夏枯草果穗的化学成分研究

许道翠，刘守金，俞年军，方成武

(安徽中医学院药学院 安徽省现代中药重点实验室，安徽 合肥 230038)

化学成分

*刘守金，Tel(0551)5169036，E-mailliushjin@hotmail.com

夏枯草果穗的化学成分研究

许道翠，刘守金*，俞年军，方成武

(安徽中医学院药学院 安徽省现代中药重点实验室，安徽 合肥230038)

目的研究夏枯草PrunellavulgarisL.果穗中的化学成分。方法乙醇总提取物经醋酸乙酯萃取，萃取物经反复硅胶柱和Sephadex LH-20柱色谱分离和纯化得到单体化合物，根据理化性质和波谱分析数据鉴定化合物的结构。结果从夏枯草中分离并鉴定了9个化合物，其结构分别为大黄酚(1)、2-羟基-3-甲基蒽醌(2)、汉黄芩素(3)、乌苏酸(4)、β-香树脂醇(5)、α-菠甾醇(6)、α-菠甾酮(7)、β-胡萝卜苷(8)、β-谷甾醇(9)。结论化合物1～3、7是从该属植物中首次分离得到。

夏枯草；化学成分

中药夏枯草为唇形科植物夏枯草PrunellavulgarisL.的干燥果穗，味辛、苦，性寒，入肝、胆经。具有清火、明目、散结、消肿的功能，用于目赤肿痛、目珠夜育，头痛眩晕，瘰疬，瘿瘤，乳痈肿痛；甲状腺肿大，淋巴结结核，乳腺增生，高血压[1]。有关夏枯草的化学成分国内外已有研究报道[2]，主要有三萜、皂苷、甾醇、苯丙素、黄酮、香豆素、蒽醌、有机酸等成分。本研究从夏枯草果穗中分离得到了9个化合物，2个蒽醌类：大黄酚(1)和2-羟基-3-甲基蒽醌(2)，1个黄酮类：汉黄芩素(3)，2个三萜类：乌苏酸(4)、β-香树脂醇(5)，4个甾体类：α-菠甾醇(6)、α-菠甾酮(7)、β-胡萝卜苷(8)和β-谷甾醇(9)。其中化合物1～3、7是从该属植物中首次分离得到。

1 仪器与材料

XRC-1型显微熔点仪(四川大学科学仪器厂)，温度未校正；BruckerAV-400MHz和BruckerDRX-500MHz核磁共振光谱仪；MicromassQauttro质谱仪；ZF-2型三用紫外仪(上海安亭电子仪器厂)；柱色谱硅胶(200～300目)和薄层色谱硅胶GF254(青岛海洋化工厂)，化学试剂均是化学纯和分析纯。夏枯草果穗于2008年6月采于安徽省亳州市栽培基地，原植物经安徽中医学院中药与资源教研室刘守金教授鉴定为夏枯草PrunellavulgarisL.。

2 提取分离

夏枯草的干燥果穗30kg，分别用90%和50%乙醇分别加热回流提取2次，合并提取液，回收乙醇得浸膏2.5kg；浸膏用醋酸乙酯萃取，减压回收溶剂得醋酸乙酯部分326.7g；将醋酸乙酯部分进行反复硅胶柱色谱及SephadexLH-20柱色谱分离纯化，得到化合物1(8mg),2(12mg),3(10mg),4(40mg),5(20mg),6(17mg),7(15mg),8(11mg),9(16mg)。

3 结构鉴定

3.1化合物1

橙红色粉末(醋酸乙酯)，遇氢氧化钠溶液变红色，遇0.5%醋酸镁溶液变橙红色；mp198～199℃。ESI-MSm/z：255.4[M+H]+。1H-NMR(CDC13,500MHz)δ：12.14(1H,Ar-OH)，12.03(1H,Ar-OH)，7.84(1H,dd,J=8.1,1.1Hz,H-5)，7.69(1H，t,J=13.4Hz,8.0Hz,H-6)，7.66(1H,d,J=1.0Hz,H-4)，7.29(1H,dd，J=8.1,8.0Hz，H-7)，7.11(1H,d,J=1.0Hz,H-2)，2.47(3H,s,Ar-CH3)。以上数据与文献[3]报道的一致，鉴定该化合物为大黄酚(chrysophano1),为该属植物首次分离得到的化合物。

3.2化合物2

黄色粉末(甲醇)，遇氢氧化钠溶液变红色，遇0.5%醋酸镁溶液变橙红色；mp302～304℃。ESI-MSm/z：237.4[M+H]+，1H-NMR(DMSO-d6,500MHz)δ：8.14(2H,m,H-5,8)，8.00(1H,s,H-1)，7.90(2H,m,H-6,7)，7.63(1H,s,H-4)，2.26(3H,s,CH3)。以上数据与文献[4]报道的一致，鉴定该化合物为2-羟基-3-甲基蒽醌(2-hydroxyl-3-methyanthraquinone),为该属植物首次分离得到的化合物。

3.3化合物3

黄色针晶(氯仿)，盐酸镁粉反应呈阳性；mp301～302℃。ESI-MSm/z：285.3[M+H]+，1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ：12.50(1H,s,5-OH)，10.85(1H,s,7-OH)，8.07(2H,t,H-2′,6′),7.63(3H,m,H-3′,4′,5′)，7.00(1H,s,H-3),6.31(1H,s,H-6)，3.86(3H,s,-OCH3)。核对波谱数据与文献[5]汉黄芩素基本一致，鉴定该化合物为汉黄芩素(wogonin),为该属植物首次分离得到的化合物。

3.4化合物4

白色粉末(甲醇)，Liebermann-Burchard反应呈阳性；mp260～262℃。ESI-MSm/z：457.4[M+H]+,1H-NMR[pyridine-d5,500MHz]δ：5.49(1H,t,J=3.3Hz,H-12)，3.45(1H,dd,J=6.0,10.1Hz,H-3)，2.63(1H,d,J=11.0Hz,H-18)，1.24(3H,s,H-27)，1.22(3H,s,H-25)，1.05(3H,s,H-23)，1.02(3H,s,H-24)，0.87(3H,s,H-26)，0.99(3H,d,J=6.0Hz,H-29)，0.94(3H,d,J=6.0Hz,H-30)。核对波谱数据与文献[6]乌苏酸基本一致，确定该化合物为乌苏酸(ursolic acid)。

3.5化合物5

无色羽毛状晶体(石油醚-醋酸乙酯)，Liebermann-Burchard反应呈阳性，mp196～198℃。ESI-MSm/z：427.7[M+H]+，1H-NMR(CDC13，400MHz)δ：5.2(1H,t,J=10.1Hz,H-12)，0.79(3H,s,H-24)，0.80(3H,s,H-28)，0.83(3,s,H-29)，0.87(3,s,H-30)，0.94(3H,s,H-25)，0.99(3H,s,H-26)，1.01(3H,s，H-23)，1.13(3H,s,H-27)。波谱数据与文献[7]中β-香树脂醇基本一致，鉴定该化合物为β-香树脂醇(β-amyrin)。

3.6化合物6

白色针晶(石油醚-醋酸乙酯)，mp152～153℃。ESI-MSm/z：414.4[M+H]+，1H-NMR[CDCl3,500MHz]δ：5.16，5.02(各1个H，都为dd，J=10.8,17.0Hz,H-22,23),5.16(1H,d,J=4.7Hz，H-7)，3.06(1H,m,H-3)，1.02(3H,d,J=8.3Hz,H-21)，0.85(3H,d,J=10.0Hz,H-26)，0.81(3H，t，J=12.5Hz，H-29)，0.80(3H,d,J=11.5Hz,H-27)，0.80(3H,s,H-19)，0.55(3H,s,H-18)，核对波谱数据与文献[8]α-菠甾醇基本一致，鉴定该化合物为α-菠甾醇(α-bessisterol)。

3.7化合物7

白色晶体(丙酮)，Liebermann-Burchard反应呈阳性，mp172～175℃，ESI-MSm/z：413.2[M+H]+，1H-NMR[CDCl3,500MHz]δ：5.17(1H,brs,H-7)，5.15(1H,dd,J=15.1,8.7Hz,H-22)，5.02(1H,dd,J=15.1,8.7Hz,H-23)，1.83,1.53(各1个H,都为s,H-11)，1.03(3H,d,J=6.7Hz,H-21)，1.01(3H,s,H-19)，0.84(3H,d,J=7.3Hz,H-27)，0.80(3H,d,J=6.0Hz,H-26)，0.57(3H,s,H-18)核对波谱数据与α-菠甾酮的数据[9]基本一致，鉴定该化合物为α-菠甾酮(α-spinasterone)，为该属植物首次分离得到的化合物。

3.8化合物8

白色粉末(甲醇)，mp298～300℃，Liebermann-Burchard和Molish反应呈阳性，用不同的展开剂薄层展开，Rf值均与胡萝卜苷对照品一致，与对照品混合熔点也不下降，故确定该化合物为β-胡萝卜苷(β-daucosterol)。

3.9化合物9

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StudyonChemicalConstituentsofSpicaPrunellae

Xu Daocui, Liu Shoujin, Yu Nianjun, Fang Chengwu

(PhamacySchoolofAnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine,KeyLaboratoryofAnhuiModernTraditionalChinesemedicine,HefeiAnhui230038,China)

Objective:To study the chemical constituents of Spica Prunellae.MethodsThe ethanol extract of Spica Prunellae was extracted by ethyl acetate. The extract was separated repeatedly by silica gel and Sephadex LH-20column chromatography. Compounds structures were identified on the basis of physical and chemical properties and spectral data.ResultsNine compounds were isolated from Spica Prunellae, and their structures were identified as：chrysophano1(1),2-hydroxyl-3-methyanthraquinone(2)，wogonin(3), ursolic acid(4),β-amyrin(5),α-bessisterol(6), α-spinasterone(7),β-daucosterol(8),β-sitostero1(9).ConclusionCompounds1-3，7were isolated from this genus for the first time.

Prunellavulgaris; Chemical constituents

2009-12-09)