白介素细胞因子在变应性鼻炎的作用机理

林志斌 李添应 陈冬

变应性鼻炎(allergic rhinitis，AR)又称过敏性鼻炎，是发生在鼻黏膜的Ⅰ型变态反应。特应性个体在接触致敏原后由IgE介导的介质(主要是组胺)释放、并有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜慢性炎症反应性疾病，可引起多种并发症。近年来，随着生活环境的变化，其发病率呈上升趋势。有研究指出，变应性鼻炎约占全部鼻炎的40%。变应原经呼吸道进入人体，经巨噬细胞处理，刺激B淋巴细胞变为浆细胞，后者产生特异性IgE抗体。当变应原物质再次进入鼻黏膜，使肥大细胞和嗜碱细胞细胞膜结构发生变异，释放组胺、白细胞三烯、五羟色胺等多种化学介质，使小血管扩张，血管通透性增高，渗出增加，炎性细胞浸润(以嗜酸细胞为主)，组织水肿，神经末梢兴奋性增强等，上述病理变化即可导致相应的临床症状和体征。

近年来有研究指出，变应性鼻炎发病与白细胞介素等细胞因子有关。本实验分析了变应性鼻炎患者外周血中单个核细胞，测定诱导上清液中白介素等细胞的水平，探讨其在变应性鼻炎发病中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2006年2月～2009年12月我院耳鼻喉科收治的变应性鼻炎患者86例作为实验组，所有患者的诊断均符合1997年中华医学会耳鼻咽喉科学分会修订的关于变应性鼻炎的诊断标准[1]。86例患者中男性45例，女性41例；年龄12～36岁，平均(27.65±5.62)岁；病程为1.5～6.5年。选取同期来我院体检的健康者43例作为对照组，其中男性28例，女性15例，年龄14～38岁，平均(28.32±5.83)岁。两组患者在性别、年龄等一般状况比较，P＞0.05,差异无统计学意义，具有可比性。

表1 两组受试者白介素等细胞因子的检测结果(±s，pg/ml)

表1 两组受试者白介素等细胞因子的检测结果(±s，pg/ml)

注：与对照组比较, P＜0.05,差异有统计学意义。

组别 病例数 IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IFN-γ实验组 86 68.5±10.8 276.5±2.3 989.8±52.9 325.8±20.8 65.4±6.8对照组 43 73.6±11.2 84.9±15.6 552.8±108.9 102.8±45.8 78.9±4.6

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准 ①符合1997年中华医学会耳鼻咽喉科学分会修订的关于变应性鼻炎的诊断标准；②性别不限；③年龄16～70周岁；④病程＞1年者；⑤所有受试者在受检前1周均停用任何药物。

1.2.2 排除标准

1.2.2.1 不符合诊断标准及纳入标准者。

1.2.2.2 虽符合诊断标准,但有下列情况之一者 ①需长期服用阿司匹林或糖皮质激素的患者；②伴发支气管哮喘、特异性皮炎的患者；③合并慢性鼻窦炎、鼻息肉或鼻中隔明显偏曲等鼻病者;④伴发心、脑、肾、肝等脏器器质性疾病者; ⑤妊娠期患者。

1.3 方法

1.3.1 实验仪器及试药 白介素定量酶联免疫试剂盒购自武汉新启迪生物科技有限公司,37℃电热恒温水温箱(上海棱谱仪器仪表有限公司),全自动洗板机(北京八方世纪科技有限公司),全自动酶联免疫分析仪(美国伯乐公司生产的CODA型) 。

1.3.2 操作方法 抽取受试者外周血3ml，置于肝素抗凝管中，加等体积D-Hanks液稀释抗凝血，用淋巴细胞分离液制备PBMCS，经离心洗涤后，用20% FCS-1640液调整浓度为5×106/ml，于24孔板中,加变应原粉尘螨诱导剂,置于37℃孵育箱中孵育60min，取诱导上清液检测细胞因子水平。

采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)进行细胞因子检测，严格按照说明进行操作,计算单位:pg/ml。在相应细胞因子检测板中加入对应浓度的标准品及待测样品，在室温中反应60min，洗板后，加生物素化的抗人白介素抗体，常温反应60min，加入酶联物，室温反应，加相应的显色剂显色，用终止液终止反应，于酶标仪上在450nm处测A值，绘制标准曲线图并通过标准曲线求出样品中相应细胞因子的浓度。

1.4 统计学方法 数据处理应用SPSS12.0统计软件，计量资料用均数±标准差(±s)表示，计数资料用率或百分比表示，等级资料采用秩和检验,多个均数间两两比较采用方差齐性检验、方差分析及q检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两组受试者白介素等细胞因子的检测结果，见表1。由表1可知,变应性鼻炎患者血清IL-2、IFN-γ水平低于对照组,二者分别比较，P＜0.05，差异均有统计学意义；实验组受试者血清IL-4、IL-5、IL-6水平与对照组比较显著增高，P＜0.05，差异均有统计学意义。

3 讨论

变应性鼻炎的发病机理目前尚未完全明确。目前，多数学者认为，其发生发展多与IgE参与的Ⅰ型变态反应有关[1]。T细胞系列中的Th细胞及其分泌的细胞因子失衡在变应性鼻炎的发病中起重要作用，Th1细胞和Th2细胞间的免疫反应失衡可能是导致变应性鼻炎发病的重要免疫学基础。IL-2、IFN-γ主要反映Th1细胞水平的细胞因子；IL-4、IL-5是主要反映Th2细胞水平的细胞因子；IL-6是处于分化晚期的B细胞生长因子，主要反映疾病是否处于急性期[2]。Th1/Th2 细胞因子间的平衡对人体免疫功能的调控有重要意义。IL-2、IFN-γ能增Th1细胞的活性，增强细胞免疫功能；并能够通过抑制Th2细胞增殖的作用，抑制体液免疫的反应性。它还能够抑制Th2细胞产生IL-4等细胞因子，对疾病的转归具有正性调节的作用[3]。IL-4、IL-5增加，提示Th2细胞介导的免疫应答增加[4-5]。

本实验结果表明，变应性鼻炎患者血清中IL-4、IL-5的水平显著高于对照组, IL-2、IFN-γ的水平显著低于对照组,这几种细胞因子的异常反映了变应性鼻炎患者免疫调节功能的紊乱,并且表明Th2免疫应答增强, IL-4、IL-5增加,促进了炎症的发生发展, IL-6增加则反应疾病处于急性期。

综上所述,本研究通过对变应性鼻炎患者血清白介素等细胞因子的检测，探讨了其与变应性鼻炎发生发展的关系。IL-4、IL-5增加反应的Th2细胞的高表达及IL-2、IFN-γ减少反应的Th1细胞的低表达，与变应性鼻炎发生发展密切相关，对本病的临床诊断并判断疗效提供了免疫学依据，这可能为变应性鼻炎临床辨证治疗提供较为客观的免疫学指标。

[1]Togias A. Rhinitis and asthma: evidence for respiratory system integration[J].J Aller Clin Immu,2003,111(6):1171-1183.

[2]李亚灏,林向阳.慢性支气管炎急性期患者血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α水平变化的研究[J].海南医学,2008,19(5):14-16.

[3]王祥.IL-3,IL-5和GM-CSF受体的共同β链反义寡核苷酸抑制抗原激发的嗜酸粒细胞增多症和气道高反应性[J].国外医学:内科学分册,2003,30(3):132-133.

[4]Skapenko A,Gerald U,Niedobitek JR,et al.Generation and regulation of human th1-biased immune responses in vivo:a critical role for IL-4 and IL-10[J].J Immunol,2004,172(10):6427-6434.

[5]刑同京,章廉.Th 类细胞极化群体的基础与临床[M].北京:军事医学科学院出版社,2002:108-183.