摘 要: 雏鹅痛风是由鹅星状病毒感染引起的一种传播范围极广的传染病。自2017年国内发现雏鹅痛风病例后,该病在我国多省份养鹅地区发生,且暂无特效药使用,严重制约我国养鹅业健康快速发展。本文介绍了一例雏鹅痛风病例的鉴别诊断,并提出了防控措施,旨在为雏鹅痛风的综合防控提供参考。
关键词:雏鹅痛风;鹅星状病毒;诊断;防控
中图分类号:S858.33 文献标识码:C 文章编号:1673-1085(2024)07-0097-03
引起鹅痛风的原因有多种,包括肾脏功能障碍、饲料蛋白质过高、严重饮水不足、中毒或疾病等因素。近年来,一种引起雏鹅痛风的传染性疾病在我国江苏、山东、河南、辽宁、黑龙江等养鹅地区发生,该病主要感染2周龄以内的雏鹅,患病雏鹅主要以心脏、肝脏表面和关节处有大量尿酸盐沉积为主要症状,随后被研究证实致病原为鹅星状病毒。
1 "病例情况
2020年5月,黑龙江省齐齐哈尔地区某养殖户低温送检病死雏鹅6只。经询问。该鹅场养殖了1 000只雏鹅,发病群体为三花鹅,鹅群5~6日龄开始发病,12日龄时死亡雏鹅达到210只,给养殖户造成较大的经济损失,随后来我处就诊。
2 "临床症状
患病雏鹅精神沉郁,采食量下降,消瘦体弱、羽毛蓬乱,四肢无力、关节肿胀、单腿跛行,排白色水样稀便等。
3 "剖检病变
对病死雏鹅剖检,打开腹腔可见皮下及腹膜上有点状尿酸盐沉积,心脏表面及肝脏表面有大量白色尿酸盐沉积。胆囊肿大,内有灰白色尿酸盐颗粒沉积。肾脏明显肿大、斑驳,输尿管内可见大量白色尿酸盐沉积(图1)。剖开腕关节和趾关节,可见大量白色尿酸盐沉积。
4 "流行情况
鹅养殖业是我国传统产业,随着该行业的不断发展,鹅疫病渐渐有旧病新发的趋向。2017年以来,我国多省份地区雏鹅群发生一种以内脏表面和关节尿酸盐沉积为典型病症的传染病,病原确诊为鹅星状病毒[1]。该病一年四季均可发生,高发季节在每年冬季到次年夏季前这一期间。该病主要感染4周龄以内的雏鹅,其中2周龄以内的雏鹅最易感,且死亡率可高达50%[2]。患病鹅和带毒鹅是本病的主要传染源,星状病毒主要通过水、饲料和粪便等被病毒污染的物质水平传播,在鹅胚中检测到鹅星状病毒,证明该病也可以垂直传播[3]。
5 "实验室诊断
根据临床症状和剖检病变可以做出初步诊断,确诊需进行实验室诊断。目前在流行病学调查和临床病例确诊中,分子生物学检测方法作为检测病毒的常规方法被广泛应用。实时荧光定量PCR方法被应用于鹅星状病毒的检测,该方法重复性高、灵敏度强、特异性强,为鹅星状病毒的早期快速诊断以及定量提供了新的技术手段[4]。有研究显示,环介导等温扩增技术被应用于鹅星状病毒检测,能够快速准确地检测出病原,为检疫部门和养殖基地等提供了一种快速、便捷、有效的检测手段[5]。随着鹅产业的不断发展,鹅疫病出现了混合感染的现象,越来越多的多重检测方法被建立,用来检测鹅星状病毒和可能混合感染的其他病毒[6]。多重检测方法使流行病学的调查更简便、快捷、省时。
本实验室采用的聚合酶链式反应(PCR)方法是目前实验室诊断鹅星状病毒常用的技术手段之一。无菌采集病死雏鹅肝脏、脾脏和肾脏病料,分别接种于绵羊血琼脂培养基和营养琼脂培养基进行细菌培养,37 ℃培养24~48 h,结果显示本次检测无细菌感染。同时进行鹅胚病毒接种:将上述病料放入已灭菌研钵中,一边加入生理盐水一边研磨,将研磨后病料悬液反复冻融、离心和过滤除菌;将获得的病毒悬液经尿囊膜接种于鹅胚,0.2 mL/枚,置温箱37 ℃培养孵育,观察鹅胚生长发育情况,弃去24 h内死亡鹅胚,收集168 h内死亡鹅胚尿囊液。根据病毒DNA/RNA提取试剂盒说明书对尿囊液进行病毒基因组提取,根据反转录试剂盒说明书将提取的基因组反转录为cDNA,以其作为模板进行PCR扩增。应用本实验室设计的引物进行PCR扩增,引物序列:上游引物(F)5'-TTTCACGGGATGCCGATTAC-3';下游引物(R)5'-ACTCATGTCCGCCCTTCTCA-3'[6]。PCR反应体系(总体积50 μL):2×预混酶25 μL,上游引物1 μL,下游引物1 μL,模板1 μL,ddH2O 22 μL。PCR反应程序:94 ℃预变性5 min;94 ℃变性30 s,57 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,共32个循环。PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示能够扩增出885 bp的目的条带,对目的条带进行胶回收纯化,送往试剂公司进行测序,经过序列比对最终确诊为鹅星状病毒感染。目的基因的PCR扩增结果见图2。
6 "防控措施
雏鹅感染星状病毒后致死率高,即使雏鹅未死亡,生长也会受到抑制,严重影响鹅产业的健康快速发展。不同省份之间的流行毒株存在差异,疫苗适用性不强,应建立快速有效的检测方法,早发现、早防疫。目前,针对鹅星状病毒的研究重点应放在研制高效疫苗及特效治疗药物,这对鹅星状病毒的防控极其重要。
6.1 "加强饲养管理
鹅星状病毒主要是通过口粪途径进行传播扩散,所以一定要保证饲养环境的卫生。鹅舍、舍外运动场等做到定期清扫和消毒,鹅群生活密度不易过高,保障空气流通;及时清理排泄物,病死雏鹅和被污染的物品及时消毒、深埋或焚烧,以防止疾病的进一步扩散传播;对饮食、饮水等器具定期进行消毒;在饲料营养及添加剂方面,根据鹅群不同生长阶段对营养物质的不同需求进行适宜的添加和适度饲喂,注意各种维生素的适宜供给量,确保鹅群对营养物质正常代谢,避免尿酸在雏鹅体内过分蓄积。应尽量避免可能引起鹅应激的各种因素,如换舍、转群、低温、高温、捕捉、光照变化等,这些因素都会影响鹅的生长发育,进而降低鹅免疫力。当有诱使鹅产生应激的因素发生时,可在饲料中添加维生素C、维生素E和黄芪多糖粉剂等具有增强免疫力和提高抗应激能力的物质,增强机体抵抗力,尽量减少疾病的发生。
6.2 "治疗方法
目前治疗鹅星状病毒尚无特效药物,急需研制出一种快速、有效的兽用生物制品防治该病。有研究[7]显示,建立鹅星状病毒卵黄抗体生产工艺,研制出一种安全、有效的鹅星状病毒卵黄抗体,对雏鹅攻毒保护效果可达80 %,具有潜在的临床应用价值。此外,临床上也可以尝试对患病雏鹅进行中药治疗,治疗原则为抗病毒、清热、通淋等。由茯苓、板蓝根、白术、黄连、黄芩、党参、栀子、车前草、川木通、滑石等组成的中药方剂,在连续用药几天后,可以降低雏鹅的死亡率[8]。目前有关中草药治疗鹅星状病毒病的研究非常少,需要加强这一方向的研究,为该病的治疗提供一定的应用参考。
参考文献:
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[8] "陈琳.一例新型鹅星状病毒引起雏鹅痛风的中药治疗[J].畜牧兽医科技信息,2020(06):169-170.