单位，批号为0601022，市售品）；庆大霉素标准品（中国药品生物制品检定所，批号为130326-200314）；培养基为干粉抗生素检定培养基I号（A厂产品批号分别为 050304，060328，060613，060614；B 厂产品批号为20060213）；磷酸氢二钠、磷酸二氢钠均为分析纯；短小芽孢杆菌[CMCC（B）63202]（中国药品生物制品检定所）。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

精密量取硫酸庆大霉素注射液，精密称取庆大霉素标准品适量，分别加灭菌水定量制成每1 mL中约含1 000单位的溶液，临用前用灭菌磷酸盐缓冲液（pH=7.8）稀释至每1 mL含5单位和10单位的溶液，作为供试品溶液和标准品溶液。

2.2 培养基配制

称取干粉抗生素检定培养基I号适量，按说明书配制，调节最终pH为7.9～8.0。

2.3 检验方法

按照《中国药典（二部）》抗生素微生物检定法（附录ⅪA）管碟法的二剂量法，以短小芽孢杆菌为试验菌，以干粉抗生素检定培养基I号为检定培养基，用ZY-300 IV型多功能微生物自动测量分析仪测量抑菌圈，硫酸庆大霉素注射液按庆大霉素计算标示量的百分含量，将符合药典要求的试验结果进行数据统计分析。

2.4 检验结果

采用不同厂家及同一厂家不同批号的培养基检测硫酸庆大霉素注射液的含量，比较不同批号间的结果差异，结果见表1。两人采用同一批号培养基，在相同条件下检测硫酸庆大霉素注射液的含量，比较不同人员测定结果的重现性，结果见表2。

表1 采用不同厂家及同一厂家不同批号培养基的测定结果

表2 不同操作人员检测结果

3 讨论

从测定结果可见，不同厂家与同一厂家生产不同批号的培养基检测结果均有差异，其中A厂家060613批与B厂20060213批产品的平均含量相差超过5%；同厂家生产的不同批号培养基测定的结果也有明显差异，其中050304批与060613批产品的平均含量相差4%。不同人采用同一批号培养基在相同条件下检测同一批的供试品，结果差异不明显，重现性较好。

目前，培养基生产厂家较多，各厂家所选用的原料、生产工艺和条件、控制培养基的pH等不同，即使同一厂家不同批次的产品也会有差别，这将会导致不同厂家或同一厂家生产不同批号的培养基质量会有一定的差异。由于培养基质量的差异会直接影响抗生素效价检测结果的准确性，尤其对仲裁或判断边缘产品是否符合规定时加大了难度。因此，笔者认为，培养基除用于药品检验外，还广泛用于医院临床检验、预防医学、动植物检验、微生物学等各领域，为了减少由培养基引起的实验误差，建议对各种培养基特别是用于含量测定的培养基制订国家质量标准。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[M].北京：化学工业出版社，2005：731，附录Ⅺ.