策勒黑羊、和田羊和卡拉库尔羊血液蛋白多态性研究

祁成年,雷 红,姜锋韬

(1.塔里木大学动物科学学院,新疆 阿拉尔 843300;2.塔里木畜牧科技兵团重点实验室,新疆 阿拉尔 843300;3.喀什地区畜牧技术推广中心)

血液蛋白多态性可以作为一个遗传标记因子来反映动物的遗传变异情况。不同品种间的不同位点血液蛋白具有一定差异,所以由多种血液蛋白多态性所标记的多基因型,可用来标记品种特征(张细权,1997)。本研究利用血液蛋白多态性,对塔里木盆地周边的策勒黑羊、和田羊、卡拉库尔羊3个绵羊品种进行遗传多样性分析,对种质资源保护和科学开发利用以及品种的起源、进化研究提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 样本来源 选择3个品种176只成年健康绵羊作为试验动物。其中策勒黑羊60只,来自新疆和田策勒县;和田羊56只,来自新疆和田策勒县;卡拉库尔羊60只,来自新疆阿克苏农一师十三团卡拉库尔羊养殖中心。以系统随机抽样方法采集。将羊只保定,用消毒过的12号注射针头从羊颈静脉处采血10 mL,装入预先加入1%肝素钠1～2滴作为抗凝剂的消毒青霉素瓶中。并反复轻轻倒置,使抗凝剂与血液混匀。带回实验室,在 3 000 r/min离心20 min,吸取上层血清,标记放入冰箱-20℃保存备用。

1.2 方法

1.2.1 电泳方法 垂直板高pH不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,测定血清转铁蛋白(Tf)、前白蛋白(Pr)、血清白蛋白(Alb)。

1.2.2 血清蛋白的判型 参照铃木正三的《比较血型学》进行辨认分型。

1.2.3 数据处理

1.2.3.1 血清蛋白基因型频率、基因频率[1]计算

基因型频率=该基因型个体数/被测个体总数

基因频率(Gi)=Gii+Gij/2

式中:Gi表示基因频率,Gii、Gij分别表示i基因纯合子与杂合子的基因型频率。

1.2.3.2 基因纯合度、杂合度、平均预期杂合度的计算

jk=∑(xi)2,hk=1-jk,H=∑hk/r

式中:jk表示某一位点基因纯合度,xi表示群体中k位点第i个等位基因的频率;hk表示某一位点基因杂合度;H表示平均位点基因杂合度,r为基因座数。

2 结果与分析

2.1 3种绵羊血清蛋白基因位点的基因型频率和基因频率

2.1.1 3种绵羊血清转铁蛋白(Tf)的基因型频率和基因频率 由表1可见,策勒黑羊血清转铁蛋白(Tf)位点检测出6种基因型;和田羊血清转铁蛋白(Tf)位点检测出5种基因型,缺少AB型;卡拉库尔羊血清转铁蛋白(Tf)位点检测出4种基因型,缺少BB型和AB型。在基因型频率上,3种绵羊都以TfCC为优势基因型。在基因频率上,3种绵羊都以TfC为优势基因。

表1 Tf的基因型频率和基因频率

2.1.2 3种绵羊前白蛋白(Pr)的基因型频率和基因频率 由表2可见,策勒黑羊、和田羊、卡拉库尔羊前白蛋白(Pr)位点检测出3种基因型。在基因型频率上,3种绵羊都以PrSS为优势基因型。在基因频率上3种绵羊都以PrS为优势基因。

表2 Pr的基因型频率和基因频率

2.1.3 3种绵羊血清白蛋白(Alb)的基因型频率和基因频率 由表3可见,策勒黑羊血清白蛋白(Alb)位点检测出6种基因型,缺少WV型和DS型;和田羊血清白蛋白(Alb)位点检测出6种基因型,缺少WV型和DS型;卡拉库尔羊血清白蛋白(Alb)位点检测出6种基因型,缺少FF型和SS型。在基因型频率上,3种绵羊都以AlbSW为优势基因型。在基因频率上,3种绵羊都以AlbW为优势基因,策勒黑羊和和田羊缺少AlbV和AlbD基因。

表3 Alb的基因型频率和基因频率

2.2 策勒黑羊、和田羊、卡拉库尔羊遗传变异性 由表4可见,策勒黑羊、和田羊、卡拉库尔羊在血清转铁蛋白(Tf)、前白蛋白(Pr)、血清白蛋白(Alb)3个位点的预期基因平均杂合度较高。

表4 Nei氏预期基因平均杂合度(H)

3 讨论

基因杂合度(H)又称基因多样度,反映各群体在n个位点上的遗传变异。一般认为它是度量群体遗传变异的一个最适参数[4]。本研究结果表明:策勒黑羊、和田羊、卡拉库尔羊在血清转铁蛋白(Tf)、前白蛋白(Pr)、血清白蛋白(Alb)3个位点的预期基因平均杂合度分别为0.531 8、0.542 3、0.512 4,基因平均杂合度较高。其中和田羊和策勒黑羊群体的预期基因平均杂合度相对较高,说明了和田羊和策勒黑羊群体基因型一致性差,遗传变异大,因此认为和田羊和策勒黑羊的遗传多样性丰富,具有较大的遗传潜力,为今后和田羊和策勒黑羊的定向培育新类型提供了理论依据。

[1]Li C C.群体遗传学[M].吴仲贤,译.北京:农业出版社,1981:1-10.

[2]牛荣,商海涛,魏泓,等.版纳小耳猪近交系5家系35个微卫星位座的遗传分析[J].遗传学报,2001,28(6):518-526.