血清ANGPTL8、ITLN-1对川崎病患儿冠状动脉损伤的预测价值

［摘 要］目的 探讨血清血管生成素样蛋白8（ANGPTL8）、凝集蛋白-1（ITLN-1）对川崎病（KD）患儿冠状动脉损伤的预测价值。方法 选取2020年5月至2023年5月在本院就诊的108例KD患儿作为研究组，根据是否发生冠状动脉损伤分为冠状动脉损伤组（n=37）与无冠状动脉损伤组（n=71）；另选取同期体检健康儿童72例作为对照组。采用双抗体夹心-酶联免疫吸附法检测所有受试者血清炎症相关指标及ANGPTL8、ITLN-1水平；Pearson法分析冠状动脉损伤KD患儿血清ANGPTL8、ITLN-1水平与炎症指标的相关性；评估血清ANGPTL8、ITLN-1水平对KD患儿冠状动脉损伤的预测价值。结果 冠状动脉损伤组KD患儿PLT、CRP、IL-6和TNF-α水平明显高于无冠状动脉损伤组及对照组（F/χ2值分别为67.198、75.056、71.876及94.158，P＜0.05）；与对照组相比，研究组KD患儿血清ANGPTL8水平明显升高（t=17.490，P＜0.05），ITLN-1水平明显降低（t=13.162，P＜0.05）；与无冠状动脉损伤组相比，冠状动脉损伤组患儿血清ANGPTL8水平明显升高（t=7.454，P＜0.05），ITLN-1水平明显降低（t=7.631，P＜0.05）。Pearson相关分析结果显示，冠状动脉损伤KD患儿血清ANGPTL8水平与PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈正相关（r=0.514、0.638、0.484、0.674，P＜0.05），ITLN-1水平与PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈负相关（r=-0.603、-0.659、-0.439、-0.646，P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清ANGPTL8、ITLN-1联合预测KD患儿冠状动脉损伤的曲线下面积（AUC）为0.950，敏感度为89.19%，特异度为85.91%。多因素Logistic回归分析结果显示，PLT、CRP、IL-6、TNF-α、ANGPTL8水平升高是KD患儿冠状动脉损伤的独立危险因素，ITLN-1水平升高是KD患儿冠状动脉损伤的保护因素。其OR值及95%CI分别为1.623（1.088～2.421）、1.722（1.266～2.342）、1.413（1.035～1.930）、1.725（1.210～2.460）、1.534（1.114～2.111）和0.685（0.485～0.967）。结论 KD冠状动脉损伤患儿血清ANGPTL8水平明显升高，ITLN-1水平明显降低，且ANGPTL8水平升高、ITLN-1水平降低为KD患儿冠状动脉损伤的独立危险因素，联合检测二者血清水平对KD患儿冠状动脉损伤有较高的预测价值。

［关键词］血管生成素样蛋白8；凝集蛋白-1；川崎病；冠状动脉损伤；预测价值

Doi：10.3969/j.issn.1673-5293.2024.07.006

［中图分类号］R179［文献标识码］A

［文章编号］1673-5293（2024）07-0038-06

Predictive value of serum ANGPTL8 and ITLN-1 for coronary artery

injury in children with Kawasaki disease

［Abstract］ Objective To explore the predictive value of serum angiopoietin-like protein 8 （ANGPTL8） and intelectin-1 （ITLN-1） in coronary artery injury in children with Kawasaki disease （KD）. Methods A total of 108 children with KD who were admitted to our hospital from May 2020 to May 2023 were regarded as the study group，they were divided into coronary artery injury group （n=37） and non-coronary artery injury group （n=71） according to the occurrence of coronary artery injury;another 72 healthy children who underwent physical examination were regarded as the control group.Double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay was applied to detect serum inflammation related markers and levels of ANGPTL8 and ITLN-1 in all subjects.Pearson’s method was applied to analyze the correlation between serum levels of ANGPTL8，ITLN-1 and inflammatory markers in KD patients with coronary artery injury.The predictive value of serum ANGPTL8 and ITLN-1 levels for coronary artery injury in children with KD was evaluated. Results In the coronary artery injury group，KD children had significantly higher levels of platelet （PLT），C-reaction protein （CRP），interleukin-6 （IL-6） and tumor necrosis factor alpha （TNF-α） compared to the non-coronary artery injury group （F/χ2＝67.198，75.056，71.876 and 94.158，respectively，all P＜0.05）;compared with the control group，KD children in the study group showed a significant increase in serum ANGPTL8 levels （t=17.490，P＜0.05），and a significant decrease in ITLN-1 levels （t=13.162，P＜0.05）;compared with the non-coronary artery injury group，KD children in the coronary artery injury group exhibited a significant increase in serum ANGPTL8 levels （t=7.454，P＜0.05） and a significant decrease in ITLN-1 levels （t=7.631，P＜0.05）.The results of pearson correlation analysis showed that in KD children with coronary artery injury，serum levels of ANGPTL8 were positively correlated with PLT，CRP，IL-6 and TNF-α levels （r=0.514，0.638，0.484 and 0.674，respectively，P＜0.05），while the ITLN-1 levels were negatively correlated with PLT，CRP，IL-6 and TNF-α levels （r=-0.603，-0.659，-0.439 and -0.646，respectively，P＜0.05）.The results of receiver operating characteristic （ROC） curve analysis showed that the combined prediction of serum ANGPTL8 and ITLN-1 for coronary artery injury in KD children had an area under the curve （AUC） of 0.950，with a sensitivity of 89.19% and a specificity of 85.91%.The results of multivariate logistic regression analysis showed that elevated levels of PLT，CRP，IL-6，TNF-α and ANGPTL8 were independent risk factors for coronary artery injury in children with KD，while an elevated level of ITLN-1 was a protective factor for coronary artery injury in children with KD.The OR values and 95%CI were as follows：1.623 （1.088-2.421） for PLT，1.722 （1.266-2.342） for CRP，1.413 （1.035-1.930） for IL-6，1.725 （1.210-2.460） for TNF-α，1.534 （1.114-2.111） for ANGPTL8，and 0.685 （0.485-0.967） for ITLN-1. Conclusion The serum levels of ANGPTL8 in KD children with coronary artery injury are obviously increased，while the level of ITLN-1 is obviously decreased.The independent risk factors for coronary artery injury in KD children include elevated levels of ANGPTL8 and decreased levels of ITLN-1.The combined assessment of their serum levels holds a high predictive value for coronary artery injury in children with KD.

［Key words］ angiopoietin-like protein 8;intelectin-1;Kawasaki disease;coronary artery injury;predictive value

川崎病（Kawasaki disease，KD）是婴幼儿期及儿童期常见的一种急性血管炎，临床特征表现为发热、手足硬肿、皮疹、颈部淋巴肿大等症状，严重时会导致冠状动脉病变，从而影响全身多个系统［1］。研究表明，冠状动脉是KD主要的受累血管，而冠状动脉病变会引发心肌炎、冠状动脉瘤、心肌梗死等一系列并发症［2］。据研究统计，有高达30%的KD患儿出现冠状动脉损伤，其中部分患儿因漏诊而延误病情，因此，寻找能准确预测冠状动脉损伤的生物标志物是临床预防和治疗KD的关键［3］。研究表明，血管生成素样蛋白8（angiopoietin-like protein 8，ANGPTL8）是一种分泌蛋白，其可通过调控脂肪酶活性及炎症因子表达，促进甘油三酯积累和炎性反应，最终导致冠状动脉病变［4］。而凝集蛋白-1（intelectin-1，ITLN-1）能抑制炎性细胞因子表达及巨噬细胞浸润，对改善冠状动脉狭窄、维持血管内斑块稳定具有积极作用［5］。然而，目前国内有关ANGPTL8和ITLN-1对KD患儿冠状动脉损伤的作用研究鲜有文献报道，故本研究旨在探究KD患儿血清ANGPTL8、ITLN-1水平，并分析其对患儿冠状动脉损伤的预测价值，以期为临床早期诊断KD及改善患儿预后提供一定的理论依据。

1资料和方法

1.1一般资料

选取2020年5月至2023年5月期间在本院就诊的108例KD患儿作为研究组，其中男性58例、女性50例，年龄6个月～9岁，平均（3.57±0.83）岁。纳入标准：①患儿经临床确诊，符合KD相关诊断标准［6］；②患者年龄≤10岁；③入院前未服用阿司匹林及其他治疗药物；④患儿临床资料完整;⑤患者本人及家属知晓并同意，本人自愿签署同意书。排除标准：①有其他心血管疾病者；②合并先天性疾病者；③有细菌感染、慢性炎症者。参考《川崎病冠状动脉病变的临床处理建议》［7］中的诊断标准，并根据心脏彩超结果判定KD患儿是否出现冠状动脉损伤，将其分为冠状动脉损伤组（n=37）与无冠状动脉损伤组（n=71）。另选取同期体检健康儿童72例作为对照组，其中男性39例、女性33例，年龄8个月～10岁，平均（3.64±1.06）岁。三组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会批准实施。

1.2方法

1.2.1血常规指标检测

采集所有儿童晨起空腹外周静脉血5mL，采用BC-7500血细胞分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）检测白细胞计数（white blood cell，WBC）和血小板（platelet，PLT）计数。

1.2.2血清炎症因子及ANGPTL8、ITLN-1水平检测

取5mL血液样本，室温静置20min，待析出血清后于4℃，3 000r/min离心15min，收集上清，转至-20℃保存待测。采用双抗体夹心-酶联免疫吸附法，并根据试剂盒检测步骤，加入待测血清及相应抗体，待反应终止，采用C16200型全自动生化分析仪（美国Bio-Rad公司）测定血清C反应蛋白（C-reaction protein，CRP）、白细胞介素（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、ANGPTL8、ITLN-1水平。

1.3统计学分析

采用SPSS 25.0软件进行数据分析。计量资料以例数n表示，组间比较进行χ2检验。符合正态分布的计量资料采用平均值±标准差（x-±s）表示，组间比较采用独立样本t检验。多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较用SNK-q检验；采用Pearson法分析冠状动脉损伤KD患儿血清ANGPTL8、ITLN-1水平与炎症指标的相关性；采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评估ANGPTL8、ITLN-1单独及联合检测对KD患儿冠状动脉损伤预测价值；采用多因素Logistic回归分析KD患儿冠状动脉损伤的影响因素。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2结果

2.1三组临床资料比较

结果显示，三组研究对象的体温、WBC、PLT、CRP、IL-6和TNF-α水平比较，差异具有统计学意义（P＜0.05），且冠状动脉损伤组患儿PLT、CRP、IL-6和TNF-α水平明显高于无冠状动脉损伤组（P＜0.05），见表1。

2.2研究组和对照组血清ANGPTL8、ITLN-1水平比较

结果显示，与对照组相比，研究组KD患儿血清ANGPTL8水平明显升高（P＜0.05），ITLN-1水平明显降低（P＜0.05），见表2。

2.3 有无冠状动脉损伤组KD患儿血清ANGPTL8、ITLN-1水平比较

结果显示，与无冠状动脉损伤组相比，冠状动脉损伤组KD患儿血清ANGPTL8水平明显升高（P＜0.05），ITLN-1水平明显降低（P＜0.05），见表3。

2.4冠状动脉损伤KD患儿血清ANGPTL8、ITLN-1水平与炎症指标的相关性分析

Pearson相关分析结果显示，冠状动脉损伤KD患儿血清ANGPTL8水平与PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈正相关（r=0.514、0.638、0.484、0.674，P＜0.05），ITLN-1水平与PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈负相关（r=-0.603、-0.659、-0.439、-0.646，P＜0.05），见表4。

2.5血清ANGPTL8、ITLN-1水平对KD患儿冠状动脉损伤的预测价值

通过绘制ROC曲线反映ANGPTL8、ITLN-1水平对KD患儿冠状动脉损伤的预测价值。结果显示，血清ANGPTL8、ITLN-1水平单独及联合预测KD患儿冠状动脉损伤的曲线下面积（area under curve，AUC）分别为0.873、0.861、0.950，且二者联合优于各自单独诊断（Z二者联合-ANGPTL8=2.205、P=0.028，Z二者联合-ITLN-1=2.101，P=0.036），见图1和表5。

2.6多因素Logistic回归分析KD患儿冠状动脉损伤的影响因素

以KD患儿是否出现冠状动脉损伤作为因变量（是=1，否=0），以PLT、CRP、IL-6、TNF-α、ANGPTL8及ITLN-1水平（实测值）为自变量，行Logistic回归分析。结果显示，PLT、CRP、IL-6、TNF-α、ANGPTL8水平升高是KD患儿冠状动脉损伤的独立危险因素，ITLN-1水平升高是KD患儿冠状动脉损伤的保护因素。见表6。

3讨论

3.1血清ANGPTL8在KD患儿中的水平及与冠状动脉损伤的关系

ANGPTL8是由人C19orf80基因编码的分泌蛋白，属于ANGPTL蛋白家族的新成员，其主要在肝脏和脂肪组织中表达［8］。Yang等［9］研究报道，ANGPTL8在血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）等病理因素的刺激下，会在动脉细胞中高度表达，并参与炎症反应、氧化应激等生理过程，是心血管疾病发生的危险因素。而研究认为KD是由未知刺激在遗传易感婴幼儿及儿童中引发大量炎症因子介导一系列炎症级联反应所致，且KD发展到一定程度会导致机体冠状动脉损伤，具体表现为动脉弥漫性增大、血管内狭窄，甚至发生瘤变，从而导致患儿呼吸受阻、心肌缺血，最终引发休克，甚至死亡［10-11］。近期有研究发现，由动脉粥样硬化引发的腹主动脉瘤患者血清ANGPTL8明显升高，而腹主动脉瘤的主要特征表现为动脉血管内皮功能障碍、血管局灶性扩张和动脉壁炎性细胞浸润，这与KD患儿冠状动脉损伤病理特征相似［12］。本研究结果显示，与对照组相比，ANGPTL8水平明显升高，冠状动脉损伤组患儿ANGPTL8水平高于无冠状动脉损伤组，且血清ANGPTL8水平升高是KD患儿冠状动脉损伤的危险因素，提示ANGPTL8与KD患儿冠状动脉损伤密切相关。

3.2血清ITLN-1在KD患儿中的水平及与冠状动脉损伤的关系

ITLN-1是一种新型脂肪细胞因子，其在人体内脏脂肪组织和血液中高度表达，已被证实其作为抗炎因子在IL-6和TNF-α引发的糖脂代谢紊乱及慢性动脉疾病中发挥着重要的调节作用［13］。此外，ITLN-1能通过抑制巨噬细胞活化，并促使其分化为抗炎M2表型来阻断炎症反应，从而减少促炎因子的产生，对维持动脉粥样硬化模型小鼠血管内斑块稳定具有重要作用［14］。Askin等［15］研究表明，冠状动脉粥样硬化患者血清ITLN-1水平明显低于健康者，且与颈动脉斑块形成呈负相关。此外，还有研究报道，ITLN-1能通过激活AMPK/eNOS和PI3K/Akt通路增加血管舒张和内皮细胞存活，并抑制TNF-α表达，对巨噬细胞产生有益作用，从而改善血管损伤和炎症［5］。以上研究表明，ITLN-1与动脉损伤和病变密切相关。在本研究中，通过检测KD患儿血清ITLN-1水平发现，与对照组相比，ITLN-1水平明显降低，冠状动脉损伤组患儿ITLN-1水平低于无冠状动脉损伤组，且KD患儿血清ITLN-1水平降低为患儿发生冠状动脉损伤的危险因素，表明ITLN-1与KD患儿冠状动脉损伤有关。

3.3血清ANGPTL8、ITLN-1水平与KD患儿冠状动脉损伤的相关性

研究表明，冠状动脉损伤与长期炎症反应密切相关，在炎症细胞因子水平高的KD患儿极易发生KD休克综合征［16］。目前IL-6、IL-1β、INF-γ、TNF-α等炎症细胞因子已被证实在KD中发挥着重要作用，其中IL-6和TNF-α与急性KD的血管内皮损伤和冠状动脉病变有关［17-18］。本研究通过Pearson相关性分析ANGPTL8、ITLN-1水平与炎症指标之间的相关性发现，冠状动脉损伤KD患儿血清ANGPTL8、ITLN-1水平分别与PLT、CRP、IL-6、TNF-α水平呈正相关和负相关。众所周知，CRP一种反应炎症水平的蛋白指标，当机体组织受损或发生感染，血清CRP水平会急剧升高［19］。因而以上结果提示，ANGPTL8、ITLN-1可通过调节炎症反应来参与KD患儿冠状动脉损伤过程，且冠状动脉受损会导致机体炎症反应增强。此外，有研究表明，PLT高度活化、粘附和聚集是冠状动脉受损的重要标志，其可通过诱导血管平滑肌细胞去分化，引发血管损伤及形成动脉瘤，进而诱使机体分泌大量炎症因子如IL-6、IL-1β、TNF-α的表达［20］。因而推测KD患儿机体在持续分泌的炎症因子刺激下，ANGPTL8表达增加，并反过来刺激炎症因子表达，导致炎性反应不断增强，ITLN-1抗炎作用受到抑制而表达下调。

3.4血清ANGPTL8、ITLN-1对KD患儿冠状动脉损伤预测价值

本研究ROC曲线分析结果显示，血清ANGPTL8、ITLN-1水平对KD患儿发生冠状动脉损伤均有一定预测价值，且二者联合预测的AUC为0.950，敏感度为89.19%，联合预测价值高于二者单独预测，此结果说明血清ANGPTL8、ITLN-1联合预测KD患儿冠状动脉损伤的价值较高，ANGPTL8、ITLN-1可能是预测冠状动脉损伤的潜在标志物。

综上所述，KD患儿血清ANGPTL8水平明显升高、ITLN-1明显降低，且在冠状动脉损伤患儿中，二者血清水平变化程度更为显著，且与炎症相关指标有明显的相关性，联合检测血清ANGPTL8、ITLN-1水平对KD患儿冠状动脉损伤有较高的预测价值。此外，结合前人研究，推测ANGPTL8、ITLN-1可能通过调节IL-6和TNF-α炎症因子分泌，介导相关炎症反应信号通路来参与KD进展，导致冠状动脉损伤，其具体作用机制将进一步进行深入研究。

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