沈培奇
(河南省泌阳县人民医院检验科 河南驻马店 463700)
血细胞分析仪检测各种血细胞参数简单、快捷、重复性好,但很多外界因素都会影响其检测的准确性。EDTA-K2抗凝可引起少数人血小板发生聚集导致EDTA依赖性的假性血小板减少[1],同时还造成白细胞数计数的偏高,引起临床误诊。
2007年1月至2009年6月EDTA-K2抗凝有血小板聚集的患者9例,其中男4例,女5例;年龄13~58岁,平均为39岁。临床表现:均无皮肤粘膜出血点、紫癜等明显出血征象。
1.2.1 血细胞分析仪 为雅培CD--37005分类血细胞分析仪;Ol ympus公司生产的双目显微镜BH-2。
1.2.2 试剂(溶血剂、稀释液、清洗液) 为仪器配套试剂,EDTA-K2真空抗凝管(沧州永康医药用品有限公司),盐酸稀释液、草酸铵血小板稀释液及瑞氏染液。全血校准液及全血质控物由四川迈克科技有限公司提供。
标本用CD---3700血液分析仪检测,对血小板计数值低于50×109/L的418例患者的标本,经仪器初检同时取同份血进行血涂片观察血小板分布情况,发现明显不符的9例,征得患者同意复检:手工血小板计数、血涂片观察血小板数量、形态及血小板聚集情况。同时取血检测其它有关检验如凝血功能、纤维蛋白溶解试验等。统计学处理数据以(±s)表示,应用配对t检验。
EDTA-K2抗凝血用CD-3700血细胞分析仪计数,血小板计数值明显降低,仅8×109~45×109/L,手工血小板计数复查结果为135×109~268×109/L;仪器法血小板计数明显低于手工法,差异均有显著性(P<0.01)。血涂片镜检对照分析:末梢血直接涂片显示血小板数量不少,分布无明显异常,EDTA抗凝血涂片显示血小板明显聚集成簇(每簇中血小板数大于15个)甚至成片(血小板数约50~100个),且多分布在片尾部,极少见血小板单独存在。二者差异有显著性(P<0.05)。其它相关项目正常。
CD-3700血细胞分析仪的检测原理是电阻抗法:当有血小板聚集或存在大血小板且不被溶血素溶解时,仪器可误将聚集成团的血小板当作白细胞计数,引起血小板的假性偏低。EDTA-K2偶尔会引起血小板的聚集,可能与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关。Bragnani G等认为,EDTA可导致血小板活化,因而改变血小板膜表面某种隐匿性抗原构象,促使血小板与纤维蛋白原聚集成团,出现使血小板互相凝集现象[2]。EDTA致血小板假性减少发生率极低,约为0.07%~1%,但一旦发生,会导致临床进行大量的进一步检查,甚至可能引起临床误诊、误治。血液放置时间不同也会引起血小板数量变化,仪器法测定血小板数在采血后60min计数结果最准[3]。另外,采血的过程及血液和抗凝剂的比例都很重要,采血速度慢、多次穿刺和血液比例过高都可能引起血小板凝集,堵塞仪器而无法测得真实的结果。对于血小板计数值有疑问的标本,直接用EDTA抗凝血标本进行血涂片经瑞氏染色后,显微镜下观察血小板分布情况,如见血小板大量聚集或血小板分布并不减少者,可视为可疑病例并进一步复检确诊。当出现PTCP(抗凝剂依赖的假性血小板减少症患者,可在血常规样品抽血后1H内加入6.5mg/mL丁安卡那霉素能有效解离凝集的血小板,作用机制可能与抑制患者血小板膜表面CD62P、PAC—1和IgG的表达有关,此法有助于解决EDTA所致的血小板计数的假性减少[4]。
[1]郝婉莹.EDTA-K2依赖性假性血小板减少症(PTCP)一例报道[J].现代检验医学杂志,2007,5∶24.
[2]李明,王超.鲁家才.EDTA依赖性血小板聚集导致血细胞计数误差分析[J].华中医学杂志,2004,28(4)∶269.
[3]程暉,刘更夫,袁桂荣.血小板计数偏低误差实验探讨及对策[J].现代检验医学杂志,2006,21(5)∶91~92.
[4]詹荣庭,张明强.氯氮平剂量与血小板减少的关系[J].临床精神医学杂志,2008,6∶386.