李国华,史秋梅
(河北科技师范学院动物科技学院,河北昌黎066600)
水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的貂的一种急性败血性传染病。绿脓杆菌又称铜绿假单孢杆菌,为假单胞菌属,为需氧的革兰阴性杆菌,不产生芽孢。触酶阳性,广泛存在于水、土壤、空气、动物的肠道和皮肤,为一种条件性致病菌。
水貂出血性肺炎主要并多发于夏、秋季节,特别是阴冷潮湿的9~10月份水貂换毛期,若有水貂发生此病,其脱下的毛在场内四处飞扬,黏附于毛上的细菌随时可污染饲料和饮水而引起全群感染。
近年来,随着集约化养殖的不断扩大,水貂的出血性肺炎发病率显著上升,往往会造成暴发。饲料、饮水污染、环境恶劣、营养不良、疲劳运输等应激因素是造成该病暴发的原因所在。应激因素使机体对本菌的入侵缺乏足够的抵抗力,从而导致发病。
2009年9月,秦皇岛市昌黎县城关养殖户饲养的900只水貂暴发了一种以呼吸困难、咯血、死前鼻腔流出血水,并伴有异常叫声为特征的急性死亡病例。死亡53只,其中死亡貂大多数为注射早熟药的公貂,母貂很少死亡。通过临床检查和实验室检验等手段,确诊为绿脓杆菌感染引发的水貂出血性肺炎,并采取有效措施控制了病情,报告如下。
该养貂场采用的饲养方式为室外笼养,并建有遮雨敞篷,各种建筑及貂笼安放布局合理,基本符合卫生防疫管理要求。据饲养人员讲,因为当时是水貂的换毛期,为了增加营养,到当地农贸市场购买部分鸡骨架加入到饲料中,自使用的第2天就发现部分水貂发病,以后迅速增多,饲养人员采用穿心莲、阿米卡星、头孢拉定、庆大霉素肌肉注射,硫酸粘杆菌素饮水,聚维酮碘消毒等治疗手段,但收效甚微,不能控制病情发展,遂来就诊。
发病水貂病初多数精神沉郁,行动迟缓,体温升高,鼻镜干燥,食欲减退;死前不久发展为食欲废绝,精神高度沉郁,继而出现呼吸困难,呈腹式呼吸,肺部可听到啰音;临死时运动失调,咯血或鼻孔流出红色泡沫性液体,并有异常的叫声。发现症状后1~3 d死亡,有的4~6 d死亡。对死亡的水貂进行尸体剖检,主要病变在肺部,肺肿大,呈深红色肝样变,切开时流出大量血样泡沫,肺门淋巴结肿大,气管和支气管黏膜呈桃红色,投入水中下沉;肝脏肿大,干燥,苍白浅褐色;有的脾脏肿大、发黑,有散在的出血;肾脏皮质有出血点或出血斑;十二指肠有鲜红色出血斑;胃内空虚、集气,有血样液体,胃黏膜潮红,有小溃疡灶;心肌弛缓,冠状沟有出血点。
3.1 病料涂片镜检 无菌取新鲜病死水貂肝脏、脾脏、心血、肺脏分别进行直接涂片,革兰染色,镜检,都见有数量不等的革兰阴性、单个、成双或呈短链状的中等大小杆菌。
3.2 细菌分离培养 在病料涂片镜检的同时,无菌取上述病料接种普通琼脂,放入37℃恒温箱中培养24 h,产生大而光滑、边缘平坦、带有蓝绿色中央凸起的菌落;然后挑选菌落接种于普通琼脂培养基进行纯培养,得到纯培养物。将纯培养物分别接种于血液琼脂培养基上和肉汤培养基上,37℃的恒温下培养24 h,结果在血液琼脂培养基上,菌落呈灰褐色、周围有溶血环,在肉汤培养基表面可见菌膜,且培养基略显蓝绿色。对得到的细菌涂片,革兰染色,镜检,见到革兰阴性杆菌。
3.3 生化鉴定 将得到的细菌纯培养物,分别接种于各种微量发酵管中,在灭菌平皿中培养48 h,结果该菌能发酵葡萄糖、木糖;不发酵麦芽糖、棉籽糖、蔗糖、乳糖、甘露醇、肌醇、山梨醇、七叶苷;过氧化氢酶、氧化酶试验阳性;尿素酶试验、硫化氢试验阴性;水解明胶。
3.4 动物试验 选用4只健康小鼠做动物试验,分为2组,每组2只。第1组用分离菌24 h肉汤培养物腹腔注射,每只0.2mL;第2组每只小鼠腹腔注射0.2mL生理盐水。结果1组小鼠很快出现精神沉郁,体温升高,抽搐,口鼻出血,24 h内全部死亡。剖检可见肺脏充血、出血、肿大,切面流出大量的血样液体;心肌弛缓,冠状沟周围有出血点;有的脾脏肿大,有散在的出血;肾脏皮质有出血点或出血斑。后用心血等涂片,镜检,结果检出大量的与3.2所述形态相同的细菌。第2组全部正常,无一发病。通过以上综合诊断,确诊为绿脓杆菌感染。
3.5 药敏试验 本室选用5种抗菌药物,用常规纸片法对分离的绿脓杆菌进行药物敏感试验,结果其对环丙沙星、左氧氟沙星高度敏感;对庆大霉素、阿米卡星中度敏感;对头孢噻吩表现出一定程度的耐荮性。
4.1 预防 本病流行地区的水貂应在8~9月份接种假单胞菌福尔马林灭活疫苗。水貂接种量为3mL,肌肉注射,正常情况下经5~6 d产生免疫。
4.2 隔离消毒 首先将发病水貂进行隔离,对笼舍、粪便等用5%热火碱水进行喷洒消毒,尤其要把粘在笼舍上的绒毛彻底清理掉,防止食物、饮水被飞扬的病貂绒毛污染;食槽及饮水槽彻底清洗消毒,地面可用洗必泰、消毒净等消毒;对病死水貂焚烧或深埋。肉类饲料不管新鲜与否暂时熟喂,供给新鲜、清洁的饮水。
4.3 治疗 根据分离菌及药敏情况进行治疗。对已发病的貂选用敏感药物环丙沙星肌肉注射,每日2次;另外用左氧氟沙星拌料饲喂。治疗3 d,病情得到了控制,病貂基本痊愈。
5.1 该病主要传染源是污染肉类饲料、病貂和带菌貂,但是绿脓杆菌广泛存在于土壤、水和空气中,在正常动物肠道和皮肤上亦有存在,建议在有条件的地方经常清洗水塔,并在水中按10 g/m3加入百毒净,10min后饮用,同时在发病以后所有食物全部熟喂。
5.2 每年8~9月份,气候温暖、湿润适于绿脓杆菌等细菌的繁殖,立秋后秦皇岛地区昼夜温差大,而此时正是水貂换毛期,水貂抵抗力下降,脱落的绒毛随风飞扬,粘附于毛上的细菌也容易污染饮水、饲料或进入呼吸道,特别是注射早熟药的群体,绒毛厚,白天散热难,机体抵抗力下降,容易发病。建议在这个期间,加强饲养管理,注意环境的消毒,不喂被病菌污染的饲料,在饲料中增加维生素、抗菌药物可以有效地预防该病的发生
5.3 确诊为绿脓杆菌感染后,为了减少损失,尽快控制病情,立即进行了药敏试验。药敏试验结果说明,绿脓杆菌对部分抗生素有一定的耐药性,可能与细菌本身的特性及平时的用药混乱有关。因此,选择敏感药物使用才能收到显著的防治效果,又可避免浪费药物和延误防治时机,减少损失。
5.4 根据养殖户的经验,预防此病最好在8~9月份接种绿脓杆菌福尔马林灭活疫苗。另外,加强饲养管理,特别是注意饲料及饮水卫生,不喂被病菌污染的饲料,来历不明的肉类饲料最好熟喂;平时注意笼舍、用具及环境的消毒;场区内禁止养猫、狗,定期灭鼠。