白花玉簪组织培养快繁技术要点\t

摘 要 用白花玉簪腋芽作为外植体，筛选出适宜诱导增殖生根等不同阶段的配方，以及适合移栽的基质，炼苗成活率高，为白花玉簪组织培养快繁技术提供了技术参考。

关键词 白花玉簪;腋芽;组织培养

白花玉簪是百合科玉簪属多年生宿根花卉。叶丛生，花茎从叶丛中抽出，叶片卵形或卵圆形，花朵簇生或单生，喜湿润肥沃的土壤，耐阴，在园林绿化方面用途广泛，主要种植在行道树下、公园、草坡、岩石旁等。白花玉簪常用的繁殖方法有分株繁殖和种子繁殖。

近几年来，白花玉簪种苗需求量较大，分株繁殖和种子繁殖受季节影响，繁殖速度慢，生产周期长，生产成本增加，植株还容易发生变异。利用组织培养繁育能解决以上问题，并在短期内生产出大量无菌种苗。

白花玉簪组织培养外植体主要有茎段、腋芽等。以白花玉簪腋芽为材料，通过组织培养繁殖方法生产大量无菌种苗，且炼苗成功，现将白花玉簪组织培养繁殖方法总结如下。

1 外植体的选择及清洗

1.1 外植体选择 4—5月，晴天上午11：00或下午3：00前进行，选择生长旺盛、没有病虫害、花朵数量多的白花玉簪，用铲子带根挖出分糵的幼苗。挖取外植体时工具和手须消毒，防止感染。

1.2 外植体清洗 采回的幼苗先清理干净泥土和杂物后，剪掉下部须根，保留基部鳞芽，去除叶柄，在自来水下冲洗干净，再用洗衣粉或洗洁精仔细清洗，用流水冲洗1 h左右。

2 接种前的准备工作

2.1 超净台灭菌 接种前1 h打开超净台，让其处于工作状态，打开台上紫外线灯，照射20 min，关掉紫外线灯，用75%酒精对手进行消毒，再把超净台从上到下、从内到外、从左到右用75%酒精擦拭1遍。

2.2 工具灭菌 先用75%酒精擦拭刀架1遍，用镊子夹住蘸有95%酒精的脱脂棉，用酒精灯点燃后，对刀架、接种盘里外进行灼烧灭菌，灭菌好的接种盘放上滤纸。再依次对解剖刀、镊子进行灼烧灭菌，放在刀架上冷却，待用。

2.3 培养基及培养瓶灭菌 用蘸有75%的酒精脱脂棉擦拭培养基和无菌水瓶塞、瓶口、瓶身、瓶底，放入超净工作台。

3 外植体消毒

外植体清洗干净后，放在消过毒的超净工作台上，用无菌脱脂棉擦拭1遍外植体表面。

用75%酒精消毒30 s，用无菌水冲洗3遍;用有效氯1%的NaClO溶液消毒15 min，用无菌水冲洗5遍;剥去芽外侧的苞片，再用有效氯0.5%的NaClO溶液消毒5 min，用无菌水冲洗5遍。

4 诱导及培养条件

消毒好的外植体置于接种盘中，用滤纸吸干表面水分，用刀片切割出腋芽生长点，接种到诱导培养基。培养基配比如下：

（1）MS+1 mg/L 6-BA+0.1 g/L NAA+30 g/L糖;

（2）MS+3 mg/L 6-BA+0.2 g/L NAA+30g/L糖，琼脂4.7 g/L，pH值5.8。

每个培养瓶接种3个，盖上瓶塞，注明编号、日期、品种、培养基名称、接种人员等，放到培养室进行培养。

放入培养室后暗光培养约1周， 逐渐增加光照，培养室温度25 ℃， 光照时间12 h/d，光照强度800～1 000 lx，室内湿度40%。

经过30 d的观察，第1种培养基出芽率高、芽品质一致、感染率低，适宜作诱导培养基。

5 增殖培养

培养30 d无菌芽长出，将健康的芽切割下来，转接到增殖培养基：

（1）MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+50 mg/L KH2PO4+水解乳蛋白500 mg/L+30 g/L糖;

（2）MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L糖，琼脂4.7 g/L，pH值5.8。

增殖阶段每瓶放16个芽，放置在培养室培养，温度25 ℃，光照时间12 h/d，光照强度1 500 lx。

接种3 d后检查芽感染情况，并及时清理。培养15 d左右，萌发出2～3片叶。1个月后，玉簪芽长到一定高度，形成多个芽簇状。把每个芽分离出来，剪掉1/2叶片，继续进行继代培养。每月继代1次，以后每月大约以10倍以上的速度繁育，半年内就可以形成大量的无菌植株。继代阶段也可以挑出健壮的芽直接进行生根培养，其余芽继续繁殖。

增殖阶段第2种培养基分化率高、感染率低、无畸形苗，继代后芽的品质稳定， 适宜作增殖培养基。

6 生根培养

芽苗生长到一定高度时，选择健壮无感染、3～4片叶、长约2 cm的芽，用消毒过的剪刀剪下来，转入生根培养基。转接时不要伤及叶片或茎部。

（1）1/4MS+0.1 mg/L NAA+30 g/L糖;

（2）MS+1 mg/L IAA+30 g/L糖，琼脂4.7 g/L，pH值5.8。

生根阶段每瓶放11个芽，放置培养室进行培养。温度25 ℃，光照时间12 h/d，光照强度2 000 lx。

培养10 d左右，第1种培养基根长出，根长约0.5 cm，3～4条。培养30 d， 根长1.5 cm以上，根多、粗壮、有活力，适合炼苗的标准。故选择第1种培养基做为白花玉簪的生根培养基。

7 驯化及移栽

从培养室移到温室的瓶苗，在移栽前必须驯化15～20 d。先用遮阴网盖住瓶苗，白天温度23～27 ℃，晚上20～23 ℃，湿度70%左右。经过一段时间的锻炼，幼苗叶片由嫩黄色带有白色条纹变成纯翠绿色，白色条纹消失，而且还萌发新叶，原有叶片由长形长大变成卵圆形，幼苗整体长高，并长出新根，根变粗，表明幼苗已经适应外界环境，即可移栽。

出瓶前1 d，打开瓶塞，盖上报纸，使瓶内湿度与温室湿度接近，用高锰酸钾对花盆（10 cm×10 cm硬塑料盆）进行灭菌。准备好所需的基质，园土（带细沙）、泥炭、珍珠岩、椰糠按2 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 1比例混合，并用多菌灵消毒备用。

用镊子从瓶里将幼苗取出时，应注意不要弄伤叶片和根部。苗取出来后，先把黄叶剪掉，清理根部杂物，1条根或无根的苗，捡出扔掉。选择生长健壮、根系发达、根多的幼苗，用纯净水洗掉杂质和培养基，再放到10%多菌灵溶液中消毒60 s后移栽到硬塑料盆中。栽好幼苗后，按品种分类摆放在苗床上，注明品种、日期，方便以后查看。

移栽15 d左右，长出新叶片后，可以移到温室外的树下自然生长。

任武婷，陕西省苗木繁育中心，邮编722300（眉县）。

收稿日期：2024-04-12