紫苏子油纳米乳的制备及其对高血压大鼠血压及心率的影响

吴旭锦,朱小甫

(咸阳职业技术学院生物科技系,陕西咸阳712000)

高血压可导致多种心血管疾病的发生,严重危害人类的健康,目前临床上应用的降血压药对肝、肾多有不良反应,且易产生药物依赖。因此,寻找无毒副作用的降压药,是心脑血管疾病防治中亟待解决的问题。紫苏子油可降血压、降血脂、预防心血管疾病[1-3],但它对血压的影响及其作用的机制是目前尚未深入开展的课题。

紫苏子油属干性油,在加工和储藏过程中极易氧化而失去生理活性。因而防止紫苏子油氧化的方法是其生产、贮存中最关键的问题。纳米乳是一种近年来被广泛应用的新型药物载体,对易氧化的药物有保护作用[4]。现以聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH 40)为表面活性剂,小麦胚芽油为油相,制备紫苏子油纳米乳,观察紫苏子油纳米乳对高血压大鼠血压及心率的影响,为紫苏子油的应用开发提供合理的试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 左旋硝基精氨酸(L-NNA,Sigma公司);紫苏子油(盘锦格润生物科技有限公司);紫苏子油软胶囊(湖北李时珍生物科技有限公司);其他所用试剂均为国产分析纯。SD大鼠(体重160～180 g,雌雄各半),购于解放军第四军医大学实验动物中心。

1.2 方法

1.2.1 紫苏子油纳米乳的制备 采用滴定法制备紫苏子油纳米乳：精确称取聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH 40)18.0 g,小麦胚芽油2.0 g,放入烧杯,室温下搅拌使之充分混匀,加入5.0 g紫苏子油,搅拌混匀后向其中缓慢滴加蒸馏水,边加边搅拌,体系会变粘稠,继续滴加并不断搅拌,当体系突然变稀时,形成的即是稳定的无色透明紫苏子油纳米乳,称其总重量为50.0 g。

1.2.2 紫苏子油纳米乳对大鼠血压及心率的影响

1.2.2.1 大鼠高血压模型的建立[5]采用腹腔注射L-NNA建立高血压大鼠模型。将20只体重160 g～180 g SD大鼠随机分为2组,雌雄各半。LNNA 组：每日给L-NNA 15 mg/(kg◦d),分2次腹腔注射,连续4周,以此方法来制备高血压模型;于第2周起给自来水2mL灌胃,每日1次,连续4周。对照组：给1 mL生理盐水腹腔注射,每日2次,连续4周。于第2周起给自来水2mL灌胃,每日1次,连续4周。于第4周末用RBP-1B型大鼠尾压测量仪测定每组大鼠血压。

1.2.2.2 紫苏子油纳米乳对高血压大鼠血压及心率的影响 将SD大鼠70只,随机分成7组,每组10只,雌雄各半,分为正常组(正常饲喂)、模型组(每日灌服生理盐水2.5 g/kg)、空白纳米乳组(每日灌服空白纳米乳2.25 g/kg)、紫苏子油软胶囊组(每日灌服紫苏子油软胶囊2.60 g/kg)、紫苏子油组(每日灌服紫苏子油2.00 g/kg)、紫苏子油纳米乳组(每日灌服紫苏子油纳米乳2.25 g/kg)及阳性对照组(每日灌服牛黄降压丸0.12 g/kg),连续给药15 d后,测量各组大鼠尾动脉收缩压和心率的变化。测定时间定于 8：00～9：00。以心脏重量(m g)/体重(g)比值表示心指数。结果进行统计学处理试验结果以±SD表示,应用方差分析及组间q检验作统计学处理。

2 结果

2.1 紫苏子油纳米乳制备结果 RH 40与小麦胚芽油质量比为8∶2、9∶1时均能形成稳定、均质、透明的具淡蓝色乳光的紫苏子油纳米乳,以8∶2为佳。

2.2 对大鼠血压及心率的影响试验结果

2.2.1 大鼠高血压模型的建立结果 腹腔注射LNNA建立高血压大鼠模型,4周后,用RBP-1B型大鼠尾压测量仪测定每组大鼠血压,结果见表1。模型组大鼠与正常组大鼠血压有显著差异,说明造模成功。与对照组大鼠相比,L-NNA大鼠血压升高48%(P＜0.01),心率减慢10%(P＜0.01),心肌肥大,心指数增加26%(P＜0.01)。

表 1 大鼠高血压模型建立的测定结果(±SD,n=10)

表 1 大鼠高血压模型建立的测定结果(±SD,n=10)

注：与正常组比较,差异极显著(P＜0.01),用字母a表示

组别 血压 心率 心指数正常组 110±5 384±10 3.08±0.18模型组 163±8a 345±9a 3.88±0.19a

2.2.2 大鼠血压及心率影响的试验结果 紫苏子油纳米乳对高血压大鼠血压的影响见表2。紫苏子油纳米乳能显著降低大鼠血压,与模型组比较,血压降低28%(P＜0.01),心率增快14%(P＜0.01),心指数降低19%(P＜0.01)。

3 讨论

本研究结果显示,紫苏子油纳米乳对大鼠尾动脉收缩压显著低于模型组,提示较高剂量的紫苏子油纳米乳有明显的抵抗血压升高的作用,这为紫苏子油的应用开发提供了合理的试验依据。

心脑血管病死亡率很高,高血压则是冠心病、心肌梗死、脑卒中的主要危险因素之一。多年以来,众多学者致力于心脑血管病的研究,建立了多种高血压动物模型,这对人类高血压病的发病机制、并发症的发生发展规律及防治措施起了重要的作用。高血压大鼠模型也可分为自发性高血压大鼠模型和继发性高血压大鼠模型。药物诱发高血压大鼠模型属于继发性高血压大鼠模型。本研究采用腹腔注射LNNA建立高血压大鼠模型,机制是临床及试验研究表明,高血压患者及动物存在内皮依赖性的血管舒张功能障碍,在持续性的诱导NO合成下降过程中,内皮功能障碍可增强压力反射,通过损害机体的自稳机制中而引起高血压,升高的血压又可以进一步损害内皮细胞的NO合成能力,维持已形成的高血压。

表2 紫苏子油纳米乳对高血压大鼠血压、心率和心指数的影响(±SD,n=10)

表2 紫苏子油纳米乳对高血压大鼠血压、心率和心指数的影响(±SD,n=10)

注：与模型组比较,差异显著(P＜0.05),用字母a表示;差异极显著(P＜0.01),用字母 b表示;与正常组比较,差异显著(P＜0.05),用字母c表示;差异极显著(P＜0.01),用字母d表示;与阳性对照组比较,差异显著(P＜0.05),用字母 e表示;差异极显著(P＜0.01),用字母f表示;与紫苏子油纳米乳组比较,差异显著(P＜0.05),用字母g表示

组别 血压(mm Hg) 心率(次/m in) 心指数正常组 112±8b 386±9 3.11±0.15模型组 162±7 342±6 3.85±0.17紫苏子油组 129±4a,c,e,g 399±2 3.12±0.16紫苏子油软胶囊组 130±6a,c,e,g 401±4 3.14±0.12空白纳米乳组 161±5d,f 340±9 3.82±0.14阳性对照组 110±6b 382±5 3.09±0.11紫苏子油纳米乳 116±7b 390±8 3.10±0.16

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京：化学工业出版社,2005：237.

[2] 郭英,蔡秀成,李华娟,等.紫苏子油和松籽油对大鼠机体脂类和脂质过氧化的影响[J].营养学报,1996,18(3)：268-273.

[3] Shimokawa T,Mo riu chi A,H ori T,eta l.Effect of dietarv alinolenate/linoleatebalanceonm ean su rvival time,incidence of stroke and blood pressu re of spontaneously by pertensive rats[J].Life Sciences,1998,43(25)：2067-2072.

[4] 赵建,张钧寿,张瑛,等.胰岛素微乳大鼠结肠给药的药效学研究[J].中国药科大学学报,2004,35(6)：491.

[5] 叶海英,张忠义.法莫替丁微乳的研制及其质量评价[J].第一军医大学学报,2003,23(1)：68-70.