肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的应用及阳性率评估

韦柳曼，夏益贵，梁慧娜

河池市人民医院，广西河池 547000

肺结核作为最常见的传染病之一，该病可引起各种症状，包括长期咳嗽、咳痰伴有血丝、胸闷、乏力、发热、盗汗、食欲不振和体质量减轻等[1-2]。若未及时给予诊治，可影响肺部及其周围组织，并在严重情况下扩散到其他器官，危及生命[3]。因此，临床及时诊断，尽早治疗对于优化预后具有重要意义。临床诊断肺结核的金标准方法是痰液固体培养，具有较高的诊断准确性，但流程繁琐，时间长，难以作为首选筛查诊断方法[4]。痰涂片在诊断肺结核中具有一定的应用价值，操作简单便捷，但受多重因素影响，假阴性概率较高，存在一定局限性。Xpert 检测法用于结核分枝杆菌检验是肺结核的生物学诊断方法。但不同方法的诊断效能在学术界仍然存在争议[5]。基于此，本研究选取2022 年1月—2023 年6 月河池市人民医院收治的200 例疑似肺结核患者为研究对象，旨在探索结核分枝杆菌检验的应用效能，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院收治的200 例疑似肺结核患者为研究对象，男103 例，女97 例；年龄34～72 岁，平均（52.61±3.54）岁。本研究经医学伦理委员会批准，患者签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：年龄≥18 岁；存在与肺结核相似的症状；符合《肺结核诊断标准（WS 288—2017）》对疑似肺结核病例的诊断[6]。

排除标准：精神疾病患者；肺部肿瘤患者；中途退出研究者。

1.3 方法

样品采集：采样前为患者提供温开水漱口，指导其将咽喉部位的痰液咳出，装载于一次性干净痰瓶中，作为检测样品。

Xpert 法检测：取1 mL 痰标本加入2 mL 样本处理液，涡旋震荡10 s，室温放置10 min，重复震荡步骤，室温放置5 min 后，取2 mL 经过处理的标本加入试剂盒，上机检测。反应结束后，在检测系统窗口下可直接观察测试结果。结核分枝杆菌数量分为高、中、低、极低和未检出进行报告，利福平检测结果为敏感和耐药。

罗氏固体培养：挑取约5 mL 痰液至已标记的50 mL 离心试管中，加等量的2%N-乙酰半胱氨酸－氢氧化钠前处理液（去污染），旋涡振荡20 s，静置15 min，加无菌磷酸缓冲盐溶液（pH 6.8）至约50 mL，盖紧盖子，3 000 r/min 离心15 min，倒掉上清液，添加1～3 mL 磷酸缓冲盐溶液（pH 6.8）以中和pH 至6.8。用无菌毛细管吸取消化后标本0.1 mL，滴于中性罗氏培养基，将接种过的斜面来回晃动，使菌液均匀铺于斜面上，斜面朝上放37℃恒温箱内培养。每一标本同时接种2 支。接种后第3、7 d 观察，此后，1 次/周。阳性结果经涂片证实随即报告。＜7 d 报阳，则为快速生长菌，＞7 d 则为缓慢生长菌。阴性结果至8 周报告，必要时可延长。

1.4 观察指标

①以痰液固体培养检测为金标准，汇总Xpert法检测对肺结核的检出情况；②分析不同方法对肺结核的诊断效能：灵敏性=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异性=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%；准确性=（真阳性例数+真阴性例数）/（真阳性例数+假阴性例数+真阴性例数+假阳性例数）×100%；阳性预测值=真阳性例数/（真阳性例数+假阳性例数）×100%；阴性预测值=真阴性例数/（真阴性例数+假阴性例数）×100%。

1.5 统计方法

采用SPSS 23.0 统计学软件进行数据分析，诊断结果、诊断效能为计数资料，用例数（n）和率（%）表示，一致性行Kappa检验。

2 结果

2.1 不同诊断方法诊断结果对比

金标准共检出阳性17 例，阴性183 例，阳性检出率为8.50%；Xpert 法共检出阳性24 例，阴性176例，阳性检出率为12.00%。见表1。

表1 不同诊断方法诊断结果对比（n）

2.2 不同检测方法诊断效能对比

Xpert 法诊断的灵敏性为94.12%（16/17），特异性为95.63%（175/183），准确性为95.50%（191/200），阳性预测值为66.67%（16/24），阴性预测值为99.43%（175/176），与金标准之间具有良好的一致性（Kappa值为0.756）。

3 讨论

肺结核为我国乙类传染病之一，是一种由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病[7]。主要通过空气飞沫传播，当患者咳嗽、打喷嚏或说话时，释放出含有的病原体经过感染的空气飞沫，进入他人的呼吸道，从而导致感染[8]。从症状方面分析，该病症状并无明显典型性，易与其他肺部疾病混淆。然而随着病情进展，将对多脏器功能带来不同程度损伤，甚至危及生命[9]。因此，探索出准确、可靠且操作便捷的肺结核检测方法，对于及时诊治，优化预后的意义重大。

痰液培养是肺结核的金标准检测方法，但培养过程长，难以作为临床快速筛查诊断方法[10]。痰涂片是将痰液样品置于玻片上，予以流程处理后，在镜下观察结核分枝杆菌，具有一定诊断检出率，但假阴性概率较高[11]，且涂阳率比较低。本研究对200 例疑似患者，将痰液罗氏固体培养方法的结果作为金标准，同时用Xpert 法检测患者结核分枝杆菌。结果显示，金标准检出17 例确诊病例，阳性率为8.50%，Xpert 法检测出24 例确诊病例，阳性率为12.00%。该研究中Xpert 法在诊断肺结核的灵敏性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值分别是94.12%、95.63%、95.50%、66.67%、99.43%，和金标准检验的结果之间具有良好的一致性（Kappa值为0.756）。与赵丽丽等[12]的研究结论一致，其Xpert检测方法的敏感度（98.58%）、特异度（100.00%）、准确性（99.66%）、阳性预测值（100.00%）、阴性预测值（99.56%），与金标准间具有良好的一致性（Kappa值为0.991）。分析原因，Xpert 法检测使用聚合酶链式反应技术，特异性地扩增结核分枝杆菌的目标片段。引入荧光标记的探针以特异地与扩增产物结合，并通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测荧光信号的增加情况[13]。若样品中存在结核分枝杆菌，其靶标序列将被扩增并与探针结合，导致荧光信号增加，能够快速、准确地检测肺结核感染[14]。该方法可直接检测结核分枝杆菌DNA，能够准确确认是否存在结核分枝杆菌感染，可避免其他细菌引起的误诊，具有更高的灵敏性、特异性。此外，Xpert 法检测依托生物学检测技术，能够检测到非常低水平的结核分枝杆菌DNA，减少假阴性和假阳性结果的可能性[15-16]。

综上所述，临床对于疑似肺结核患者可优先通过Xpert 法检测进行筛查诊断，该方法具有较高的诊断效能。