规模化母猪场猪丹毒的防控案例分析

孙稳平,李 莉,贾 佩

(1.陕西省畜牧技术推广总站,陕西西安 710016;2.陕西正能农牧科技有限责任公司农业农村部西北生猪良种繁育重点实验室,陕西高陵 710201)

猪丹毒(Swine erysipelas,SE)是由红斑丹毒丝菌(Erysipelothrixrhusiopathiae,ER)引起的一种急性、热性人兽共患病[1],传播迅速、病死率高,也被称为“钻石皮肤病”或“红热病”[2,3]。2008年1月至2018年12我国猪丹毒共发生疫情15 320次,281 967头猪发病[4]。随着生猪养殖集约化程度的加剧和饲料禁抗政策的执行,猪丹毒的临床发生率也在逐年升高,严重影响猪场经济效益。本文通过总结某规模化母猪场猪丹毒的防控措施,以期为规模化母猪场猪丹毒的防控提供参考。

陕西省某规模化猪场存栏基础母猪4 800头。2022年12月25日巡栏发现1线3单元2头异常妊娠母猪,表现为背部皮肤有粉红色红斑,精神萎靡、嗜睡,四肢关节肿胀,步伐僵硬,喜躺卧。2022年12月26日巡栏发现1线3单元新增3头相似症状的异常妊娠母猪,兽医紧急安排场部对1线3单元全群进行加药治疗,方案为:饮水添加复方阿莫西林和卡巴匹林钙7 d,对于皮肤出现红斑的异常猪进行安痛定+青霉素肌肉注射,每天2次,方案实施后第3天异常猪逐渐恢复,红斑消退。2023年1月8日3线和4线妊娠母猪相继出现背部红斑的异常猪只,部分异常猪出现发热和瘫痪的症状,针对该异常情况,兽医部中心实验室通知场部紧急采集异常猪全血和背部红斑皮肤血拭子进行疫病诊断。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 用洁净医用棉签采集异常猪的血液和背部红斑皮肤血拭子样品。

1.1.2 主要试剂 科牧丰磁珠法核酸提取试剂(32A6),北京科牧丰生物技术有限责任公司产品;红斑丹毒丝菌核酸检测试剂盒(RM-F-D1069)、猪瘟核酸检测试剂盒(RM-F-D3021)、猪蓝耳病核酸检测试剂盒(RM-F-D1089)、圆环病毒2型核酸检测试剂盒(RM-F-D1047)均,湖南润美生物科技有限公司产品;所有样品的检测试剂为同批次试剂盒,试剂均在规定有效期内使用,核酸提取试剂置于常温保存备用,病原核酸检测试剂盒均置于-25℃冷冻保存。

1.1.3 主要仪器 -25℃冰箱(YCD-265),澳柯玛股份有限公司产品;离心机(D3024),大龙医疗设备有限公司产品;荧光定量PCR仪(48),北京爱德士元亨生物科技有限公司产品;核酸提取仪(32孔),北京科牧丰生物技术有限责任公司产品。

1.2 方法

1.2.1 临床症状观察 对异常猪的发病史和用药史进行问诊和视诊。

1.2.2 病原检测 参照核酸提取试剂盒说明书进行核酸提取。以提取的核酸为模板按照红斑丹毒丝菌病原检测试剂盒说明书进行扩增,荧光定量PCR反应参数为:50℃ 2 min;95℃ 3 min;95℃ 5 s,55℃ 40 s,5个循环;95℃ 5 s,55℃ 40 s,40个循环(此阶段结束采集荧光信号)。按照猪瘟病原检测试剂盒说明书进行扩增,PCR反应参数为:50℃ 10 min;95℃ 3 min;95℃ 5 s,55℃ 40 s,5个循环;95℃ 5 s,55℃ 40 s,40个循环(此阶段结束采集荧光信号)。按照猪蓝耳病原检测试剂盒说明书进行扩增,PCR反应参数为:50℃ 10 min;95℃ 3 min;95℃ 5 s,55℃ 40 s,5个循环;95℃ 5 s,55℃ 40 s,40个循环(此阶段结束采集荧光信号)。按照猪圆环病毒2型病原检测试剂盒说明书进行扩增,PCR反应参数为:50℃ 2 min;95℃ 3 min;95℃ 5 s,55℃ 40 s,5个循环;95℃ 5 s,55℃ 40 s,40个循环(此阶段结束采集荧光信号)。试验结果判断标准:在试验成立的情况下(阳性对照FAM通道有标准型“S”型曲线且Ct值<38、阴性对照FAM无“S”型扩增曲线且无Ct值),若样本对应的FAM通道有标准“S”型扩增曲线且Ct值35则为阳性,若样本对应的FAM通道无标准“S”型扩增曲线且无ct值则为阴性。对于试验不成立的试验样本需重新进行试验。

2 结果

2.1 临床诊断

异常妊娠母猪后背出现方形或菱形的斑块,突出表皮,早期会出现指压褪色现象。异常猪伴发热和关节肿胀现象。对于异常猪收集血清和红色斑块血拭子进行实验室诊断检测(图1)。

A.早期异常猪背部皮肤呈粉红色斑块;B.晚期异常猪背部皮肤呈紫红色斑块且猪只瘫痪;C.斑块血拭子采样图

2.2 实验室检测

对于采集的异常猪的血清和血拭子(1～3号)进行红斑丹毒丝菌的核酸检测、猪瘟病原核酸检测、猪蓝耳病病毒核酸检测和猪圆环病毒2型核酸检测。试验结果显示,红斑丹毒丝菌核酸检测结果为阳性、猪瘟病毒核酸检测结果为阴性,猪蓝耳病病毒核酸检测结果为阴性,猪圆环病毒2型核酸检测结果为阴性(图2)。

a.红斑丹毒丝菌3号样;b.红斑丹毒丝菌1号样;c.红斑丹毒丝菌阳性对照;d.猪圆环病毒2型阳性对照;e.红斑丹毒丝菌2号样;f.阴性对照及阴性结果样本;g.猪瘟阳性对照;h.猪蓝耳病阳性对照;i.阴性对照及阴性结果样本。

2.3 诊断结果

结合猪群临床症状和兽医实验室的检测结果,将导致异常猪的病因确诊为猪丹毒。

2.4 防控方案

猪丹毒属于细菌性传染病,鉴于该场有过多点散发猪丹毒的发病史,因此,疾病的防控方案采用综合性防控措施,具体内容如下。

2.4.1 生物安全管控 对场区内环境和猪舍用金卫康消毒液全面消杀。人员进出猪场必须洗澡换衣,换洗衣物用金卫康消毒液浸泡过夜。每条线生产人员固定,严禁串线,每栋舍门口放置含金卫康消毒液的洗手盆和脚踏盆,进出栋舍的员工必须用金卫康消毒液洗手2 min,脚踩消毒盆1 min,并对洗手盆和脚踏盆中消毒液每天更换1次。对于猪丹毒发病后出现瘫痪的猪做紧急淘汰处理。该猪场猪饲养用水为地表水,对于水源进行漂白粉处理(按照12 g/t水的标准进行添加),原水输送管道和水线用3%柠檬酸消毒(每月1次)。

2.4.2 药物治疗 全群饮水添加复方阿莫西林和卡巴匹林钙3 d,对于异常猪只安痛定+青霉素肌肉注射,每天2次,对于治疗3 d无好转的异常猪只紧急淘汰处理。

2.4.3 疫苗免疫 在药物治疗后,全群普免猪丹毒灭活疫苗(成都天邦)1头份/头,间隔3周后,全群再次普免猪丹毒灭活疫苗(成都天邦)1头份/头。

2.5 防控效果

猪群在防控方案实施后半年内未发生猪丹毒疫情,该防控方案有效。

2.6 发病原因分析

该猪场位于地势高燥的山顶,方圆3 km无猪场、屠宰场、动物诊所及病死动物无害化处理场。猪场于2022年10月21日9批次126日龄后备母猪发生猪丹毒,该批次后备母猪添加抗生素治疗后于2022年12月3日入群到4条生产线,配种后转入妊娠舍,分别于2022年12月25日和2023年1月8日发生猪丹毒。9批入群后备母猪预后的隐性感染和冬季温度的变化(12月底发生气温骤降)是导致此次疫情的主要原因。

3 讨论

猪丹毒是由红斑丹毒丝菌引起的人畜共患传染病病,该菌属革兰氏阳性菌,呈短断头发状,无芽孢,不耐酸碱的兼性厌氧菌,对抗生素敏感[5]。患病猪或者带菌猪通过粪便及眼鼻分泌物向环境中排出的红斑丹毒丝菌成为猪场猪丹毒的主要传染来源,该病主要通过消化道和皮肤伤口进行传播。红斑丹毒丝菌入侵猪体的途径有多种,其中,荚膜多糖能帮助红斑丹毒丝菌逃逸机体免疫系统的防御[6],细菌能通过自身的透明质酸酶[7]和糖苷水解酶[8]降解双糖和脂类,从而获得能量。

目前,青霉素类抗生素仍然是临床上针对猪丹毒治疗的首选药物,常见药物包括青霉素、阿莫西林。部分细菌也对大环内酯类药物、喹诺酮类、林可酰胺类和四环素类药物敏感,但随着耐药菌株的出现及传播,抗生素的使用效果逐渐降低[9]。龚争[10]在对2017-2018年间在江苏安徽等地分离的20株红斑丹毒丝菌进行药敏试验,发现分离菌株对大多数抗生素敏感,而唐正露[11]在2018-2020年间对皖、苏、鲁、冀、桂5省流行毒株中分离到青霉素耐药菌株,四川大学研究者分离到大环内酯类抗性基因的红斑丹毒丝菌[12],临床更多的耐药菌株被相继发现[13-17]。在抗生素使用效果不佳的情况下,有学者[18-19]采用中药方剂和中西药物结合的用药方式用于猪丹毒疫病的防控。而对于规模化猪场来说,疫苗的免疫接种被认为是最经济有效的手段[20]。

对于猪丹毒反复发生的规模化猪场,场内隐性排毒猪和带毒猪比例高,猪丹毒防控难度大,且防控措施应采用综合性防控措施。本案例猪场属于典型猪丹毒反复发生场,虽前期经过抗生素治疗有效,但群内长期有红斑丹毒丝菌的传播循环,为彻底控制疫情,笔者采取猪场生物安全管控措施、药物治疗及猪丹毒疫苗免疫的综合防控措施对该起疫情进行控制,治愈率为100%,与陈明[21]的方案稍有不同,但效果一致。