冷冻联合派特灵治疗尖锐湿疣的效果及对患者BFGF、PIAS1、Foxp3水平的影响

黄达 周斌

【摘要】 目的：探究冷凍联合派特灵对尖锐湿疣患者皮损处碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）、激活STAT蛋白抑制因子1（PIAS1）、翼状螺旋转录因子P3（Foxp3）水平的影响。方法：选取100例2018年

6月—2019年6月于常州市武进人民医院治疗的尖锐湿疣患者，随机数字表法将其分为对照治疗组及联合治疗组，各50例。对照治疗组采用冷冻治疗，联合治疗组采用冷冻联合派特灵治疗。对比两组γ干扰素（IFN-γ）、白介素-2（IL-2）、白介素-10（IL-10）水平、T淋巴细胞亚群、BFGF、PIAS1、Foxp3、性功能评价，治疗效果、复发情况等。结果：治疗后，与对照治疗组比较，联合治疗组IL-10、CD8+、BFGF、PIAS1、Foxp3水平均低，IFN-γ、IL-2、CD4+、CD4+/CD8+水平、性功能均高（P<0.05）。联合治疗组治疗总有效率高于对照治疗组，复发率低于对照治疗组（P<0.05）。联合治疗组总并发症发生率略高于对照治疗组，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：冷冻联合派特灵可显著改善尖锐湿疣患者机体免疫功能、炎症反应，抑制BFGF、PIAS1、Foxp3表达，改善临床症状。

【关键词】 尖锐湿疣 冷冻 派特灵

The Effect of Cryotherapy Combined with Pettling on the Treatment of Condyloma Acuminatum and Its Impact on the Levels of BFGF， PIAS1 and Foxp3/HUANG Da， ZHOU Bin. //Medical Innovation of China， 2024， 21（11）： 0-066

[Abstract] Objective： To explore the effect of cryotherapy combined with Pettling on the levels of basic fibroblast growth factor （BFGF）， protein inhibitory of activated STAT factor 1 （PIAS1）， and forkhead or winged helix transcription factor P3 （Foxp3） in the skin lesions of patients with condyloma acuminatum. Method： A total of 100 patients with condyloma acuminatum who underwent treatment at Changzhou Wujin People's Hospital from June 2018 to June 2019 were selected， they were divided into control treatment group and combined treatment group by random number table method， with 50 cases in each group. The control treatment group received cryotherapy， and the combined treatment group received cryotherapy combination with Pettling. Interferon-γ （IFN-γ）， interleukin-2 （IL-2）， interleukin-10 （IL-10） levels， T lymphocyte subset， BFGF， PIAS1， Foxp3， sexual function， and the treatment effect and recurrence were compared between the two groups. Result： After treatment， compared with the control treatment group， the levels of IL-10， CD8+， BFGF， PIAS1 and Foxp3 in the combined treatment group were lower， and IFN-γ， IL-2， CD4+， CD4+/CD8+， and sexual function were higher （P<0.05）. The total response rate of the combined treatment group was higher than that of the control treatment group， and the recurrence rate was lower than that of the control treatment group （P<0.05）. The overall incidence of complication in the combined treatment group was slightly higher than that in the control treatment group， the difference was not statistically significant （P>0.05）. Conclusion： Cryotherapy combined with Pettling can significantly improve the immune function and inflammatory response of patients with condyloma acuminatum， inhibit the expression of BFGF， PIAS1 and Foxp3， and improve the clinical symptoms.

[Key words] Condyloma acuminatum Cryotherapy Pettling

First-author's address： Department of Dermatology， Changzhou Wujin People's Hospital， Changzhou 213000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.11.014

尖锐湿疣属于一种复发率高、传染性强的由乳头瘤病毒感染所导致的性传播疾病，发于肛门生殖器皮肤、皮肤黏膜处，严重时可侵袭患者尿道、肛管、直肠，女性患者则会侵袭子宫颈、尿道，甚至会诱发癌变，严重威胁着患者的生命健康[1]。当下，临床对于尖锐湿疣的治疗，其方法各不相同，其中涵盖：冷冻疗法、激光治疗、手术治疗等多种方式，且不同方法效果不同[2]。派特灵为纯中药制剂，由大青叶、金银花、苦参等多味中药组成，可杀灭人类乳头瘤病毒，抑制疱疹病毒[3]。在本研究中，分析冷冻联合派特灵治疗尖锐湿疣的效果及对患者皮损处碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）、激活STAT蛋白抑制因子1（PIAS1）、翼状螺旋转录因子P3（Foxp3）水平的影响，为临床上此病的治疗提供新方向。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年6月—2019年6月于常州市武进人民医院治疗的100例尖锐湿疣患者。纳入标准：符合文献[4]《尖锐湿疣诊疗指南（2014）》中尖锐湿疣的诊断标准。疣体主要呈现为菜花状、乳头状，经过醋酸白试验所得出的结果为阳性。排除标准：存在严重的免疫性、血液性疾病及其他传染性疾病；对本研究所使用的药物存在过敏情况；合并严重的心、肝、肺、肾功能障碍行疾病；存在严重的精神障碍；合并恶性肿瘤疾病；临床病例资料不齐全。随机数字表法将患者分为对照治疗组及联合治疗组，各50例。本研究经本院医学伦理委员会审批，并经过患者或家属签字同意。

1.2 方法

对照治疗组采用冷冻治疗，使用利多卡因气雾剂（生产厂家：上海上药信谊药厂有限公司，批准文号：国药准字H10920107，规格：8 g）做局麻处理后，使用棉签蘸取液氮在患者患处轻轻按压5～10 s，直至患者患处及患处周围1 mm处皮肤冷冻变白，复温后间隔2 min再次冷冻，冷冻1或2次，1～2周后复诊，若患者疣体未脱落再次做冷冻治疗。联合治疗组采用冷冻联合派特灵治疗，在患者行冷冻治疗后疣体完全脱落后，使用派特灵[生产厂家：北京派特博恩生物技术开发有限公司，卫生许可证：（京）卫消字（2011）第0220号，规格：10 mL]在患者疣体部位局部湿敷10～15 min，每日2次，7 d为1个疗程，连续治疗4个疗程后，配备派特灵50倍稀释溶液，湿喷至疣体部位及疣体周围皮肤，前4个疗程每日1次，后8个疗程每日2次。

1.3 观察指标与评价标准

（1）γ干扰素（IFN-γ）、白介素-2（IL-2）、白介素-10（IL-10）水平检测。于清晨7点，治疗前后在患者空腹状态下抽取静脉血，抽取量为4 mL，采用离心机来将所抽取的静脉血进行离心处理，离心机参数设置为：3 700 r/min速度，离心半径9 cm，时间5 min，进行血清分离，离心分离处理后将其置于-75 ℃低温中进行保存。试验开始前取出血清样本，与相关指标的酶联免疫试剂盒进行结合检测。随后，使用碳酸盐缓冲液，将待测液稀释，后倒入孔中，3 ℃下过夜处理，后弃去，洗净，孔中加入4.12% BSA，37 ℃孵育25 min，后弃去，洗净，稀释抗血清，每孔加入0.28 mL，37 ℃下进行轻微摇晃11 min，后弃去，冲洗干净，使用TMB进行显色处理后，在370 nm波长下检测OD值，查出IFN-γ、IL-2、IL-10水平。（2）T淋巴细胞亚群检测。采用BD FACS-Calibur流式细胞仪（美国）对两组治疗前后T淋巴细胞亚群指标分化簇4+（CD4+）、分化簇8+（CD8+）水平进行检测，并计算CD4+、CD8+比值。（3）血清BFGF、PIAS1、Foxp3水平检测。采用RT-PCR法测定BFGF、PIAS1、Foxp3相對表达量，采用BFGF、PIAS1、Foxp3试剂盒（上海白益生物科技有限公司）通过相关试剂盒来对血液内的RNA进行提取，进行反转录反应，通过进行cDNA，来扩增产物PCR。检测条件：预火85 ℃，变性3 s，随后进行降温，降至50 ℃，随即退火9 s，进行42个循环。内参GAPDH上游引物：5-GTCAAGTTAGACCTTGCCGA-3，下游引物：5-AAATGATGGCGAGAATCATC-3；BFGF上游引物：5-TATGAAGGAAGATGGACGGC-3，下游引物：5-CGTTTCAGTGCCACATACCA-3。PIAS1上游引物：5-CTGGGACCTAAACATGAACTGGAAC-3，下游引物：5-GTGGTGTCAAGGCAAATGCAA-3。Foxp3上游引物：5-ATCGCTGCTAGCTACTTAGCTA-3，下游引物：5-CTGATCGTGAACTGCCGTGGCTA-3。以GAPDH为内参，采用2-ΔΔCt方法计算三者相对表达量。（4）性功能评价。治疗前后的性功能通过男性性功能量表（male sexual function inventory，MSFI）和女性性功能量表（female sexual function inventory，FSFI），MSFI满分为44分，FSFI满分为95分，分数越高说明患者性功能越好，计算得分与量表满分的百分比。（5）治疗效果、复发情况评估。治疗效果：参照文献[4]《尖锐湿疣诊疗指南（2014）》标准评价两组患者治疗效果。痊愈：患者临床所有症状全部消失，并且未发生任何皮损情况；显效：患者自身疣体基本全部消失，皮损程度改善至70%以上；有效：患者自身疣体基本消失，皮损面积减少20%～70%；无效：患者临床症状未得到任何好转、改善。总有效率=痊愈率+显效率。患者经过本研究治疗结束后，进行后续随访，随访至2020年3月，来对复发率情况进行统计。复发标准：在其原皮损部位发现新生疣体，经过试验检测呈现为阳性。（6）并发症发生情况统计。对两组患者治疗过程中所出现的水肿、糜烂疼痛、灼热等并发症发生情况进行统计，并做组间比较。

1.4 统计学处理

使用软件SPSS 20.0对数据进行分析，计数资料以率（%）表示，两组间比较采用字2检验；计量资料以（x±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基线资料比较

对照治疗组男26例，女24例；年龄25～

45岁，平均（35.0±8.0）岁；病程1～8个月，平均（4.5±2.8）个月；疣体直径3～11 mm，平均（7.0±3.2）mm。联合治疗组男25例，女25例；年龄25～43岁，平均（34.0±7.2）岁；病程1～9个月，平均（5.0±3.2）个月；疣体直径3～10 mm，平均（6.5±2.8）mm。两组基线资料对比，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 两组IFN-γ、IL-2、IL-10水平比较

治疗前，两组IFN-γ、IL-2、IL-10水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组IL-10水平均低于治疗前，IFN-γ、IL-2水平均高于治疗前，且联合治疗组IL-10水平低于对照治疗组，IFN-γ、IL-2水平均高于对照治疗组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.3 两组T淋巴细胞亚群指标水平比较

治疗前，两组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组CD4+、CD4+/CD8+均高于治疗前，CD8+均低于治疗前，且联合治疗组CD4+、CD4+/CD8+均高于对照治疗组，CD8+低于对照治疗组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.4 两组血清BFGF、PIAS1、Foxp3水平比较

治疗前，两组血清BFGF、PIAS1、Foxp3水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组血清BFGF、PIAS1、Foxp3水平均低于治疗前，且联合治疗组血清BFGF、PIAS1、Foxp3水平均低于对照治疗组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2.5 两组治疗效果、复发率比较

联合治疗组治疗总有效率高于对照治疗组，复发率低于对照治疗组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表4。

2.6 两组性功能比较

治疗前，两组性功能比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗后两组性功能均高于治疗前，且联合治疗组性功能高于对照治疗组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表5。

2.7 两组并发症发生情况比较

联合治疗组总并发症发生率略高于对照治疗组，差异无统计学意义（字2=0.148，P=0.700），见表6。

3 讨论

尖锐湿疣的发生是由于人乳头瘤病毒在机体内出现感染而造成的一种疾病，多数患者在乳头瘤病毒感染早期无特异性症状，不易被察觉，但在感染中后期患者多表现为疼痛、瘙痒、恶臭、性交不适、异物感、出血等症状，严重影响着患者的日常生活[5]。

冷冻疗法属于临床上治疗尖锐湿疣的物理疗法，是通过液氮的方式产生低温，通过低温的作用，使其细胞内在形成冰晶，随后出现脱水，转变为脂蛋白复合物，在一定程度上对患者机体内的局部血液障碍情况进行改善，造成其病变组织加速坏死程度，此种治疗方式无需对患者做麻醉处理和开放创面，具有出血少、术后感染率、患者耐受性高等优点[6-7]。但单纯的物理治疗效果并不完全理想，患者预后复发率较高，派特灵属于纯中药制剂，可改变人乳头瘤病毒的生长环境，在一定程度上对人体内的表皮细胞代谢速度进行提高，诱导脱落疣体及其周圍潜伏的病毒区皮肤，彻底清除寄生于表皮细胞中的人乳头瘤病毒，进而发挥其促进新表皮细胞再生的作用[8-9]。另外有研究显示，派特灵在促进新表皮细胞再生的同时还具有保护免疫细胞的作用，改善机体免疫功能，进而预防预后复发[10]。因纯中药制剂派特灵在使用后不留瘢痕、治愈率较高、复发率较低等优点，目前已经广泛应用于尖锐湿疣的治疗中，且已取得良好的成效[11]。基于上述研究，在本文中将冷冻、派特灵联合应用于尖锐湿疣患者的治疗中，结果显示，与单纯应用冷冻治疗的患者相比，联合应用派特灵的患者治疗效果较为理想，且预后复发率较低，且性功能优于治疗前，此结果提示，冷冻、派特灵联合应用可在最大程度上促进患者疾病恢复，提高生活质量。

目前临床上认为，尖锐湿疣的发生与细胞免疫功能低下相关，IL-2属于一种较为重要的免疫调节因子，由辅助性T淋巴细胞产生，可激活单核巨噬细胞、增强NK细胞毒性的作用，可与多种细胞因子共同作用提高免疫功能，具有较强的抗病毒、提高机体免疫力的作用[12]。而IFN-γ其存在是由Th1细胞进行分泌而来，主要是对患者机体内的单核细胞、淋巴细胞等细胞进行激活，以此来达到对免疫应答进行调节的作用。在对细胞内病毒感染的拮抗中起到了关键性重要作用[13]。IL-10属于炎症因子的一种，对周围相关细胞的分化、生长情况产生调节作用，对机体内的炎症情况发生过程进行参与[14]。CD4+、CD8+、CD4+/CD8+属于T淋巴细胞内相关指标，是对机体内的免疫功能情况进行体现的关键性指标[15-16]。尖锐湿疣患者相比正常人T淋巴细胞水平更低，故免疫功能也较差，病毒感染率较高[17]。本研究结果显示，与单纯应用冷冻治疗的患者相比，联合应用派特灵的IL-10、CD8+均显著降低，且IFN-γ、IL-2、CD4+均升高，此结果提示着，冷冻、派特灵联合应用可能经改善IFN-γ、IL-2、IL-10、CD8+、CD4+异常表达，来提高患者机体免疫能力，进而抵抗病毒感染。

BFGF属于一种可促进血管新生、细胞增殖的多功能细胞因子，引起对肝素具有较强的亲和力，又被称为肝素生长因子，具有修复損伤、促进神经再生、促进胚胎发育等多种生物学功能[18]。在肿瘤细胞中，BFGF表现为异常的高表达，参与肿瘤血管新生、细胞增殖，在尖锐湿疣组织中表达水平较高，可能与尖锐湿疣发生后刺激角质形成细胞，进而促进BFGF表达相关[19]。PIAS1属于一种可抑制信号转导、转录激活子1的特异性抑制蛋白，位于染色体15q23位点上，参与肿瘤的发生发展，在尖锐湿疣组织中表现为异常高表达，可促进疣体血管再生，加速疾病进展[20]。Foxp3在机体内以特异性分子标记物的形态存在，在尖锐湿疣组织中表现为异常高表达[21]。本研究结果显示，与单纯应用冷冻治疗的患者相比，联合应用派特灵的患者血清BFGF、PIAS1、Foxp3水平均显著降低，此结果提示，冷冻、派特灵联合应用可能经改善血清BFGF、PIAS1、Foxp3异常表达，最终促进疣体脱落。

综上所述，冷冻联合派特灵可显著改善尖锐湿疣患者机体免疫功能、炎症反应，抑制BFGF、PIAS1、FOXP3表达，改善临床症状，效果显著。

参考文献

[1] LEE W L，LEE F K，WANG P H.Management of condyloma acuminatum[J].J Chin Med Assoc，2019，82（8）：605-606.

[2] LUO Y，KEELING B，FORCUCCI J A，et al.Perianal condyloma acuminatum-like plaque[J].Cutis，2018，101（4）：248-259.

[3]荆慧琴.派特灵治疗尖锐湿疣的临床观察[J].山西医药杂志，2016，45（14）：1685-1686.

[4]中华医学会皮肤性病学分会性病学组，中国医师协会皮肤科分会性病亚专业委员会.尖锐湿疣诊疗指南（2014）[J].中华皮肤科杂志，2014，47（8）：598-599.

[5] PASMATZI E，BADAVANIS G，KAPRANOS N，et al.Erythema nodosum induced by oral isotretinoin in a patient with condylomata acuminata[J].Dermatol Online J，2020，26（2）：13030.

[6]李海燕，徐玉萍，赵丹霓，等.干扰素凝胶联合冷冻治疗女性外阴尖锐湿疣的疗效研究[J].河北医药，2019，41（16）：2515-2517.

[7]康潇潇，樊靖华，赵丽敏.液氮冷冻联合中药派特灵预防肛周尖锐湿疣复发的疗效观察[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2018，17（4）：359-361.

[8]郑浩，李海清，刘浩.阴茎尖锐湿疣患者采取派特灵与电灼结合干扰素治疗的疗效比较[J].医药论坛杂志，2018，39（10）：93-95.

[9]马燕，白洁，卫宝宁，等.尖锐湿疣患者采用派特灵结合肌注干扰素治疗的临床效果[J].中国性科学，2019，28（5）：148-150.

[10]王立新，刘龙，曹志强，等.派特灵与电灼结合干扰素治疗阴茎尖锐湿疣的临床效果对比观察[J].中国性科学，2016，25（8）：68-71.

[11]季春燕.派特灵治疗宫颈持续人乳头瘤病毒感染的临床研究[J].东南国防医药，2017，19（5）：492-495.

[12] CHEN Q，YANG R，GAO A，et al.Efficacy of fulguration combined with imiquimod cream on condyloma acuminatum， and the effect on immune functions and serums levels of IL-2 and IL-10[J].

Exp Ther Med，2017，14（1）：131-134.

[13]张怡，郭振生，杨春.重组人α-2b干扰素凝胶对尖锐湿疣患者免疫功能及炎症指标的影响[J].海南医学，2019，30（23）：3015-3017.

[14]黄银浩，陈永艳，王宝仁.尖锐湿疣皮损中Foxp3、IL-10的表达及意义[J].遵义医学院学报，2019，42（1）：64-66，70.

[15] MENG X，LI Y，LUAN H，et al.Therapeutic effect of photodynamic therapy combined with imiquimod in the treatment of anal condyloma acuminatum and its effect on immune function[J].Exp Ther Med，2018，16（5）：3909-3912.

[16] AO C，ZENG K.The role of regulatory T cells in pathogenesis and therapy of human papillomavirus-related diseases， especially in cancer[J].Infect Genet Evol，2018，65：406-413.

[17]高春岩，钱青，申宇鸿，等.卡介菌多糖核酸注射液对尖锐湿疣患者疗效、复发率及CD3+、CD4+、CD8+水平的影响[J].河北医药，2019，41（21）：3288-3290，3294.

[18] ZBINDEN A，BROWNE S，ALTIOK E I，et al.Multivalent conjugates of basic fibroblast growth factor enhance in vitro proliferation and migration of endothelial cells[J].Biomater Sci，2018，6（5）：1076-1083.

[19] LOU Z，FU Y.Effect of basic fibroblast growth factor in tympanic membrane perforation[J].JAMA Otolaryngol Head Neck Surg，2016，142（9）：920-921.

[20]吴春丽，张顺，蔡挺.PIAS1与肿瘤[J].中国生物化学与分子生物学报，2017，33（5）：423-428.

[21] ZHAO J，ZENG W，CAO Y，et al.Immunotherapy of HPV infection-caused genital warts using low dose cyclophosphamide[J].Expert Rev Clin Immunol，2014，10（6）：791-799.

（收稿日期：2023-08-16） （本文编辑：白雅茹）