中药活性肽的制备、分离纯化及鉴定研究进展

摘要：近年来研究发现，来源于水蛭、土鳖虫、蜈蚣等中药的活性肽具有显著抗凝血、调节血脂、抗肿瘤等药理活性。活性肽组分结构及化学性质接近，选用适宜的制备分离及鉴定方法以获取中药活性肽是研究的关键。然而相对于食品、水产等行业，中药活性肽分离纯化及鉴定的研究相对较少。为此，本文综述近年来中药活性肽制备分离纯化及鉴定相关方法，阐述其原理及特点，以期为中药活性肽的开发和应用提供参考。

关键词：中药活性肽;分离纯化;柱层析;膜分离;质谱;结构鉴定

中图分类号：R927" " " " " " " " " " " " " " " " " " 文献标识码：A" " " " " " " " " " " " " " " " DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2024.23.044

文章编号：1006-1959（2024）23-0186-07

Research Progress on Preparation， Separation， Purification and Identification

of Active Peptides from Traditional Chinese Medicine

Abstract：In recent years， studies have found that active peptides derived from leech， eupolyphaga， centipede and other traditional Chinese medicines have significant anticoagulant， blood lipid regulation， anti-tumor and other pharmacological activities. The structure and chemical properties of active peptides are similar. The key to the study is to select appropriate preparation， separation and identification methods to obtain active peptides from traditional Chinese medicine. However， compared with food， aquaculture and other industries， there are relatively few studies on the separation， purification and identification of active peptides from traditional Chinese medicine. Therefore， this paper reviews the methods of preparation， separation， purification and identification of active peptides from traditional Chinese medicine in recent years， and expounds its principles and characteristics， in order to provide reference for the development and application of active peptides from traditional Chinese medicine.

Key words：Active peptides from traditional Chinese medicine;Separation and purification;Column chromatography;Membrane separation;Mass spectrum;Structural identification

中药活性肽是由中药中的蛋白质、多肽经酶解等方法得到的裂解产物。相对于大分子蛋白质、多肽，活性肽相对分子量主要分布在5 KDa以下，具有活性高、易吸收等特点。目前研究的中药活性肽一般源于水蛭、土鳖虫、蜈蚣等动物类中药，这些活性肽具有显著抗凝、调节血脂、抗肿瘤等药理作用[1-3]。为了从不同结构蛋白质、多肽、氨基酸等成分中筛选并获取中药活性肽，选用适宜的制备分离及鉴定方法尤为重要。本文综述近年文献关于中药活性肽的制备分离及鉴定研究进展，以期为中药活性肽的进一步研究提供参考。

1中药活性肽的制备

活性肽的制备方法主要包括酶解法、水提取法、化学合成法、微生物发酵法[4，5]、基因重组法[6]等，目前中药活性肽的制备方法大多仍为酶解法、水提取法、化学合成法，微生物发酵法、基因重组法有待在后期中药活性肽的制备时进行考察。

1.1酶解法" 活性肽是蛋白质的酶解产物，酶解法是制备活性肽最常用的方法，其具有高效、专一、安全等特点，利用酶解将活性基团暴露，使得活性肽产生多种药理活性。酶解法常用的酶有胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等，不同种类酶的酶切位点及条件不尽相同，如胃蛋白酶选择性的切断由芳香族氨基酸或亮氨酸构成的肽键，胰蛋白酶选择性的切断由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽键[7]，不同的酶在不同的酶解条件下获得的肽在分子量分布、药理活性等方面存在差异。采用酶解法制备活性肽时，常需考察酶的种类、酶的用量、温度、pH等因素。

任尧[8]考察不同酶酶解宽体金线水蛭及东亚钳蝎分离蛋白所得产物的抗凝血活性，结果均以碱性蛋白酶组抗凝血活性最高，经HPLC测定酶解产物相对分子量以小于5 KDa的为主。王世信等[9]采用水煎煮、匀浆、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解以及仿生酶解等方法对芪参还五胶囊中地龙、水蛭、全蝎三种虫类药材进行提取，发现采用仿生酶解法酶解时抗凝血及溶栓活性最高，并以总蛋白得率、抗凝血活性等指标进一步优化酶用量、酶解时间、药材粒度，获得了最佳的酶解工艺。杨丹等[10]以鳖甲肽类组分提取率和ACE抑制率为指标优选鳖甲酶解所需蛋白酶，发现采用碱性蛋白酶酶解时肽类组分提取率和ACE抑制率均最高;另采用响应面法进一步优选碱性蛋白酶酶解鳖甲工艺，发现影响鳖甲肽类组分提取率的主要因素依次为pH 值、提取温度、提取时间。

1.2水提法" 动物药在临床应用时多以水煎煮或打粉入药，通过煎煮使得蛋白质或多肽水解，可获得具有一定生理活性的肽类组分，具有简便易行等优点。李水清等[11]以多肽提取量和浸膏得率为指标考察鳖甲多肽的水提取工艺，发现提取次数对浸膏得率有显著性影响，提取时间及次数对鳖甲肽的提取量有显著性影响，且采用优化后的工艺所得鳖甲水提液经过二次超滤，得到相对分子量lt;8 KDa的多肽纯度为57.62%。李晶峰等[12]采用石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水共4种不同极性溶媒提取4种动物药，结果均以水提取液的活性最强，并且各组分中lt;3 KDa的小肽段活性明显强于蛋白、多肽部。

1.3化学合成法" 肽的化学合成法包括液态和固态合成法，液态合成法由于每次接肽后要对产物进行分离纯化以去除副产物或未反应的原料[13]，步骤繁琐，技术要求较高，现一般采用固相合成法。固相合成在单个容器中可完成全部反应，偶联后可冲洗去除副产物或未反应的原料，相对简便快捷，是实验室制备10～100肽的有效方法[14]，现多以采用Fmoc固相合成法从而使N端α-氨基得到保护，更好的避免副反应的发生。

欧阳小健[15]采用液质鉴定和分子对接技术筛选得到17条具有潜在抗氧化活性的当归活性肽，采用Fmoc固相合成法合成17条当归活性肽，通过DPPH法和ABTS法发现其均具有一定抗氧化能力，其中肽段序列中含有抗氧化氨基酸酪氨酸（Y）的肽具有显著抗氧化活性。姜珊等[16]采用固相合成法合成土鳖虫活性肽DAVPGAGPAGCHPGAGP（DP17），采用HPLC法检视合成的DP17纯度为99.5%，采用PEP-FOLD3预测其肽结构发现DP17存在α螺旋和β折叠。董萍萍等[17]经前期分离鉴定得到具有调节血脂活性的土鳖虫活性肽LAPAPGTL（LL8），采用固相合成法合成后获得的LL8纯度为99.5%，将LL8经异硫氰酸荧光素进行N段修饰得到FITC-LL8后进行大鼠体内药动学试验，发现高、低剂量的LL8半衰期相近，属于快速代谢型药物。

2中药活性肽的分离纯化

2.1膜分离" 膜分离法是利用经特殊制造的具有选择透过性的薄膜，根据目标产物的分子量大小或与薄膜材质的亲和性差异，在外力（如膜两侧的压力差、浓度差、电位差等）推动下对混合物进行分离、提纯、浓缩而获得目标产品的过程[18]。常用的膜分离法包括微滤、超滤、纳滤、渗析等。

2.1.1超滤法" 超滤是一种加压膜分离技术，其膜的主要材质为醋酸纤维素、聚乙烯或其他高分子材料，膜的孔径一般在1～20 nm，类型有卷式膜、平面膜、中空纤维膜等，其中分子量小于超滤膜截留量的溶质可通过超滤膜，而大分子的溶质被截留[19]。由于蛋白质、多肽的酶解程度不一，酶解液中活性肽的分子量分布较广，而发挥药理活性的往往是某一分子量段的组分，使用超滤法可达到分离纯化的目的。

在中药活性肽的分离纯化方面，刘庆丰等[20]采用1 KDa、3 KDa卷式超滤膜对除盐后的土鳖虫仿生酶解液进行分离，其中截留的分子量在1～3 KDa超滤液中肽的含量最高，占70.84%;另通过对比超滤所得不同分子量段的活性肽凝胶及其水溶液的累计渗透率，发现分子量越小的活性肽透皮性越好。吕行直[21]将壁虎经处理后所得醇提物用3 KDa超滤管进行低温离心超滤，获取分子量小于3 KDa的活性肽部位，采用CCK8法检测发现其对DU 145、Ec 9706等癌细胞具有明显抑制作用，后将超滤物采用葡聚糖凝胶G-25及羟丙基葡聚糖LH-20进一步分离活性肽。王佳茜等[22]采用3000 Da、1500 Da超滤膜对地龙酶解脱盐液进行超滤处理，设定压力为0.3 Mpa，流速为20 L/h，同时采用恒容间歇方法进行试验，将地龙酶解脱盐液分离得到分子量lt;1500 Da、1500～3000 Da和gt;3000 Da的3种溶液，纤维平板纤溶试验发现分子量lt;1500 Da的超滤溶液具有较好的体外纤溶活性。总之，超滤法操作简单、效率高、环保安全，可将分子量差距较大的活性肽快速分离，一般作为活性肽有效部初步分离，但是超滤膜容易堵塞和污染，需及时清洗，对于分子量较为接近的活性肽分离效果不佳，需要结合柱层析等方法进一步分离。

2.1.2纳滤法" 纳滤（nanofiltration membrane， NF）是一种膜孔径为1～10 nm的压力驱动膜，是介于反渗透和超滤之间的压力驱动膜分离过程[23]，具有分子筛分效应和电荷效应两种机理，可截留相对分子量大于200 Da的多价离子和有机分子。因此，相对分子量小于200 Da的单价离子与有机小分子会透过纳滤膜进入透过液，其主要是因纳滤膜的表面分离层是由聚电解质所构成，对离子有静电相互作用，所以纳滤膜可用来脱盐。

芦鑫等[24]采用NFM纳滤膜对芝麻蛋白胰酶酶解液脱盐，经过3次纳滤除盐后，除盐率达到99%，活性肽的回收率约为98%，表明纳滤法对活性肽具有良好的除盐效果，且可减少损失活性肽。李华健等[25]采用3 KDa超滤膜和1 KDa纳滤膜对宽体金线水蛭酶解液进行分离，获得分子量gt;3 KDa、1～3 KDa和lt;1 KDa的部位，采用Fibg-TT法测定抗凝活性发现分子量lt;1 KDa的活性肽部位活性最好。

膜污染是应用纳滤膜时易出现的问题[26]。丰桂珍等[27]研究发现，疏水性大分子有机物是污染纳滤膜的主要物质，通过前期超滤等前处理工艺去除疏水性有机物，可减轻纳滤膜的负荷，延缓膜污染。

2.1.3电渗析法" 在采用酶解法制备中药活性肽时，为使酶活性提高需加入适量的酸、碱调节至适宜pH，在这过程中会产生大量盐，这些盐经多级膜过滤、超滤等环节不易除去，进而影响下一步的分离纯化。电渗析法的原理是：在外加电场的作用下，正负盐离子分别被吸附通过对应的正负离子交换膜，盐离子被转移至另一水体中，实现原液的脱盐淡化[28]。

于帅等[29]以电导率、除盐率和肽回收率为指标优化猪皮仿生酶解液电渗析除盐工艺，得出酶解液在电压31 V、流速15 L/h、除盐时间2 h、药液浓度200 mg/ml的条件下进行电渗析除盐效果最好，平均除盐率为93.58%，且肽回收率达82.28%。王少平等[30]以脱盐率、肽损失量、固体物质保留量为指标，考察DA201-C大孔树脂、LSD001串联D201-C的阴阳离子混合树脂、纳滤、电渗析4种方法对土鳖虫酶解液的除盐工艺，结果发现电渗析除盐时肽的损失最小，同时除盐率达到90%以上，优化后的除盐工艺参数为酶解液pH为6.5、除盐时间150 min、药液浓度为500 mg/ml。

2.2柱层析分离

2.2.1葡聚糖凝胶柱层析" 葡聚糖凝胶柱层析的固定相是具有多孔性三维空间网状结构的高分子化合物，为惰性的珠状凝胶颗粒，其微孔能吸入大量的溶剂，可溶胀至干体积的多倍[31]。经过葡聚糖凝胶柱层析吸附后，大分子物质无法进入颗粒的内径，会随流动相从凝胶颗粒的间隙中被先洗脱出来，而小的分子可进入凝胶颗粒的内部，洗脱路径较长，被后洗脱出来，利用其分子筛作用，可对蛋白质、活性肽、多糖等成分进行分离纯化，具有作用温和、方便快捷等特点[32]。

姜丽等[33]依次采用葡聚糖凝胶G-50、G-25柱层析对蜈蚣胃蛋白酶解物进行分离纯化，发现经去离子水洗脱后获得的F3-3部位具有较好抗凝药效，将F3-3部位采用C18反向柱色谱分离后经MALDI-TOF-MS分析发现，活性部位为分子量为lt;1 KDa的小分子活性肽。王少平等[34]考察Sephadex G-15、Sephadex G-25对雄土鳖虫仿生酶解液过DA201-C大孔树脂50%乙醇洗部位的分离效果，结果发现Sephadex G-15对该洗脱部位分离效果较差，Sephadex G-25可将该洗脱部位明显分为P1、P2、P3共3个峰，进一步通过体外溶栓实验发现P2、P3组分的抗凝活性和溶栓活性都比P1组分要强。

由于中药活性肽的分子量一般在10 KDa以下，目前已报道的研究中多采用G-50（分离范围1 K～30 KDa）、G-25（分离范围1 K～5 KDa）、G-15（分离范围lt;1500 Da）3种规格葡聚糖凝胶柱层析进行活性肽的分离纯化。在使用葡聚糖凝胶柱层析分离活性肽时，适当增加层析柱的长度可明显改善分离效果，另外在收集洗脱液时，适当减小每收集管的洗脱体积也可达到更好的分离效果。

2.2.2大孔吸附树脂柱层析" 大孔吸附树脂对蛋白质、活性肽、黄酮等有着良好的分离效果，具有吸附量大、使用条件温和、操作简便等特点，近年来在生物活性肽的分离纯化中已广泛应用[35-38]。

在中药活性肽分离纯化应用方面，魏芳等[39]考察AB-8、DA201-C、DA-201C和D101共4种不同规格大孔树脂对阿胶低聚肽的脱苦效果，通过考察大孔树脂的吸附量和解吸量，发现DA201-C型大孔吸附树脂对阿胶低聚肽的分离效果最好，采用25%的乙醇洗脱后收集的组分苦味较分离前显著降低，考虑其原因为25%乙醇洗脱时引起苦味的疏水性氨基酸解吸率最低。王佳茜等[40]考察DA201-C、AB-8、D101共3种大孔树脂对地龙双酶酶解液的吸附率，结果以DA201-C大孔树脂的吸附率最高，通过静态和动态吸附考察进一步优化上样浓度、pH、上样速度、吸附时间，有效成分的吸附率接近90%。

需要注意的是，大孔树脂在使用前内部常存在甲苯、苯乙烯等未聚合的致孔剂、引发剂，影响活性物质分离效果及安全性[41]。因此，在使用前必须经厂家推荐的预处理方式以去除内部残留物志，反复使用大孔树脂后常会导致层析柱颜色变深柱效降低，需要经再生处理后才能继续使用。

2.2.3离子交换树脂柱层析" 活性肽样品一般为多种肽的混合物，因不同肽的等电点不尽相同使得其电荷性不同，离子交换色谱可将活性肽样品带电荷离子与离子交换色谱固定相中带相反电荷的基团结合，然后通过不同离子强度或pH的洗脱液洗脱，活性肽会由于电荷性差异被先后洗脱下来，从而达到分离纯化的目的[42]。根据离子交换柱固定相的不同，可分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂。

李开等[43]采用DEAE Sepharose Fast Flow对薏苡仁谷蛋白酶解液3 KDa以下超滤组分进行分离，采用0～0.2 mol/L浓度梯度的NaCl-二乙醇胺缓冲液进行洗脱后获得7个洗脱组分，以0.02 mol/L NaCl洗脱获得的A2组分ACE抑制活性最高。宋晓光等[44]通过文献研究发现，水蛭素的碳端富含酸性氨基酸残基，是其产生抗凝活性的关键因素，在分离水蛭肽时将前期分离得到的活性肽溶液调pH至4，采用D201阴离子树脂对水蛭活性肽进行分离，结果以含2.5%氯化钠的25%乙醇溶液、含2.5%氯化钠的50%乙醇溶液进行洗脱所得活性肽的得率及抗凝活性较高。

离子交换色谱可保留多肽的生物活性，通常与凝胶过滤色谱联用会达到比较理想的分离效果，但选取合适的离子交换柱，探明合适的洗脱条件比较繁琐。

2.2.4反相高效液相柱层析" 反相高效液相柱层析也称反相高效液相色谱法，是分离活性肽的常用方法。活性肽中存在弱极性的组分可与十八烷基键合硅胶等非极性固定相结合，采用不同极性的洗脱液进行洗脱时，不同极性活性肽与固定相的结合力不同，使得活性肽被先后洗脱出来，从而达到分离目的[45]。

程琼[46]利用盐析法获得牛膝多肽混合物ABPP，采用半制备型C18反相柱层析进行梯度洗脱分离牛膝多肽，制备其二级组分，获得了12个多肽组分;且其体外活性试验研究发现，ABPPk组分具有显著促神经元生长和抗氧糖剥夺损伤的作用。周怡君等[47]将前期获得的鹿角盘总蛋白采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）进行梯度洗脱，得到5个分离峰组分，获得的目标活性肽经液质联用（LC-MS/MS）测定其相对分子质量为4543.14，采用质谱分析并鉴定该活性肽的氨基酸序列为EAVLRAVDQFNKR。

反相高效液相柱层析分离分辨率高、灵敏度高、分离效果好，但分离设备较为昂贵，上样分离量较小，不适合大规模分离制备活性肽，另外对于极性较大的小分子活性肽由于吸附性较弱，其真分离效果欠佳。

2.3电泳法" 活性肽组分常带有不同的电离基团，分子量分布较广，在某个pH下会带正电或负电，在电场作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动，进而达到分离的效果。

活性肽常用的电泳分离法有聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）、三羟甲基氨基甘氨酸凝胶电泳法（Tricine-SDS-PAGE），曲颖等[48]分别采用SDS-PAGE法和Tricine-SDS-PAGE法分离壁虎活性肽，发现Tricine-SDS-PAGE法能分离获得的条带数量明显多于SDS-PAGE法，说明Tricine-SDS-PAGE法更适合小分子活性肽的分离。

电泳技术分离效果好、分离速度快、选择性强，其单独使用或与其它分离方法一同使用均有良好的分离效果，但可能导致多肽活性丧失[49]。

2.4其他处理方法" 天龙经仿生酶解后获得具有抗肿瘤活性的活性肽[50]，然而天龙药材中含有大量的油脂，影响活性肽的进一步分离纯化。马睿等[51]采用固体石蜡法对天龙酶解液进行脱脂处理，发现具有良好的脱脂效果且有效成分损失较少，可为动物药酶解液的脱脂提供参考。

3中药活性肽的鉴定

中药活性肽的鉴定主要包含活性肽的氨基酸序列、相对分子量大小以及结构分析等，当前中药活性肽鉴定方法有质谱法、液质联用法、红外光谱法以及核磁共振法等，以质谱法及液质联用法较为常用。

3.1质谱法" 质谱法（mass spectrometry， MS）是利用质谱仪将活性肽、蛋白质等组分电离生成不同荷质比的离子，然后按其质荷比的不同对成分和结构进行分析的方法，具有灵敏度高、准确度高等优点。质谱图的精准度是活性肽鉴定的关键，近年来电喷雾技术（ESI-MS）和基质辅助激光解吸技术（MALDI-TOF-MS）在中药活性肽的鉴定中应用较多。

常规离子化方法容易将一些完整大分子解离为碎片，而MALDI-TOF-MS是一种温和离子化技术，可以得到完整大分子质谱信息，是目前活性肽分析鉴定的常用工具，其原理为基质吸收光子后产生的能量转移到活性肽样品，样品瞬间气化后形成带单一电荷的活性肽离子，离子进入飞行时间质量分析仪形成质谱图，进而可快速准确的分析活性肽的相对分子质量和氨基酸序列[52]。姜珊等[16]采用MALDI-TOF/TOF 辅助激光解析飞行时间质谱对土鳖虫降脂活性肽进行氨基酸序列分析，经一级质谱分离后选择高信号的肽段离子分析其二级质谱，经过分析肽序列为DAVPGAGPAGCHPGAGP（DP17）。侯会会[53]通过MALDI-TOF-MS对菲牛蛭抗凝血活性肽进行鉴定，经分析后发现其m/z有两个显著的峰为525.264和569.3，确定该活性肽为一种寡肽。

电喷雾质谱法（ESI-MS）是一种软电离质谱技术，可直接分析溶液样品，由于它不像电子轰击（EI）、化学电离（CI）等常规电离技术存在样品加热汽化的过程，因此比较适合分析活性肽一类强极性、难挥发或热不稳定的化合物。魏玮[54]采用反向高效液相法将经葡聚糖凝胶G-15分离的地龙蛋白肽活性组分进一步分离，得到最佳抗凝血活性组分，使用ESI-MS/MS对该组分进行检测，采用denovo从头测序法对组分进行结构鉴定，得到3条相对分子量lt;1 KDa的活性肽序列。

3.2液质联用法" 李彦超等[55]采用超高效液相色谱-质谱联用（UFLC-MS/MS）法分析蜈蚣3种经酶解后获得的特征性活性肽类成分TD1（LEEDLERSEERL）、TD2（EEKDKALQNAEGEVAAL）、TD3（MILPTGASSF），以多反应监测模式（MRM）建立了3种特征活性肽的检测分析方法，可与水蛭、土鳖虫、全蝎等活性肽区分，并且可与非药典品蜈蚣所得活性肽组分进行区分。熊莎[56]采用HPLC-TOF-MS对前期筛选的鳖甲最佳抗肝纤维化活性肽相对分子量lt;1 KDa的组分进行鉴定，先将组分采用C18小柱进行除盐，采用HPLC进行梯度洗脱，TOF-MS进行数据采集分析，将质谱产生的原始数据采用MASCOT蛋白鉴定软件进行分析，检索NCBI中龟鳖类Chelonia蛋白库，经鉴定得到了110个肽类化合物的结构。

3.3红外光谱法" 蛋白质及活性肽中存在羰基、氨基、羧基等特征基团，此类基团在红外光谱中存在特征吸收带，红外光谱可通过特征基团的伸缩振动来推测组分中含有的基团及二级结构。史浩川等[57]采用傅立叶变换红外光谱（FT-IR）溴化钾压片法对蜂毒肽的结构进行测定，发现蜂毒肽的二级结构主要呈现α-螺旋并有部分弯曲，表明在纯化过程中其二级结构未受到破坏，猜测其仍保留生物活性。冯晓梅等[58]以红外光谱测定前期分离所得牡蛎多肽结构，红外谱图显示反式吸收（1514.69 cm-1）强于顺式吸收（1417.66 cm-1），说明该肽链是以α-螺旋的构型存在。

4总结

诸多富含蛋白质及多肽的中药在抗凝血、调节血脂、抗肿瘤等方面存在显著的药理活性，多项研究已表明活性肽是其主要药效物质，但由于活性肽组分在结构、化学性质及分子量分布等方面接近，选择适宜的制备分离手段获取目标活性肽尤为重要。现阶段已通过酶解、膜分离、柱层析等方法结合药理试验筛选得到土鳖虫降脂、水蛭抗凝血、天龙抗肿瘤等活性肽，但其制备分离工艺普遍较为繁琐且大多处于实验室研究阶段，因此有必要进一步考察更为高效、低成本、自动化的制备分离手段以满足产业化需求。另外，由于中药成分的复杂性及在临床治疗的整体性，中药活性肽有可能通过多靶点、多途径来发挥药理作用，在研究时应尽量避免片面追求分离获得单体活性肽，以药理及临床疗效为基础，在“安全、有效、稳定”的前提下，分离、制备中药活性肽有效部位具有一定的研究意义。

目前获得的活性肽大多以体外活性筛选获得，对于其作用机制研究尚不够深入，有待进一步考察其在动物乃至人体内的药理活性及安全性。在中药活性肽的构效关系研究方面，碱性氨基酸、芳香氨基酸、疏水性氨基酸在肽序列中的数量以及所处的位置对于活性有何影响值得进一步研究。虽然中药活性肽的开发还存在一些问题，但随着相关研究的不断深入以及制备分离、鉴定新技术的不断涌现及成熟，中药活性肽的开发具有广阔的发展前景。

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