广西甜茶提取液对家兔离体小肠收缩运动的研究

赵丽平 陆雪英 陈秋月 蒋瑞金 晋玲 赵善民 黄彦峰

广西甜茶(Rub us suavissimus S.Lee)是蔷薇科悬钩子属植物一个新种，主产于广西桂林、金秀、桂平等县。甜茶中含有甜茶素、茶多酚、蛋白质、氨基酸、维生素、黄酮以及铁、锌、钙等矿物质[1]。目前，有研究报道甜茶提取物有抗过敏和舒张支气管作用[2-4]，国外报道，临床上每天服用甜茶提取物可预防或改善炎症、喉痛、花粉过敏和感冒引起的咳嗽[5]，但甜茶提取液对小肠收缩活动的影响国内还未见报道。因此，本实验研究了甜茶提取液对离体小肠收缩活动的影响，并初步探讨其机制，为甜茶的进一步开发提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 药品 市售甜茶叶(1.5g/包，广西桂林市平乐县大发永康甜茶厂，批号：20080801)，1∶10000的乙酰胆碱液(Ach，上海国药集团化学试剂有限公司，批号：20061114)，台氏液(所用试剂均为分析纯临用时现配[6])。

1.1.2 实验动物 家兔4只，体重为2～3kg，雌雄不限，由右江民族医学院实验动物中心提供。

1.1.3 主要仪器 BL-420生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司)，CW-2平滑肌槽恒温仪(张家港市生物医学仪器厂)。

1.2 实验方法

1.2.1 广西甜茶叶提取液的制备 取广西甜茶叶21g，加500ml水，浸泡30min，武火煮沸后转文火煎煮20min，过滤，将滤出的茶叶再加250ml水文火煎煮20min，过滤，合并两次滤液，定容为1g/ml，实验时稀释为0.5g/ml。

1.2.2 兔离体小肠标本的制备 实验兔禁食24h，自由饮水，实验前1h喂食，实验时，钝击后枕致死，剖开腹腔，分离十二指肠、空肠、回肠，并各取一段10cm肠段，于室温台氏液中洗去内容物，将肠段剪成2cm的小段，分别置于培养皿中，通入空气，平衡30min。

1.2.3 甜茶提取液对离体十二指肠收缩活动的影响 取一段十二指肠肠管置于盛有38℃台氏液的平滑肌槽内，一端固定在玻璃通气钩上，另一端固定在张力换能器上，与BL-420生物机能实验系统相连，维持浴槽内台氏液温度(38±0.5)℃，并通入空气(1个气泡/s)，调节肠肌收缩前负荷为2g，平衡10min，待基线稳定后，记录正常小肠平滑肌收缩曲线。然后依次滴加0.5g/mL的甜茶提取液0.2ml、0.4ml、0.6ml，每次加药前，均要用38℃的新鲜的台氏液冲洗小肠肌3次，待小肠收缩恢复到用药前水平，再加入下组药液，观察每次用药前后的小肠平滑肌收缩曲线的变化。在滴加0.6ml甜茶提取液，观察有效果后，滴加0.1‰乙酰胆碱0.1ml(终浓度为0.2mg/L)，观察其曲线的变化，记录各组用药前后30s小肠收缩频率和幅度的变化。

1.2.4 甜茶提取液对离体空肠、回肠收缩活动的影响 除将十二指肠分别换成空肠和回肠外，其实验方法同1.2.3项下方法，观察每次用药前后小肠平滑肌收缩曲线的变化和滴加乙酰胆碱后其曲线的变化。并记录各组用药前后30s小肠收缩频率和幅度的变化。

1.3 统计学方法 采用SPSS统计软件进行统计学分析，实验数据以均数±标准差(±s)表示，采用t检验进行分析比较。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 甜茶提取液对离体十二指肠收缩活动的影响 三个剂量组(低剂量组：0.2ml、中剂量组：0.4ml、高剂量组：0.6ml)的甜茶提取液均能使离体十二指肠的收缩幅度和收缩频率降低，说明甜茶提取液对离体十二指肠的收缩活动有抑制作用。在收缩幅度方面，用药前后比较，三个剂量组均有高度显著性差异(P＜0.01)。在收缩频率方面，用药前后比较，低剂量组无变化(P＞0.05)，中、高剂量组有显著性差异(P＜0.05)，其中高剂量组抑制程度最大。滴加乙酰胆碱后，十二指肠的收缩活动增强。见表1，图1。

2.2 甜茶提取液对离体空肠收缩活动的影响 三个剂量组的甜茶提取液均能使离体空肠的收缩幅度和收缩频率降低，说明甜茶提取液对离体空肠的收缩活动有抑制作用。在收缩幅度方面，用药前后比较，三个剂量组均有高度显著性差异(P＜0.01)。在收缩频率方面，用药前后比较，低剂量组无变化P＞0.05),中高剂量组有显著性差异(P＜0.05)。其中高剂量组抑制程度最大，见表2。滴加乙酰胆碱后，空肠的收缩活动增强。

2.3 甜茶提取液对离体回肠收缩活动的影响 三个剂量组的甜茶提取液均能使离体回肠的收缩幅度和收缩频率降低，说明甜茶提取液对离体回肠的收缩活动有抑制作用。在收缩幅度方面，三个剂量组均有高度显著性差异(P＜0.01)，在收缩频率方面，只有高剂量组的P值小于0.01，其他两组无统计学意义(P＞0.05)，如表3。滴加乙酰胆碱后，回肠的收缩活动增强。

3 讨论

表1 十二指肠不同剂量组实验前后收缩幅度、收缩频率的比较(±s)

表1 十二指肠不同剂量组实验前后收缩幅度、收缩频率的比较(±s)

注：与给药前后比较，at=6.163，bt=7.167，ct=6.212，P均＜0.01；st=1.844，P＞0.05；et=2.646，ft=7.426，P均＜0.05。

组别 剂量(ml) n 收缩幅度(g) 收缩频率(次/分)给药前 给药后 给药前 给药后低剂量 0.2 10 2.95±0.65 2.42±0.52a 15.90±1.45 13.50±4.81d中剂量 0.4 10 2.90±0.58 2.18±0.45b 16.80±1.32 10.50±7.47e高剂量 0.6 10 2.82±0.54 2.11±0.36c 17.40±1.51 3.00±6.11f

表2 空肠不同剂量组实验前后收缩幅度、收缩频率的比较(±s)

表2 空肠不同剂量组实验前后收缩幅度、收缩频率的比较(±s)

注：与给药前后比较，at=5.173,bt=7.848,ct=7.520，P均＜0.01；dt=1.801，P＞均0.05；et=2.660,ft=3.078，P均＜0.05。

组别 剂量(ml) n 收缩幅度(g) 收缩频率(次/分)给药前 给药后 给药前 给药后低剂量 0.2 10 3.18±0.42 2.61±0.21a 15.70±1.25 12.9±4.91d中剂量 0.4 10 3.09±0.39 2.26±0.21s 16.20±1.03 1.10±6.17e高剂量 0.6 10 2.82±0.30 2.07±0.30c 15.10±1.45 9.30±5.85s

表3 回肠不同剂量组实验前后收缩幅度、收缩频率的比较(±s)

表3 回肠不同剂量组实验前后收缩幅度、收缩频率的比较(±s)

注：与给药前后比较，at=11.661,bt=8.939,ct=8.447，P均＜0.01；dt=0.721,et=1.808，P均＞0.05；ft=3.383，P＜0.01。

组别 剂量(ml) n 收缩幅度(g) 收缩频率(次/分)给药前 给药后 给药前 给药后低剂量 0.2 10 2.92±0.21 2.57±0.25a 15.50±3.10 14.90±2.28d中剂量 0.4 10 2.72±0.29 2.27±0.27b 16.20±3.61 12.10±5.49e高剂量 0.6 10 2.65±0.30 2.09±0.26c 16.30±4.85 9.50±6.80f

广西甜茶，在我国80年代初药物调查时才开始发现。甜茶叶在广西民间应用已久，民间入药用于补肾降压，被誉为神茶，与罗汉果、合浦珍珠、广西香料等齐名为广西十大名品。经研究甜茶有降血压、降血糖的作用，并有促进新陈代谢、治疗胃酸过多等功效，可以作为糖精和蔗糖的替代品用于食品、医药等行业[7-8]。长期以来除当茶叶饮用之外，还可药用。其叶具有清热润肺、祛痰止咳[9]等功效。

图1 乙酰胆碱对甜茶提取液肠抑制作用的影响

本实验采用离体小肠平滑肌收缩幅度和收缩频率作为观察指标，能较为敏感地反映小肠收缩幅度和收缩频率的变化。此次实验结果显示，给药后不同部位的离体小肠紧张性降低，收缩幅度明显减小，而对收缩频率的影响，低剂量组无变化，中、高剂量组能使收缩频率减少。此实验表明广西甜茶提取液对不同部位的离体小肠运动均有明显的抑制作用；使肠管平滑肌收缩幅度减少，肌张力降低，不同部位肠段的收缩频率与药物浓度之间存在量效关系，但广西甜茶提取液对小肠不同部位的运动影响不存在差异。

乙酰胆碱是胆碱能神经末梢释放的一种兴奋性肠管神经递质，具有重要的胃肠道运动调节功能。乙酰胆碱可激动胃肠平滑肌上的M受体，通过cAMP作为第二信使的细胞膜信号传导，导致钙离子内流，兴奋平滑肌并产生强烈的收缩运动[10]。实验表明广西甜茶提取液与乙酰胆碱互为拮抗作用，表现为甜茶提取液所致的抑制收缩幅度作用被乙酰胆碱缓解，可能与竞争M受体有关。本实验为研究甜茶治疗消化道疾病提供了依据。

[1]黄汉强.甜茶应用研究[J].时珍国药研究,1996,7(2):117-118.

[2]陈奇.中药药理实验[M].北京:人民卫生出版社,1994:70.

[3]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993:669.

[4]廖曼云,覃国忠.甜茶的毒理学实验研究[J].广西植物,1985,5(1):43.

[5]彭亚贞.具有消炎、抗过敏及抑制酸分解作用的甜茶提取物[J].国外医药,植物药分册,1995,10(5):236.

[6]陈世民,符健,赵善民,等.实验生理科学[M].上海:上海科学技术出版社,2003:166-167.

[7]邓绍林.广西甜茶叶片的营养成分及开发利用价值研究[J].中国林副特产,2000,(3):18-19.

[8]李莉,何克新.甜茶提取物的医学研究现状[J].现代医药卫生,2006,22(2):199-201.

[9]钟正贤,周桂芬,陈学芬,等.广西甜茶提取物药理研究[J].时珍国医国药,2000,11(10):807-808.

[10]王蓓蓓,楚更五,郑梅.痛泻药方与乙酰胆碱对家兔离体小肠平滑肌作用的研究[J].浙江中医杂志,2007,42(4):235-237.