胆汁标本细菌培养鉴定和药敏结果分析

彭卫华，廖晚珍，余 阳，陈开森，胡雪飞，胡妮娅

(南昌大学第一附属医院检验科，江西 南昌 330006)

胆道感染是常见疾病，抗生素的应用是必不可少的，随着抗生素的广泛应用，尤其是近年出现的滥用状况，使细菌耐药性不断增多，因而细菌培养和药敏监测更为重要，本文回顾性分析我院胆道感染患者胆汁标本的细菌培养及药敏试验结果，为临床医生合理使用抗生素提供依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2008年6月至2010年6月南昌大学第一附属医院胆道感染患者胆汁标本中分离的病原菌。

1.2 仪器和试剂 细菌鉴定和药敏试验采用法国梅里埃公司的VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定仪，专用G-杆菌鉴定卡GN和药敏卡GN13，G＋球菌鉴定卡GP和药敏卡P535。血琼脂平板、巧克力平板为英国OXOID公司哥伦比亚基础琼脂，中国兰平板为杭州微生物试剂有限公司产品。

1.3 质控菌株 金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC33186。

1.4 方法

1.4 .1 细菌培养及鉴定 将无菌采集的胆道感染患者胆汁标本注入无菌管或增菌培养瓶内，按常规培养方法及时接种于血平板、中国兰和巧克力平板，35℃孵育18～24h，如有细菌生长，采用VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定和药敏试验。

1.4 .2 分析方法 耐药结果分析采用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET 5.4软件进行分析。

2 结果

2.1 细菌分离培养结果 339份胆汁标本中178份阳性，其中19份为2种细菌混合感染，总阳性率为52.5%、共分离出197株需氧菌和真菌，其中革兰阴性杆菌151株(占76.6%)，革兰阳性球菌44株(占22.3%)、假丝酵母菌2株(占1.1%)。引起胆道感染最多见的有大肠埃希菌86株占43.6%，其次是肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌各占8.6%，产ESBLs大肠埃希菌47株(54.6%)，肺炎克雷伯菌5株(29.4%)；粪肠球菌和屎肠球菌分别占7.6%和6.6%，各病原菌构成比见表1。

2.2 药敏试验结果 大肠埃希菌和肺炎克雷菌对阿米卡星、亚胺培南和美罗培南敏感性最高，其余都有不同程度耐药，阴沟肠杆菌对亚胺培南，美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦最敏感。肠球菌敏感性最高的是替考拉宁(耐药率为零)，其次是万古霉素和利奈唑烷耐药率为8.6%，几种多见菌耐药率见表2、表3。

3 讨论

胆道感染是常见的感染性疾病，多来源于肠道细菌的逆行感染，病原菌种类和肠道细菌大致相同。本文回顾性分析了胆汁标本普通培养分离细菌的种类及主要细菌的耐药性，从以上结果显示，本组细菌培养阳性率为52.5%，低于年华等[1]报道的70.9%，与聂哲群等[2]和陆屏等[3]报道的51.2%和53.0%相近，主要病原菌为革兰阴性杆菌占76.6%，以大肠埃希菌为主(占43.6%)高于文献报道[1]，其次为肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌(各占8.6%)。革兰阳性球菌占(22.3%)，主要为粪肠球菌(7.6%)，屎肠球菌(6.6%)，其它肠球菌(3.5%)，略低于文献报道[1，3]，但肠球菌总感染率相符[4]。另外，本组资料中有19份胆汁为两种细菌混合感染占(10.7%)，主要原因可能是抗生素药品的滥用，引起肠道常见菌群的混乱，增加了细菌的耐药性所致。

表1 197株病原菌构成比

表2 主要G－杆菌的耐药率

表3 肠球菌耐药率

药敏结果显示，86株大肠埃希菌和肺炎克雷菌对阿米卡星和碳青酶烯类药物未检出耐药株。大肠埃希菌耐药率较低的有呋喃妥因(3.5%)。哌拉西林/他唑巴坦(5.8%)和妥布霉素(11.6%)，其余抗生素都有较高的耐药，特别是氨苄西林耐药率高(75.6%)、喹诺酮类，头孢二、三代都在(50～70%)，可能由于产ESBLs大肠埃希菌(54.6%)含量较高所致。肺炎克雷伯菌对氨苄西林呈天然耐药，其产ESBLs株也有(29.4%)，抗生素的耐药率较大肠埃希菌低，但呋喃妥因、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦比前者要高许多。阴沟肠杆菌的耐药率也普遍高，除外碳青霉烯类和哌拉西林/他唑巴坦，总的来说，阿米卡星，碳青霉烯类药和哌拉西林/他唑巴坦可作为胆道感染肠杆菌科细菌的经验用药。肠球菌属除对替考拉宁未检出耐药株，3株万古霉素和利奈唑烷耐药株为铅黄肠球菌和醇鸡肠球菌，其它肠球菌对万古霉素都敏感，但常用的其它抗生素有较高的耐药性 (30～90%)，包括高水平庆大霉素和高水平链霉素，因此，当治疗胆系感染经验用药的同时，要尽早做细菌学检验及药敏试验，根据药敏结果，及时调整敏感用药，尽量减少耐药菌的发生。

[1]年 华,丁丽萍,褚玉卓.608份胆汁标本中分离细菌菌谱及其药敏结果分析[J].微生物学杂志,2009,29(2):93-96.

[2]聂哲群,尹家俊.胆汁中细菌培养及药敏分析[J].中国微生物学杂志,2004,16(3):179.

[3]陆 屏,蔡叶樨,杨丹蓉.128例胆道疾病患者胆汁细菌培养及药敏分析[J].中华医院感染学杂志,2009,19(11):1442-1443.

[4]李 涛,熊自忠,沈继录,等.胆汁细菌种类及主要分离菌株耐药性分析[J].中国微生态学杂志,2009,21(12):1080-1083.