紫叶酢浆草快繁技术的研究

肖文艳　曹　智

【摘要】 研究了不同消毒时间和激素水平对于紫叶酢浆草茎段组织快繁的影响，采用组培方法建立起了紫叶酢浆草离体培养体系。结果表明：消毒时间以4分钟为宜；最佳诱导培养基配方为：MS+NAA0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L；最佳增殖培养基为：MS+NAA0.2 mg/L+6-BA0.5 mg/L。

【关键字】 紫叶酢浆草；组织培养；激素水平；

紫叶酢浆草（O xalis triangularis）又名紫蝴蝶，原产热带美洲。为酢浆草科酢浆草属多年生宿根草本植物，株高15～30cm，地下部分长有小鳞茎。叶基生，掌状复叶，每个复叶由3片小叶组成，小叶倒三角形或倒箭形，叶色常年为艳丽的紫红色，犹如无数飘舞的“紫色蝴蝶”[1]，极具观赏价值。紫叶酢浆草适应性广，抗性强，生长迅速[2]。是优良的地被植物，同时也是布置花坛、花镜或点缀草坪、道路的良好材料。 具有很高的开发利用和推广价值[3]。

紫叶酢浆草的繁殖以分株繁育为主，多在生长季节进行，也可在春季播种繁殖，但观赏栽培种结籽率较低。上述繁殖方法繁殖速度慢，远不能满足市场的需求。目前较为理想的是组织培养快速繁殖技术，具有速度快，变异率低等优点，能满足大规模生产的需求[4]。

紫叶酢浆草的组织培养李霖等[5]已有作初步报道，但试验结果中培养基中激素种类及激素浓度有不同的见解。本实验通过建立紫叶酢浆草快繁体系，研究激素水平对三角紫叶酢浆草组培快繁的影响。旨在为三角紫叶酢浆草工厂化育苗提供技术参数。

1实验材料和方法

1.1实验材料

从大棚移入实验室1个月左右的盆栽三角紫叶酢浆草，以叶柄作为外植体。

1.2外植体消毒

挑选健壮无虫害的叶柄，用消毒后的剪刀将其剪成约4cm的小段，放于烧杯中，用自来水冲洗外植体10 分钟，加少量中性洗洁精浸泡0.5 小时，流水冲洗干净，移入无菌接种室，浸入0.1％HgCl2溶液中振荡消毒4分钟，用蒸馏水冲洗5~8次，即可用于接种。

1.3不同的消毒时间

处理时间分别为2分钟、4分钟、8分钟、12分钟，用无菌水冲洗5次后接种。接种时先用滤纸吸干叶柄表面的水分，把叶柄和叶片切成1cm分别接种于培养基上。观察不同时间处理对叶柄的愈伤组织诱导率的影响，最终采用最佳消毒时间。

1.4培养基配方

采用MS基本培养基，其中3%蔗糖，0.7%琼脂，pH值5.8。培养温度25±2℃，光照3000Lux，12小时/天。培养基见表1、表2。

2结果与分析

2.1不同消毒时间对三角紫叶酢浆草芽诱导的影响

在8、12分钟消毒的外植体多出现白化现象，结果如表3所示：2分钟消毒的外植体污染率较高，而8分钟、12分钟的出芽率较低，4分钟消毒的出芽率较高为60%，污染率也较低，故最佳消毒时间为4分钟。

2.2不同激素水平对三角紫叶酢浆草芽诱导的结果及分析

在超净工作台上，切去两端受损部分留下约1.5~2.0cm的小段，分别接种于不同的诱导培养基(包括不同种类激素的诱导培养基)上培养，每瓶接种2个外植体，每种培养基接种数为12个。

叶柄接种后逐渐透明，至12天时较为明显，且两端切口处膨大并出现白色愈伤组织，培养至19天，愈伤组织开始分化，生出白色不定根，28天以后形成紫色小芽，并始终保持紫色。继续培养生长发育出丛生芽。第40天结果如表4所示。

从表4可以看出：在9种不同培养基上叶柄均能诱导出愈伤组织和分化出根及芽，其中以处理A4的培养基出芽数最多，出芽率最高，培养基上生出较多的白色不定根。所以该处理MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.7％最适宜愈伤组织诱导分化和芽的形成。

2.3不同激素水平对三角紫叶酢浆草增殖的结果及分析

将诱导培养基中已分化的丛生芽移入增殖培养基中培养，每瓶移入丛生芽2~3个，共13瓶。15天后统计情况如表5所示。

表5可见，随着NAA的浓度的提高，丛生芽增殖率逐渐上升，在NAA为0.2 mg/L时增殖率为229%，增殖效果较好。当NAA的浓度高于0.5 mg/L时增殖率开始下降，且叶片出现畸形。在6-BA单因素实验中，植株均较弱，说明6-BA的浓度过高或过低对于增殖均不利。基于以上情况丛生芽生长的最佳培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.7％，在此培养基上成苗率高，芽苗粗壮，长势好。

3讨论

3.1外植体选取和消毒的关系

材料的初代培养是植物组织培养过程中较为重要的一个步骤，也是整个培养能否成功的关键步骤。相关报道认为紫叶酢浆草的诱导培养选择叶片作为外植体更易形成愈伤组织或分化不定芽。但叶片组织细胞较嫩，在消毒处理时经过自来水的冲洗，容易受到机械损伤，经HgCl2消毒后，叶片变得软而难以切割，材料的利用效率不高。以叶柄为外植体材料进行组织培养虽然效果不如叶片，但材料的利用率比较高。如果能从培养基的配方上作些改进，从而提高叶柄培养愈伤组织的诱导率，对生产具有一定的指导意义。

3.2白色不定根的作用

我们在对三角紫叶酢浆草外植体的诱导中发现，外植体先膨大分化出少量愈伤组织，然后分化形成大量不定根，其上有大量白色绒毛，最后愈伤组织才分化出芽(注:不定根和芽长于愈伤组织的不同部位)。该现象有人认为是植物体内的IAA和外源的细胞分裂素诱导了不定根的分化[6]。李霖等[5]认为不定根上的白色绒毛为愈伤组织。王利等[4]认为观察到分化不定芽早的或不定芽长势好的外植体，不定根往往较多，这和我们观察到的现象一致。不定根是否有利于外植体对营养成分的吸收有待于进一步研究。

（收稿：2008-12-10）

参考文献

[1] 王 志，朱万琴，李风忱.紫叶酢浆草的组织培养和快速繁殖[J].农业科技通讯，2007，(3):53-53.

[2] 李海燕.紫叶酢浆草的园林应用及培育技术[J].北方园艺，2007，(2):13.

[3] 王旭昭.紫叶酢浆草栽培技术与推广应用[J]，安徽农业科学．2007，35(36)：11905，11922．

[4] 王利，王永清，张帆．三角紫叶酢浆草离体培养植株的再生研究[J]．安徽农业科学，2005，(02)：238-239，315．

[5] 李霖，宋宜颖，鲁润龙，等．紫叶酢浆草的组织培养[J]．植物生理学通讯， 2002，38(4):360-360．

[6] 胡国富，李凤兰，胡宝忠.三角紫叶酢浆草的组织培养[J]．北方园艺，2008，(6):176-178.