二硫化硒洗发水的去屑止痒性能研究

陈 跃 张红强 王佳慧 张佳美 曹福敏

1. 山西振东制药股份有限公司，山西长治，047100；

2. 山西振东健康护理科技股份有限公司，山西长治，047100

头皮脂溢性皮炎（seborrheic dermatitis）是一种慢性复发性炎症性头皮疾病[1]，它的特点是生成红斑或轻至中度的鳞片，引起头皮油腻和片状头皮屑并伴随着瘙痒。在成年人群中，其患病率高达5%，选择去屑洗发产品是人们解决这一烦恼的首选手段。

二硫化硒通过减少细胞生成，抑制核分裂，降低细胞功能等作用机制对抑制皮脂形成和杀灭真菌具有显著作用，且对细菌和寄生虫也有明显抑制作用[2]。二硫化硒洗剂（2.5%）对多种真菌感染性皮肤病均有良好的效果[3]，如对脂溢性皮炎、接触性皮炎等[4]具有效果显著、不良反应少、应用广泛等优势[5]。

二硫化硒已收录在《已使用化妆品原料名称目录（2021版）》[6]，其限用添加量为1%。本文旨在考察含1%二硫化硒洗发水的人体试用去屑止痒性能和抑菌测试。

1 实验部分

1.1 原料

瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、柠檬酸、月桂醇聚醚硫酸酯钠（有效物含量70%）、丙烯酸（酯）类共聚物、椰油酰基甲基牛磺酸钠（有效物含量30%）、椰油酰胺丙基甜菜碱（有效物含量30%）、椰油酰胺MEA（有效物含量100%）、丙二醇，上海科因实业有限公司；PPG-3 辛基醚，湖北巨胜科技有限公司；二硫化硒，海南君森化学科技有限公司。

1.2 菌株

糠秕马拉色菌，白色念珠菌均由中国食品药品检定研究院提供。

1.3 试剂

改良Leeming-Notman培养基、MH琼脂培养基、橄榄油均由北京三药科技开发公司提供，滤纸由通用电气生物科技有限公司提供。

1.4 仪器

头皮影像分析仪（放大倍数：50倍），集热式恒温加热磁力搅拌器（型号DF-101S，巩义市予华仪器有限责任公司），分析天平（精度：0.000 1 g），立式压力蒸汽灭菌器（型号YXQ-LS-100A，上海博讯实业有限公司），培养箱（型号LRHS-250BF，上海贺德实验设备有限公司），游标卡尺，超声波破碎仪，浊度计，冰箱。

1.5 样品配制方法

按表1的配方及以下方法配置洗发水。

表1 二硫化硒去屑洗发水配方

将A相依次加入瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵先用纯化水分散，边搅拌边加热，直至溶解；加热至80 ℃，依次加入B相，直至完全溶解，搅拌均匀；降温至60 ℃，将C相混合用均质机进行有效分散后加入，搅拌均匀；降温至35 ℃，最后加入D相，直至完全溶解，搅拌均匀，取样检测合格，过滤出料。

2 试验方法

2.1 抑菌实验方法

2.1.1 样品处理

将样品用PBS溶液稀释，作为检测样品母液，稀释后样品浓度为50%。

2.1.2 测试方法

将20 μL检测样品根据实际使用浓度滴加在滤纸片上，干燥后备用：对于溶出性固体试样，制成直径为5 mm、厚不超过4 mm的圆片。用无菌棉拭子蘸取浓度为（5.0×105～5.0×106） CFU/mL的试验菌悬液，在培养基平板表面均匀涂抹3次。每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片，1片阴性对照样片，共5片。盖好平板，置（30±1） ℃培养72 h后观察结果，用游标卡尺测量抑菌环的直径。

2.1.3 质控

分别以糠秕马拉色菌和白念珠菌为指示菌，设计阴性对照组和样品组，每组设计3个生物学重复，采用抑菌环法，游标卡尺测定抑菌圈。

2.1.4 评价方法

根据形成的抑菌圈大小对洗发水样品的去屑功效进行评价，参照WS/T 650—2019《抗菌和抑菌效果评价方法》中抑菌环实验的结果判定标准，直径大于7 mm者，具有抑菌作用。

阳性结果：受检样品在一定浓度下可以抑制糠秕马拉色菌的生长，抑菌环直径大于7 mm，且抑菌环越大代表该受检样品具有的去屑效果越好。

阴性结果：受检样品在一定浓度下可以抑制糠秕马拉色菌的生长，抑菌环直径小于7 mm，代表该受检样品不具有去屑效果。

2.2 去屑功效评估

2.2.1 研究对象

随机选取30名具有明显头皮屑、脂溢性皮炎等头皮皮肤病患者作为受试者，年龄22～40岁，其中男性10名，女性20名。排除标准：①1个月内参加药物临床试验或其他试验者；②一周内使用对试验结果有影响的洗发水者；③1个月内有外用或内服抗真菌药物或糖皮质激素者。退出标准：试验期间因妊娠、不良反应等不符合研究对象要求的受试者。试验在开展前均已通过长治市上党区中医院伦理委员会评审，同时所有受试者在充分了解整个试验过程及潜在的风险后，自愿签署知情同意书。

2.2.2 测试方法

选取符合测试条件受试者30名，按个人洗发水使用习惯连续使用二硫化硒洗发水持续28 d。在使用前、14 d、28 d使用头皮分析仪器观察变化情况。受试者在测试周期完成后对头屑、头痒的症状进行使用前后的对比，依照自身情况对二硫化硒洗发水进行评分。

2.2.3 评估方法

判断标准见表2。

表2 判断标准

3 结果

3.1 样品体外糠秕马拉色菌抑菌结果

糠秕马拉色菌抑菌结果见表3。

表3 糠秕马拉色菌抑菌结果

由表3可看出，被检样品三次重复试验中，阴性对照均无抑菌环产生，被检样品抑菌环直径均大于7 mm，判为有抑菌效果，表明检测样品具有去屑功效。

3.2 样品体外白念珠菌抑菌结果

白念珠菌抑菌结果见表4。

表4 白念珠菌抑菌结果

由表4可看出，被检样品三次重复试验中，阴性对照均无抑菌环产生，被检样品抑菌环直径均大于7 mm，判为有抑菌效果，表明检测样品具有去屑功效。

3.3 图像分析

在使用前、使用后14 d、28 d分别使用头皮影像分析仪观察头屑的变化情况（表5）。

表5 其中4位受试者头屑头皮影像分析仪的图像分析

从表5可看出，通过头皮影像分析仪观察有改善的受试者头皮随着使用时间的增加，受试者头屑减少。

3.4 去屑止痒效果评价

采用人体试用评价，并对使用样品28 d后的试用情况进行回访比较，评价结果见表6。

表6 样品去屑止痒效果评价

由表6可以看出，二硫化硒洗发水较市场去屑洗发水对头屑和头痒均有更显著的效果，使用二硫化硒洗发水28 d后，高达93.3%的受试者感到头屑症状明显减轻或消失，高达90%的受试者认为样品止痒效果突出。

4 讨论

本研究采用与阴性对照相比，受检样品浓度在50%时，对白念珠菌和糠秕马拉色菌的抑菌环直径均大于7 mm，证明对两种菌都有抑菌作用，说明该受检样品具有去屑效果。抑菌试验方法为体外非生物系统模型，相对于机体而言，非生物系统没有考虑机体的代谢和免疫等系统方面的影响，通过人体功效评价结果证明，使用二硫化硒洗发水的受试者连续使用28 d后，头屑、头痒现象有明显改善，证明样品具有去屑效果。