芡实壳提取物的抗氧化活性及对口腔溃疡模型大鼠的治疗作用

摘要：目的研究芡实壳对口腔溃疡模型大鼠的防治作用及其潜在作用机制。方法分别以福林酚法、硝酸铝比色法测定芡实壳萃取物中多酚、黄酮含量；以DPPH·、ABTS+·、·OH和·O2- 4种自由基清除实验评价体外抗氧化活性；冰醋酸灼伤法建立口腔溃疡大鼠模型。采用酶联免疫法检测血清中氧化因子水平；HE染色观察溃疡黏膜组织病理变化；Western blot方法检测溃疡黏膜组织中Keap1、Nrf2、Nes-Nrf2 和HO-1 蛋白表达水平。结果乙酸乙酯萃取物中多酚、黄酮含量为306.74±1.04 mg/g、23.43±0.61 mg/g，其清除DPPH·、ABTS+·自由基的IC50分别是3.42±0.97 μg/mL、3.32 ± 0.90 μg/mL（Plt;0.01）；乙酸乙酯组能明显改善模型动物口腔黏膜损伤，提高血清中CAT水平、降低MDA水平（Plt;0.01），显著增加血清中NEs-Nrf2（Plt;0.01）以及HO-1（Plt;0.05）蛋白表达量、降低Keap1（Plt;0.01）蛋白表达量显著。结论芡实壳提取物对口腔溃疡有一定治疗作用，其作用机制可能是通过激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路。

关键词：芡实壳；抗氧化活性；口腔溃疡；Nrf2；HO-1；Keap1

口腔溃疡是一种常见的口腔黏膜疾病，以齿龈、舌体、两颊、上腭等处黏膜出现米粒大小近似圆形或椭圆形的浅表性溃疡为特征，发作时疼痛明显，病程长且易复发，直接影响患者日常生活［1］。临床治疗多采用局部消炎、止痛为主，但治疗效果并不明显［2］，因此寻找有效药物改善口腔溃疡症状具有重要意义。

芡实壳为包被在芡实种仁外层，厚1～2 mm的坚硬外壳［3］。芡实壳中含有丰富的多酚类成分［4， 5］，现代药理学研究表明这类成分具有较强的抗氧化能力［6， 7］，通过抑制相关氧化酶和有效清除体内过剩的自由基，保护组织免受氧化损伤［8， 9］。Rhim［10］报道大豆提取物的多酚具有清除DPPH的能力，且与多酚含量呈显著正相关。张汆等［11， 12］通过对芡实壳提取物主要生理活性和化学组成研究，得出芡实壳提取物具有很强的抗氧化活性和一定的抑菌活性且与其含有丰富的多酚物质密切相关。目前，芡实壳的研究主要集中在体外抗氧化活性及抑菌能力的评价［13-16］，提取物的体内实验及应用研究未见报道。基于氧化损伤是口腔溃疡的主要诱因，本实验从芡实壳不同极性萃取物体外抗氧化活性、对口腔溃疡模型大鼠的治疗作用开展研究，并从调控Keap1/Nrf2/HO-1信号通路角度探索其机制，旨在为芡实壳进一步开发利用提供实验依据。