工程黄与人工黄之牛黄降压丸单次给药对自发性高血压大鼠降压作用比较观察

王 蕾， 孙宝珍， 吕 楠， 赵 晨， 种影影， 陈卫平

(1.天津市医药科学研究所，天津300020;2.天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂，天津300457)

“体外培育牛黄”(亦称为“工程牛黄”)，是以仿生学方法模拟胆红素钙结石在体内形成的生化过程和条件，应用现代生物工程技术在体外牛胆囊胆汁内培育的牛胆红素钙结石。本实验旨在将原牛黄降压丸中的人工牛黄替换为工程牛黄，观察和比较含人工黄与不同含量工程黄之牛黄降压丸对自发性高血压大鼠血压的影响，为工程牛黄替代人工牛黄提供药理学实验依据。

1 试验材料

1.1 实验动物

自发性高血压大鼠(SHR)，♂性，体重260～280 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物生产许可证号:SCXK(京)2005－0002。

大鼠用普通全价颗粒饲料Ⅱ号，由北京科澳协力饲料有限公司生产(京动许字(2000)第015号)。

标准化实验室，实验动物使用许可证号 SYXK(津)2005－0001。

1.2 试验药物

1.2.1 人工黄牛黄降压丸(CBA－1)，棕黄色粉末，由天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂提供。

1.2.2 工程黄牛黄降压丸(CBA－2)，棕黄色粉末，处方所含牛黄为工程牛黄，其含量分别为原牛黄降压丸中人工牛黄含量的80%、60%、30%、10%4种。由天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂提供。

1.2.3 马来酸依那普利片(阳性对照品)，扬子江药业集团江苏制药股份有限公司产品，批号:07112301。

1.3 仪器与设备

ALC－NIBP无创血压测定分析系统，上海奥尔科特生物科技有限公司产品;恒温实验箱，上海奥尔科特生物科技有限公司产品。

2 试验方法

2.1 分组与给药

试验开始前一周，将SHR放入无创血压测定分析系统固定器适应性测定血压1周，每只大鼠至少测定3次，选择3次血压差值不超过±10%的大鼠为合格动物。按照大鼠3次收缩压平均值随机分为7组，分别为模型对照组、80%ICCB组、60%ICCB 组、30%ICCB 组、10%ICCB 组、CBA－1组、依那普利阳性对照组。各牛黄降压丸组给药量为0.88 g/kg，约为临床人用剂量的40倍，依那普利给药量为10 mg/kg，为人临床常用剂量的30倍，均灌胃给药，模型对照组灌胃蒸馏水，体积均为10 mL/kg。

2.2 测定方法

给药前测定SHR基础血压和心率，然后各组灌胃相应药物，测定给药后1 h、2 h、3 h、5 h血压值，计算血压变化率=(药后血压－药前血压)×100%/药前血压。

2.3 统计处理

所得数据均经SPSS11.5统计软件方差分析及t检验处理，以均数±标准差(±s)表示。

3 试验结果

与模型对照组比较，各给药组在药后1h收缩压即开始下降，以80%ICCB下降最明显，降压幅度14.96%，至药后5h作用持续。60%、30%、10%ICCB组血压显著降低的起效点为药后2h。CBA－1组只可见降低收缩压的趋势(P＞0.05);依那普利组降压起效时间在药后2 h，作用强于80%ICCB组，持续至药后5 h。见表1。

在降低收缩压的同时，80%、60%、30%ICCB组亦呈现降低舒张压作用，其作用程度与所含ICCB比例呈正相关，见表2。

与模型对照组比较各给药组均未见对心率有显著性影响。

表1 不同配比之牛黄降压丸样品对SHR收缩压(SBP)的影响(±s)(1 mmHg=0.133.3 kPa)

表1 不同配比之牛黄降压丸样品对SHR收缩压(SBP)的影响(±s)(1 mmHg=0.133.3 kPa)

与模型对照组比，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

66.33±18.78 167.92±18.69 80%ICCB0.88 g/kg 10 186.58±6.06 158.47±11.88▲ 158.45±26.86▲ 147.13±13.20▲ 139.25±19.24▲▲60%ICCB0.88 g/kg 10 181.84±10.79 156.19±24.32▲ 157.95±29.31▲ 145.86±21.32▲ 163.21±26.69 30%ICCB0.88 g/kg 10 180.03±8.15 163.66±22.46 159.79±18.56▲▲ 154.68±11.86 158.20±18.99 10%ICCB0.88 g/kg 10 182.67±9.08 166.61±18.56 159.47±31.04▲ 158.53±31.45 154.78±15.40 CBA－1 0.88 g/kg 10 179.01±10.74 159.07±12.61▲ 166.94±26.65 160.24±22.05 158.64±23.49依那普利10 mg/kg 10 181.56±10.50 173.58±22.59 146.43±28.46▲▲ 142.77±19.76 140.99±27.78 1 h 2 h 3 h 5 h模型对照组 10 183.24±10.16 173.25±15.34 182.18±10.76 1组别 n 各时间点收缩压数值/mmHg药前▲

表2 不同配比之牛黄降压丸样品对SHR舒张压(DBP)的影响(±s)

表2 不同配比之牛黄降压丸样品对SHR舒张压(DBP)的影响(±s)

与模型对照组比，▲P＜0.05。

22.94±15.16 123.76±18.43 80%ICCB 0.88 g/kg 10 138.46±6.57 118.99±14.01 116.86±21.32▲ 113.23±14.62 105.69±19.18▲60%ICCB 0.88 g/kg 10 130.60±10.13 124.04±20.09 119.04±20.68 106.41±19.17▲ 126.11±16.25 30%ICCB 0.88 g/kg 10 123.66±18.31 127.97±18.13 118.87±15.58▲ 116.60±9.97 121.43±16.53 10%ICCB 0.88 g/kg 10 136.64±10.24 125.68±16.72 121.10±24.41 113.85±23.05 120.31±11.41 CBA－1 0.88 g/kg 10 133.92±8.29 117.11±14.07 124.90±20.40 119.73±16.16 120.81±16.53依那普利10 mg/kg 10 133.59±9.22 130.81±18.92 109.85±25.89▲1 h 2 h 3 h 5 h模型对照组 10 137.11±10.53 128.98±12.25 134.47±12.47 1组别 n 各时间点舒张压数值/mmHg药前115.94±15.75 108.22±22.54

4 讨论

牛黄降压丸是达仁堂独家研制于1979年投入生产的纯中药制剂，通过多年的临床应用已成为我国中药降压药的首选，其主要成分有牛黄、羚羊角、珍珠、水牛角浓缩粉、白芍、决明子、川芎、黄芩素、郁金、冰片、甘松、薄荷等。有清心化痰、平肝安神功效。用于心肝火旺、痰热壅盛所致的头晕目眩、头痛失眠、烦躁不安;高血压病见上述证候者。

其主药牛黄是一味名贵中药材，牛黄即干燥的牛胆结石。根据我国相关部门颁布的药品标准统计，用牛黄做原料的国家标准药品共有600多个品种，市场需求量很大。但我国天然牛黄产量低、资源匮乏，过去主要依赖进口。国家药监局分别于2000、2001、2002年相继发文，禁止使用进口牛源性材料制备中成药，如天然牛黄等等，加剧了天然牛黄的供需矛盾。正因为天然牛黄稀缺昂贵，很多应该用天然牛黄投料的中成药改用人工牛黄，或几种牛黄掺兑使用，使牛黄应用产生混乱，急需对牛黄市场进行规范。

体外培育牛黄是模拟体内胆结石形成的原理和生物化学过程，运用现代生物工程技术，在体外培育的牛胆红素钙结石。指纹图谱研究结果表明体外培育牛黄与天然牛黄成分相近，且质量标准更稳定［1］。已有药效学实验证实，体外培育牛黄有镇痛、抗炎、抗肝纤维化、耐缺氧、清除自由基、保护心脑细胞、诱导人肝母细胞瘤 HepG2细胞凋亡等作用［2－6］。本实验旨在将原牛黄降压丸中的人工牛黄替换为不同含量的体外培育牛黄，观察和比较不同含量工程黄与人工黄之牛黄降压丸对自发性高血压大鼠的降压作用，并探讨其不同配比与疗效的关系。

结果表明，用体外培育牛黄部分替代人工牛黄之牛黄降压丸具有明显降压作用，且其降低收缩压的起效时间及降压幅度均与ICCB含量有密切关系，含量高则起效时间早、持续时间长、降压幅度明显。至于将工程牛黄完全替代人工牛黄，其牛黄降压丸的降压活性是否更加显著，有待下一步研究。

［1］丁 岗，盛龙生，李明慧，等.体外培育牛黄与天然牛黄指纹图谱的比较研究［J］.中国天然药物，2004，5:309－312.

［2］张韶辉，张延琳，王文权，等.体外培育牛黄镇痛作用的电生理机制［J］.中国药理学通报，2008，8:1073－1077.

［3］汪世元，陈孝平，蔡红娇，等.体外培育牛黄诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的实验研究［J］.华中科技大学学报(医学版)，2005，6:754.

［4］梁志鹏，杨 镇，蔡红娇，等.体外培育牛黄制剂对实验性血吸虫病家兔肝纤维化组织细胞外基质的影响［J］.广东医学，2005，8:1044－1045.

［5］蔡红娇，汪世元，刘烈刚，等.体外培育牛黄耐缺氧和清除自由基作用的研究［J］.中药药理与临床，2003，6:20－22.

［6］杜佐华，蔡红娇，杨荣光，等.体外培育牛黄抗炎作用的实验研究［J］.中药新药与临床药理，1996，1:450－453.