细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3 对鸡前脂肪细胞分化的抑制作用

摘要： 【目的】解析细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3 （cyclin-dependent kinase inhibitor 3，CDKN3） 在鸡前脂肪细胞分化中的作用，为阐明脂肪沉积的分子机制奠定理论基础。【方法】构建荧光表达载体pECFPCDKN3，转染至鸡永生化前脂肪细胞系（immortalized chicken preadipocyte cell line，ICP1），观察CDKN3 蛋白的亚细胞定位；采用油酸钠诱导ICP1 分化，qRT-PCR 检测分化过程中CDKN3 mRNA 表达水平；将pCMVHA-CDKN3 和pCMV-HA 分别转染到ICP1 中，转染24 h 后进行诱导分化，通过油红O 染色检测脂肪细胞分化情况，并利用qRT-PCR 检测过表达CDKN3 后脂肪分化相关基因的mRNA 表达水平。【结果】转染了pECFP-CDKN3 的细胞主要在细胞核中呈青色荧光信号，提示鸡CDKN3 定位于细胞核；在诱导ICP1 成脂分化的过程中，CDKN3 mRNA 表达量逐渐升高；油红O 染色结果显示：过表达CDKN3 细胞内脂滴聚集减少，且脂肪分化相关基因C/EBPα、PPARγ、FABP4 和FAS 的表达水平均呈下降趋势， 其中FAS 显著下降（Plt;0.05），PPARγ 极显著下降（Plt;0.01）。【结论】CDKN3 是核蛋白，可抑制鸡前脂肪细胞分化。

关键词： 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3 （CDKN3）；鸡；前脂肪细胞；脂肪分化；亚细胞定位

中图分类号： S831.1 文献标志码： A 文章编号： 1004–390X （2024） 02−0036−07