妇得乐颗粒的质量标准研究

宋卫青，李 丽

（山西省活血化瘀研究所，山西 太原 030001）

妇得乐颗粒由丹参、赤芍、金银花等多味药物组成，具有活血化瘀、清热散结、理气止痛之功效，用于治疗气滞血瘀型盆腔炎及炎性包块。为控制产品质量，确保临床疗效，本文建立了用薄层色谱法（TLC）鉴别妇得乐颗粒中丹参、赤芍的方法，并采用高效液相色谱法对丹参酮ⅡA的含量进行测定。

1 实验材料

1.1 实验仪器

HP1100高效液相色谱仪（美国），HP Chemstation system化学工作站，939薄层自动铺板器（重庆南岸贝尔德仪器技术厂），SB3200超声处理器（上海必能信仪器厂），LD4-2离心机（北京医用离心机厂），微量进样器（上海医用激光仪器厂）。

1.2 药品与试剂

妇得乐颗粒由山西省活血化瘀研究所研制，丹参酮ⅡA对照品由中国生物制品检定所提供，硅胶G为青岛海洋化工厂生产，化学试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 丹参的鉴别

取本品内容物4 g，研细，加水10 mL搅拌使溶解。用稀盐酸调至PH为2，加醋酸乙酯20 mL提取1次，醋酸乙酯层蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取丹参对照药材1 g，加水煎煮2次，每次0.5 h。合并煎液，滤过，取滤液，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005版一部附录 VIB）［1］试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液各2 μL，点于同一含羧甲基纤维素钠的硅胶G板上，以氯仿-丙酮-甲酸（20∶5∶2.5）为展开剂展开，取出，晾干。置氨气中熏，放置15 min～20 min后，置紫外灯（365 nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。结果见图1。

2.2 赤芍的鉴别

取本品10 g，研细，加入饱和的正丁醇充分搅拌，超声处理30 min，倾出上清液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次10 mL，正丁醇层蒸干。残渣加甲醇适量溶解，加于已处理好的中性氧化铝柱（100目～200 目，2 g，内径 1.5 cm）上，用甲醇洗脱，收集洗脱液，回收甲醇，残渣加无水乙醇使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加无水乙醇制成每1 mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液、对照品溶液各5 μL，点于同一含羧甲基纤维素钠的硅胶G板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲酸（40∶5∶10∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干。 喷以 2%香草醛硫酸溶液，105℃烘至显色清晰。日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。结果见图2。

图1 丹参的TLC色谱图

图2 赤芍的TLC色谱图

2.3 丹参酮ⅡA含量测定

2.3.1 色谱条件 色谱柱：DiamonsiL C18；柱温：室温；流动相：甲醇-水（75∶25）；流速：1.0 mL/min；检测波长：270 nm。

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品10.00 mg，置100 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2 mL，置10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.3.3 供试品溶液的制备 取本品1.0 g，精密称定，置50 mL容量瓶中，精密加甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理20 min，放冷；加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得。

2.3.4 阴性对照溶液的制备 取阴性样品 （缺丹参），按2.3.3项方法制备，即得阴性对照溶液。

2.3.5 线性关系考察 精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液 5 μL、10 μL、15 μL、20 μL 进样，依法测定，以丹参酮ⅡA含量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为Y=3499.881X＋3.898，r=0.9993，结果表明，丹参酮ⅡA 在 0.039 μg ～0.401 μg范围内具有良好的线性关系。

2.3.6 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液10μL，重复进样5次，结果峰面积值的RSD为1.87%。

2.3.7 稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液10 μL，每间隔0.5 h进样一次，3 h内共进样7次。测定结果表明，丹参酮ⅡA峰面积值基本不变，RSD为0.89%。

2.3.8 重现性试验 取本品内容物1.0 g，精密称定，共取5份，分别按供试品溶液制备方法进行提取，含量测定，结果为RSD为1.55%。

2.3.9 加样回收率试验 分别取已知含量的样品6份各1.0 g，精密称定，分别精密添加一定量的对照品，按供试品溶液制备方法进行提取，含量测定。结果见表1。

表1 加样回收率试验结果 （n=6）

2.3.10 样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL按上述色谱条件测定。结果三个批号 20070121、20070401、20070630妇得乐颗粒中丹参酮ⅡA含量分别为9.12 mg、9.02 mg和10.01 mg。

2.3.11 空白试验 取阴性对照品溶液，依法测定，结果在丹参酮ⅡA峰相应的保留时间无干扰。

3 讨 论

丹参的鉴别中，丹参的对应成分为水溶性成分，方法简便，斑点明晰，灵敏度高，重现性良好，阴性对照无干扰，喷以10%氢氧化钾溶液，荧光斑点更加明亮。其余药味的薄层鉴别及丹参酮ⅡA含量测定也取得了满意的效果，可作为妇得乐颗粒的质量控制方法。

［1］中华人民共和国药典委员会.中国药典（一部）［S］.北京：化学工业出版社，2005：附录VIB.