竹节伸筋饮片质量标准研究*

欧巧玲，王竹鑫，周 宜，林丽美，包 敏，胡冠羽

（1.湖南中医药大学第二附属医院，湖南 长沙 410005；2.湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208；3.株洲市食品药品检验所，湖南 株洲 412000）

竹节伸筋为百合科植物蜘蛛抱蛋Aspidistra elatiorBlume的干燥根茎，具有活血止痛、清肺止咳、利尿通淋等功效，常用于跌打损伤、风湿痹痛等疾病的治疗[1-2]。化学成分研究[3-5]表明竹节伸筋主要含有甾体皂苷。药理活性研究显示其具有抗菌[6-7]、抗肿瘤[8-9]、抗炎[10]和止咳[11]等药理作用。

竹节伸筋主要收录于地方标准[1，12]。另外，也有文献报道其质量标准研究[3]。这些都为竹节伸筋质量评判提供了法、理依据。但2010年版《湖南省中药饮片炮制规范》中，竹节伸筋只有性状鉴别、横截面鉴别、理化鉴别等评判项，不足以全面地评判竹节伸筋饮片的质量，有必要对其标准进行提升研究[13-14]。

因此，在湖南省市场监督管理局的支持下，本实验组启动了关于2010版《湖南省中药饮片炮制规范》中竹节伸筋饮片标准提升项目。根据项目要求进行了性状鉴别、粉末鉴别、横截面鉴别、理化鉴别，以及水分、总灰分、醇溶性浸出物含量测定等项目的研究，旨在为竹节伸筋饮片质量标准提升提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 电子天平（XSE205 DV，梅特勒托利多仪器有限公司），电子显微镜（BX-61，奥林巴斯有限公司），电热恒温干燥箱（DHG-9147A，上海精宏实验设备有限公司），马弗炉（SX-4-10，北京市永光明医疗仪器有限公司）。

1.2 试剂 乙腈（色谱级，批号：TA3A1H，霍尼韦尔有限公司）、甲醇（色谱级，批号：W9PG1H，霍尼韦尔有限公司），五水合硫酸铜（分析级，批号：20170426，国药控股股份有限公司）、四水合酒石酸钾钠（分析级，批号：20190815，国药控股股份有限公司）和氢氧化钠（分析级，批号：20200218，国药控股股份有限公司）。

1.3 饮片 从不同生产企业收集竹节伸筋饮片共计15批，样品信息如表1所示。所有批次饮片经株洲市食品药品检验所胡冠宇主管药师鉴定为百合科植物蜘蛛抱蛋Aspidistra elatiorBlume的干燥根茎。样本存放于株洲市食品药品检验所中药样品室。

表1 竹节伸筋饮片信息

2 方法与结果

2.1 性状鉴别

2.1.1 鉴别方法 取竹节伸筋饮片，通过眼看、口尝、鼻嗅、手摸等方法从形状、规格、大小、表面或切面颜色、特征、质地、气味等方面对其进行鉴别。并将其按不同角度摆放于蓝色胶片上，利用数码相机对其进行拍摄，获得该样品最佳数码图片。

2.1.2 鉴别结果 经鉴别，确定其主要性状特征为：本品呈圆柱形或不规则形的段。外表面灰黄色或黄棕色，有疏密不匀的环节和纵沟。根茎一面的节上残留未除尽的须根或点状根痕。质硬，切面黄白色，纤维性，气微，微甜而后苦。（见图1）

2.2 横截面鉴别

2.2.1 鉴别方法 取大小适中竹节伸筋饮片，置于装有水的培养皿中，浸泡数小时，软化后，用泡沫夹住，刀片进行徒手切削，用毛笔蘸取粘在刀片上的薄片，置于水中伸展，然后用毛笔蘸取厚度合适的薄切片置于载玻片上，加清水1~2滴，盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余清水，置于显微镜下观察。

2.2.2 鉴别结果 通过观察，确定其主要横截面显微特征为：表皮为一列类方形的薄壁细胞（见图2a、图2b），外被角质层。皮层由十余列类圆形的薄壁细胞组成（见图2a），近中部有少数纤维束散在，纤维壁厚，微木化，稀有叶迹维管束。内皮层细胞壁呈“ U”字形增厚（见图2c），木化。中柱鞘细胞1列，木化。维管束多为周木型，具纤维鞘。薄壁细胞含草酸钙结晶（见图2d）。

图2 竹节伸筋饮片横截面显微鉴别

2.3 粉末鉴别

2.3.1 鉴别方法 取细粉（过4号筛）少许放在载玻片上，加1～2滴水合氯醛，置于酒精灯上透化至近无色，取下，滴1滴甘油装片，用吸水纸吸去多余甘油，置于显微镜下观察并拍照。

2.3.2 鉴别结果 通过观察，确定其主要粉末显微特征为：黄棕色。薄壁细胞黄色或近无色，类方形，长方形或不规则形，直径20～150 μm，内含草酸钙针晶。导管为网纹，直径20～70 μm。非腺毛3～5细胞，长150～250 μm，直径约20 μm。（见图3）

图3 竹节伸筋饮片粉末显微鉴别

2.4 理化鉴别

2.4.1 鉴别方法 取本品粉末（过4号筛）2 g，加水15 mL，浸渍1 h，滤过。取滤液1 mL，置带塞试管中，强力振摇后观察，放置10 min后再观察。整个过程标记为试验a。再取滤液2 mL，加稀盐酸1 mL，置沸水浴中加热10 min，冷后调至中性，加入碱性酒石酸铜试液4～5滴，再置沸水中加热数分钟，取出静置数分钟，观察。整个过程标记为试验b。

2.4.2 鉴别结果 经处理后，试验a续滤液产生大量蜂窝状泡沫，放置10 min泡沫无明显消失（见图4a）；试验b续滤液产生红棕色沉淀（见图4b）。

图4 竹节伸筋饮片理化鉴别

2.5 水分、总灰分、醇溶性浸出物测定

2.5.1 测定方法 按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0832第二法，测定竹节伸筋饮片的水分[15]；按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则2302，测定竹节伸筋饮片的总灰分[15]；按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则2201，测定竹节伸筋饮片的醇溶性浸出物[15]。（见表2）

表2 叶下珠饮片中水分、总灰分及醇溶性浸出物的含量（n=2）

2.5.2 测定结果 经测定，竹节伸筋饮片中水分、总灰分及醇溶性浸出物百分含量如表2所示。

3 讨论与结论

3.1 性状鉴别 本项目共收集15批次样本，经鉴别，序号为1~12的12批次为主根茎（见图1），序号为13~15的3批次含主根茎较少，含大量须根，且灰屑较多。后3批次样本与原标准[1]和已发表文献[3]等的描述均不符，因此，不纳入本次标准修订所述范畴。

3.2 显微鉴别 湖南省地方标准[1，12]和左盛奇等[3]发表的竹节伸筋质量标准论文记录了竹节伸筋的显微特征，经比较，和本研究所述大多相似或相同，但仍然存在一些区别。

在横截面鉴别中，本研究发现竹节伸筋外皮层为1列外被角质层的类方形薄壁细胞，而左盛奇等[3]描述为1~2列。另外，湖南省地方标准[1]将维管束特征描述为“周木型及外韧型”，而本研究只发现周木型，未发现外韧型。

在粉末鉴别中，左盛奇等[3]描述薄壁细胞尺寸为20~240 μm，但是本研究发现为20~150 μm。另外，左盛奇等[3]描述导管为梯纹，而本研究发现为网纹。

3.3 水分、总灰分、醇溶性浸出物结果分析和限量值推荐 根据实验结果，竹节伸筋饮片的水分含量在5.66%～9.92%，平均值为7.77%。左盛奇等[3]测定的水分含量在12.12%～12.86%，平均值为12.75%。两者存在一定差异。而《湖南省中药材标准》[12]规定限量值范围为不得过12%，左盛奇等[3]根据不超过上限20%的原则推荐为不得过15%，本研究则沿用原省级标准推荐为不得过12%。

竹节伸筋饮片的总灰分含量在4.46%～5.41%，平均值为4.75%。左盛奇等[3]测定的总灰分含量在5.98%～6.67%，平均值为6.43%。相对本结果，整体偏高。左盛奇等[3]根据不超过上限的20%，推荐为8%。本研究同样根据不超过上限20%的原则推荐为7%。

竹节伸筋饮片的醇浸出物含量在30.03%～56.29%，平均值为39.26%。左盛奇等[3]测定的醇浸出物含量在4.48%～5.44%，平均值为4.86%。两者差异巨大。其原因可能与样品来源相关。左盛奇等[3]的样品为自采野生原药材，本研究为基地种植后经炮制加工的饮片。而人工种植品种更为肥厚，糖分等营养物质累积量大，浸出物含量高。其次，自采药材非浸出物含总灰分和水分含量等占比相对饮片高，本研究结果可说明这一点。综上，鉴于左盛奇等[3]研究结果对本研究不具有参考意义，本研究另根据不低于平均值30%的原则，推荐为不低于28%。

3.4 总结 综上所述，笔者在原2010年版《湖南省中药饮片炮制规范》[1]上，增加了粉末鉴别，水分、总灰分及醇溶性浸出物测定等，修订了横截面鉴别。在原标准上有较大提升，能够更为准确、全面地控制竹节伸筋饮片的质量。