结直肠癌中ＭＭＰ－１４及ＣＤ４４ｖ６表达及临床意义

刘芝兰　杨延焕

【摘要】 目的 探讨MMP-14及 CD44v6与结直肠癌临床病理因素的关系。方法

对68例结直肠癌中MMP-14及CD44v6的表达进行免疫组化检测。结果

MMP-14及CD44v6在正常肠黏膜组织及结直肠癌中的表达差异显著，不同性别及组织分型结直肠癌中MMP-14及CD44v6的表达无差异性，Dukes分期C-D期中MMP-14与CD44v6的表达明显高于A-B期

(P<0.05)。结论

结直肠癌中CD44v6及MMP-14中表达的检测，对结直肠癌侵袭性和预后的评估有实际的临床意义。

【关键词】 结直肠癌； MMP-14； CD44v6； 侵袭

Expression of MMP-14 and CD44v6 in colorectal carcinoma

LIU Zhi-lan，YANG Huan-yan.

Department of Digestion, Qinghai Provincial Peoples Hospital, Xining,

810007, Qinghai Province, China

【Abstract】Objective To investigate the relationship between the

expression of MMP-14 and CD44v6 with clinicopathologic features of colorectal

carcinoma. Methods The expression of MMP-14 and CD44v6 in 68 cases of

colorectal carcinoma was detected by using SP immunohistochemical

technique. Results The difference of MMP-14 and CD44v6 expression between

colorectal carcinoma and normal colorectal tissues had statistical

significance(P<0.05). The positive expression of MMP-14 and CD44v6 was

correlated with Dukes stage(P<0.05), was no relationship with pathological

types and sex. Conclusions The expression of MMP-14 and CD44v6 had a

close relationship with the invasion of colorectal carcinoma. Examination

of expression of these two proteins may be helpful to judge biological

behavior and prognosis of colorectal carcinoma.

【Key words】 colorectal carcinoma； MMP-14； CD44v6； invasion

检测膜型基质金属蛋白酶MMP-14和黏附分子CD44v6

在68例结直肠癌中的表达情况，探讨它们与癌组织侵袭和转移的关系，为临床上进一步了解结直肠癌生物学行为、判断预后和指导治疗提供依据。

1材料与方法

1.1 一般资料

68例结直肠癌病例来源于青海省人民医院与解放军536医院2003年2月至2007年11月手术切除后病理诊断的存档蜡块，并调阅相关临床与病理资料且按Dukes标准分期。68例结直肠癌中男41例，女27例，男女之比为1.52∶1，年龄24～76岁,平均54.4岁。高分化腺癌21例，中分化腺癌34例，低分化腺癌8例，其他类型5例。Dukes分期：A-B期39例，C-D期29例。另取切除的切缘正常结肠壁组织10例作对照。

1.2 免疫组化染色及结果判断

免疫组化染色使用二步法，即用型MMP-14、CD44v6兔抗人多克隆抗体及第二代通用型二步法检测系统（pv-9000）购自北京中杉金桥生物技术限公司。MMP-14、CD44v6在胞浆中呈黄色至深棕色颗粒显色。染色结果按细胞染色强度和染色细胞所占面积二者积分之和来判断。染色强度积分为：不染色=0，轻度染色=1，中度染色=2，强染色=3；染色面积积分为：无细胞染色=0，<25%细胞染色=1，25%～50%细胞染色=2，>50%细胞染色=3。若2种积分之和>2，则为阳性表达，≤2则为阴性表达。

1.3 统计学分析

统计分析用χ2检验，使用SPSS11.0统计软件。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 正常结肠黏膜与结直肠癌中MMP-14、CD44v6的表达

10例正常肠黏膜中MMP-14及CD44v6均为阴性表达，68例结直肠癌中，MMP-14阳性表达19例，CD44v6阳性表达17例，MMP-14与CD44v6在正常肠黏膜与结直肠癌中的表达差异显著。(见表1)

01

2.2 MMP-14、CD44v6的表达与结直肠癌临床病理因素的关系

不同性别及组织分型中MMP-14与CD44v6的表达无差异性，而Dukes分期C-D期中MMP-14与CD44v6的表达明显高于A-B期

(P<0.05)。(见表2)

2.3 结直肠癌中CD44v6与MMP-14表达间的关系

CD44v6阳性表达组中的MMP-14阳性表达率高于CD44v6阴性表达组，差异显著。(见表3)

3 讨论

肿瘤细胞的浸润及转移与肿瘤细胞的运动、黏附、基底膜及细胞外基质的降解等多种机制相关。基质金属蛋白酶(matrix

metalloproteinases, MMPs)

是由多种锌离子依赖性酶组成的能降解细胞外基质蛋白的酶系家族，膜型金属蛋白酶MMP-14是MMPs家族中的一种特殊蛋白酶，MMP-14可降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白FN，参与包括基膜等细胞外基质降解过程，还可以通过激活基质金属蛋白酶MMP-2酶原，活化MMP-2进一步增强其降解作用[1]。而黏附分子CD44是一种跨膜糖蛋白，参与细胞与细胞、细胞与基质之间的特异性黏附。其中含有外显子v6的异构体CD44v6能与基底膜及细胞外基质的透明质酸结合，且易与毛细血管后小静脉中的高柱状内皮细胞结合，使肿瘤更易进入淋巴系统及循环系统[2]。研究显示CD44v6与肝癌、乳腺癌及肺癌等多种恶性肿瘤的浸润及转移密切相关[3-5]。而MMP-14在宫颈癌、乳腺癌及喉癌中的表达与肿瘤的分期、分化及淋巴结转移情况呈正相关[6-8]。本组研究中，MMP-14与CD44v6在正常肠黏膜组织及结直肠癌中的表达差异统计学意义(P<0.05)，说明恶性肿瘤细胞的黏附与降解基底膜和细胞外基质的能力强于正常组织。但中、低分化与高分化的癌组织间MMP-14与CD44v6的表达无差异性，而Dukes分期C-D期中MMP-14与CD44v6的表达明显高于A-B期

(P<0.05)，因Dukes分期以有淋巴结及远处器官转移作为C、D期的标准，显示MMP-14与CD44v6阳性表达的结直肠癌组织侵袭性强且易转移。以上结果与张翠萍等[9]及曹歌等[10]研究报道CD44v6在结直肠癌组织的阳性表达率与肿瘤的大小、分化高低、浸润深度、临床分期及淋巴结转移相关的结果不完全一致，可能与研究对象的选择及例数有关，对此尚需进一步研究。同时CD44v6阳性组结直肠癌中的MMP-14阳性表达率高于CD44v6阴性组，差异统计学意义(P<0.05)。提示肿瘤的浸润与转移过程中，肿瘤细胞对基底膜和细胞外基质的降解可能与其特异性黏附能力相关。以上结果显示CD44v6及MMP-14可以作为临床上判断结直肠癌预后的指标，结直肠癌中CD44v6及MMP-14中表达的检测，对结直肠癌侵袭性和预后的评估有实际的临床意义。

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