P73蛋白在胃癌及癌旁正常组织中的异常表达

郑鹏才,谢小强，苏 波 (长江大学医学院， 湖北 荆州 434023)

郭华雄，杨 勇 (长江大学荆州临床医学院 荆州市中心医院病理科，湖北 荆州 434020)

P73蛋白在胃癌及癌旁正常组织中的异常表达

郑鹏才,谢小强，苏 波 (长江大学医学院， 湖北 荆州 434023)

郭华雄，杨 勇 (长江大学荆州临床医学院 荆州市中心医院病理科，湖北 荆州 434020)

目的 ：检测胃癌及癌旁正常组织中P73蛋白的表达，探讨P73蛋白的表达在胃癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组织化学S-P法检测50例胃癌组织中P73蛋白表达并与30例癌旁正常组织中P73蛋白的表达进行比较。结果：癌旁正常组织中P73蛋白表达率为21%；高分化胃癌与低分化胃癌组织中P73蛋白的表达率分别为55.5%、68.8%，呈递增性高表达。经统计学分析得出癌旁正常组织与胃癌组织P73阳性表达率有显著性差异(Plt;0.01)。结论：P73蛋白异常表达在胃癌的发生、发展过程中起重要作用。并可作为胃癌早期诊断，判断预后的新的分子生物学指标。

胃癌；癌旁组织；免疫组织化学；P73蛋白表达

P73蛋白是在1997年发现的和P53具有十分相似的结构和功能的新基因，属于P53家族的成员，随后的研究认为P73基因在肿瘤的发生中的作用机制可能是：P73基因编码区发生碱基突变[1]; P73基因的杂合性缺失[2]; P73基因异常表达[3]；P73基因甲基化[4]。近来的系列研究证实了该基因的存在，研究表明P73在肿瘤的发生、发展、预后等方面起重要作用。本研究旨在应用免疫组织化学S-P法检测P73蛋白在胃癌及癌旁正常组织的表达情况，探讨P73蛋白在胃癌发生、发展中的作用。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1标本 本研究中所有标本均来源于荆州市中心医院病理科2001年至2006年6月存档蜡块。胃癌50例，其中男性41例，女性9例；年龄40～76岁，平均年龄57.8岁。临床病理诊断为高分化腺癌18例，低分化腺癌32例：有淋巴结转移者14例，无转移者36例。获取癌旁正常组织30例，作为对照。所有标本均经10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋，制备厚4μm切片。

1.1.2主要试剂 兔抗人P73多克隆抗体及SP试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。

1.2方法每例选取1～3张4μm厚的切片采用免疫组化S-P法检测P73蛋白的表达，染色步骤严格按试剂盒说明进行。结果判断标准：P73以细胞浆内出现棕黄色颗粒呈阳性(DAB色源)。每张切片随机选择5个高倍视野(×400),每个视野计数100个细胞，阳性细胞数lt;10%为阴性(-),11%～24%为弱阳性(±)；≥25%为阳性()；gt;50%为强阳性()。用已知的阳性切片作为阳性对照。

1.3统计方法数据比较采用χ2检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1P73蛋白在胃癌及癌旁组织的表达在癌旁正常组织中P73蛋白的表达率为21%(7/30)，主要着色部位在胞浆(见第92页彩色图版Ⅶ之图1)，按制定标准为弱阳性；在胃癌组织中P73蛋白表达率为64.%(32/50),其中高分化胃癌组织中P73蛋白的阳性表达率为55.5%(10/18)；低分化腺癌组织中P73蛋白的阳性表达率为68.8%(22/32)，主要着色部位在胞浆(见第92页彩色图版Ⅶ之图2、3)。经统计学分析得出癌旁正常组织与胃癌组织之间P73蛋白的阳性表达差异有显著性(Plt;0.01)；而高分化胃癌与低分化胃癌组织之间P73蛋白的阳性表达无显著性差异(Pgt;0.05)(见表1)。

2.2P73蛋白表达与胃癌的生物学特征本研究结果表明P73蛋白的阳性表达与癌旁正常组织有关系，与病人的年龄、肿瘤的大小、分化程度无明显差异，但随着肿瘤的恶性程度增高而呈递增性增高。

图1 癌旁正常组织弱阳性 图2 高分化腺癌阳性 图3 低分化腺癌阳性

表1 P73蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达

3 讨 论

P73基因是新发现的肿瘤抑制基因定位于1P36、33[5]，它由13个外显示和12个内盒子组成具有7个同源异构体。在结构与功能上与P53具有高度的同源性，具有相似的生物学行为。均可通过转录激活P21基因来实现抑制细胞生长，促进细胞凋亡的功能[6]。

据有关文献报道[7]P73的表达在前列腺癌、膀胱癌、神经母细胞瘤等恶性肿瘤组织中此基因频繁丢失、突变。而在肝癌、胃癌等恶性肿瘤中很少突变，表达率低[8，9]提示P73蛋白可能具有组织特异性，但尚无定论。Min-Jukang等人[10]的研究表明突变的P73在胃癌组织中呈高表达，提示P73基因与癌变的过程有关。本研究结果显示P73蛋白在胃癌中的阳性表达率显著高于癌旁组织中的表达(Plt;0.01)，由此提示P73蛋白基因高表达可能是胃癌发生的热点基因变化，在胃癌的发生中起重要作用。P73蛋白在高分化胃癌与低分化胃癌组织中阳性表达率虽无统计学差异，但仍提示P73阳性表达率与癌组织分化程度有相关性。

我们检测到的胃癌组织中P73蛋白阳性表达率(64.%)与以前的报告虽有差异，但究其原因可能与病例的多少或研究方法不同有关。其机制尚待进一步探讨。本研究发现P73蛋白表达在胃癌的发生，发展过程中起重要作用；与胃癌组织的分化程度有相关性，提示P73蛋白可作为胃癌早期诊断，判断恶性程度、预后的一种新的分子生物学指标。

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[2]Shan L, Yang Q, Nakamura M,etal.Frequent Loss of hateroiygosity at lP36.3and P73sbnormality in parathyroid adenomas[J]. Mod pathol，2001,14(4)：273-278.

[3]Yokomizo A,Mai M,Tindall DJ,etal.Orerexpression of the wild type P73gene in human bladder cancer[J].Oncogene，1999，18(8):1629-1633.

[4]Bueso-Ramos C,Xu Y,Mc Donnell Ti,etal.Protein expression of a triad of frequently methylated genes,P73P57Kip2,and P15,has.prognostic value in adult lymphocytic leukemia independently of its methylation status[J]. Clin Oncol,2005,23(17):3932-3939.

[5] E pilozzi,C Talenico,A platt,etal.P73gene mutations in gastric adenocarcinomas[J].Mol Pathol，2003，56:60-62.

[6]Diclm an S.possible cause found for lyme arthritis[J].seince,1998,281:631-632.

[7]Lakada N,Ozzki T,Lchimiya S,etal.Ldentification of a transactirition actirity in the COOH terminal regon of P73which is impaired in the naturally occurring mutants found in haman neutoblastomas[J].cancer Res,1999,59(12):2810.

[8]Mihara M, Nimura Y, Lchimiya S,etal.Absence of mutation of the P73gene localized at chromosome lP36.3 in hepatocellular carcimama[J].Br J cencer,1999，79(1):164.

[9]Tannapfel A,schmelzer S, Benicke M,etal.Expression of the P53 homologues P53 and P73in multiple simultaneous gastric cancer[J].J pathol，2001，195(2):163-170.

[10]Min-Ju Kang, Bum-Joon park loss of lmprinting and Elevated Expression of wild Type P73in Human Gastric Adenocarcionma[J].clin cancer Res,2000,6:1767.

[编辑] 何 勇

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2009.04.011

R446.8

A

1673-1409(2009)04-R027-02

2009-11-02

郑鹏才(1955-)，男，湖北天门人，教授，从事病理学教学与研究工作。