蒲云月 刘 冬 张 云 于思涵
苏州绿叶日用品有限公司,江苏苏州,215151
随着生活压力的增加,中国90%以上人群存在掉发、发质干枯分叉、头屑、脱发等头皮和头发问题[1]。烫发、染发、空气污染和太阳辐射等都会造成头发损伤,甚至断发、脱发。目前头发的损伤可以分为四种类型:①物理损伤;②化学损伤;③热损伤;④日光损伤及气候老化[2-4]。头发受损导致的角蛋白网络被破坏、水分流失从而造成发质干枯、分叉,是掉发、断发的重要原因[5]。
现在越来越多的消费者追求健康、柔韧、自然的秀发。本研究利用实验室自制的一款以角蛋白、蚕丝蛋白和泛醇为主要活性成分的洗发水,通过体外测试和人体测试来评估其保湿、修护和护发功效,为评价修护类洗发水的功效提供参考[6-7]。
1.1.1 测试样品的制备
洗发水配方见表1,其样品由实验室自制。具体的配制步骤为:将1和2加入烧杯,搅拌溶解均匀;加入3、4,升温至80~85 ℃,搅拌溶解至透明均一;依次加入5、6、7、8、9,搅拌溶解至透明均一;降温至40~45 ℃,依次加入10、11、12、13、14、15,搅拌溶解至透明均一;加入16,搅拌均匀;用17或18调节pH值至5.50~6.50(25 ℃),用19调节黏度值。空白对照组配方不加入角蛋白、蚕丝蛋白和泛醇,配制步骤同样品组。
表1 产品配方组成
1.1.2 实验仪器
皮肤水分含量测定仪Dermalab Hydration Probe(丹麦Cortex),经皮水分流失测量仪VapoMeter(芬兰Delfin),皮肤光泽度测试仪Glossymeter GL200(德国CK),头发多功能测试系统fibra.one(英国Dia-Stron),扫描电子显微镜SU8010(日本HITACH),中度损伤发束:15 cm×3 cm,4 g。
1.2.1 理化指标和稳定性测试
按照GB/T 13531.1—2008《化妆品通用检验方法 pH值的测定》规定方法进行pH值测定。按照GB/T 29679—2013《洗发液、洗发膏》的要求进行稳定性测试。
1.2.2 安全性测试
人体皮肤斑贴试验是人体安全性试验,可以检测受试物引起人体皮肤不良反应的潜在可能性。按照《化妆品安全技术规范》(2015年版)进行33人的皮肤封闭性斑贴试验。将受试物稀释成1%水溶液,取适量加于斑试器内,将斑试器贴敷于受试者前臂曲侧,24 h后去除受试物,分别于去除后0.5 h、24 h、48 h、72 h观察皮肤反应。
1.2.3 毛鳞片修复效果测试
样品组用修护洗发水处理发束,对照组用对照样品处理。将样品均匀涂抹在已受损发束上,按摩1 min,停留5 min后,用37 ℃自来水均匀冲洗1 min。待头发晾干后进行电镜扫描。
1.2.4 头发干梳理性能测试
测定样品处理前发束梳理过程的最大载荷(P前),取10束发束,分为两组,样品组用修护洗发水处理发束,对照组用对照样品处理发束。发束晾干后测定样品处理后发束梳理过程的最大载荷(P后)。计算处理前后最大载荷减少值:ΔP=P前-P后。
1.2.5 头发光泽度测试
测定样品处理前发束的光泽度(G前),取20束发束,分为两组,样品组用修护洗发水处理发束,对照组用对照样品处理发束。发束晾干后测定样品处理后发束的光泽度(G后)。计算处理前后光泽度增加值:ΔG=G后-G前。
1.2.6 人体功效评价测试
受试者筛选工作参考2015版《化妆品安全技术规范》。受试者的选择遵守伦理学原则要求,所有受试者的测试均必须出于受试者本人自愿,并在测试前签署知情同意书。
选取健康受试者33例,18~45岁女性(妊娠或哺乳期女性除外),头发长度不小于10 cm,头发存在干枯易断、暗哑受损等问题;无严重系统疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病,受试部位没有接受过皮肤治疗、美容以及其他可能影响结果的测试,且同意在试验期间不进行剪发、染发、烫发,只使用试验需要提供的产品。
受试者每次洗发时取适量样品轻揉头发和头皮,然后用清水冲洗干净,使用频率为2~3 d/次,持续28 d。使用0 d、14 d、28 d时,使用Dermalab Hydration Probe、VapoMeter仪器,测量头皮水分含量、经皮水分丢失量。
第28天回访时完成感官评价问卷,按照自身感受对此款洗发水的使用感、功效满意度等方面进行评价。
1.2.7 数据分析
采用SPSS统计软件进行数据分析。统计分析前对各参数进行正态分布检验,若测试数据为正态分布,正态分布组内采用配对样本T检验方法进行统计分析,组间采用独立样本T检验进行统计分析;若测试数据为非正态分布,则采用秩和检验方法进行统计分析。统计方法均采用双尾检验,检验水准α=0.05。
显著性标注方法:“*”表示有显著性差异(0.01≤P<0.05);“**”表示有明显显著性差异(0.001≤P<0.01);“***”表示有极显著性差异(P<0.001)。
样品理化指标及稳定性结果见表2。
表2 理化指标及稳定性结果
产品按照要求进行人体皮肤斑贴试验,分别于去除斑试器后0.5 h、24 h、48 h、72 h观察皮肤反应。结果显示为0例阳性,33人均无皮肤不良反应,证明该样品安全性良好。
头发由复杂的角质纤维构成,横切面从外到里可分为毛表皮、毛皮质和毛髓质三部分[8]。毛表皮由鳞片或瓦状的角质细胞构成,保护头发不受外界环境影响,保护皮脂并抑制水分蒸发,保护头发乌黑、亮泽和柔韧[5]。图1列出了对照组和样品组头发表面形态的SEM图。通过图片分析可以看出,对照组处理后的头发毛鳞片翘起并且排列混乱,样品组处理后的头发毛鳞片表面平整并且排列比较整齐。这表明使用样品后,头发毛鳞片得到了修复。
图1 头发表面形态SEM图片
头发的梳理性是检验洗发水护发效果的一项重要指标,它是指当梳子通过头发时遇到阻力的大小。利用头发测试仪测试梳理过程的最大载荷(peak load),对样品组和对照组头发进行干发梳理性能测试。最大载荷越小,表明头发可梳理性越好。由表3可知,样品组与对照组比较,ΔP有极显著性差异(P<0.001),说明使用产品后能明显改善头发梳理性能,具有柔顺头发的效果。
表3 头发干梳理测试结果
头发光泽度也是检验洗发水护发效果的一项重要指标。一头光泽亮丽的头发给人一种健康、充满活力的美感。如果头发用洗发水洗过之后干枯发黄那就说明受到了较严重的损伤。利用皮肤光泽度测试仪对样品组和对照组头发进行干发光泽度测试。光泽度值越大,表明发质越好。由表4可知,样品组与对照组比较,ΔG具有统计学差异(P<0.01),表明洗发水具有显著提高头发光泽度的作用。
表4 头发光泽度测试结果
头皮不同于其他部位的皮肤,覆盖有浓密的毛发,其水分含量测试相较于其他部位更困难、操作更烦琐,毛发的存在会影响测试值,目前运用得比较多的测试方法是通过剃除头发后用Corneometer进行测量[9]。Dermlab Hydration Probe针式探头可以不用剃发即可测试头皮部位,通过电导测量法测量皮肤最上层的导电性能,提供皮肤中水分状态的信息[10]。测量值越大,头皮水分越高。头皮水分含量测试结果如图2所示,测试前头皮角质含水量最低,连续使用产品14 d后,受试者头皮水分含量显著性提高了11.23%(P<0.05),连续使用产品28 d后,受试者皮肤头皮水分含量显著性提高了19.02%(P<0.001),说明该产品能增加皮肤水分含量,具有较好的保湿效果。
图2 头皮水分含量
VapoMeter探头较小,受试者可以避免剃发,内有一个湿度传感器的圆柱形测量室,通过将测量室贴合皮肤检测测量室内的相对湿度变化,计算经皮水分流失率[10]。经皮水分丢失(transepidermal water loss,TEWL)测试值越低,说明皮肤锁水能力越好,皮肤屏障功能越好。从图3可以看出,0周时TEWL值最高,为(26.37±15.91)g/(m2·h);其中14 d、28 d与0 d相比,分别降低7.89%和19.80%(P<0.05),且差异均具有统计学意义。说明测试样品可以改善头皮经皮水分丢失量,增强皮肤屏障。
图3 头皮经皮水分丢失量
受试者主观评价内容包含洗发水对头发的顺滑度、光泽度、滋润度、蓬松感和改善头发和头皮的整体效果,结果见表5,受试者对头发和头皮整体改善效果满意度为88%。
表5 使用洗发水28 d后受试者自评结果
本研究采用体外测试和人体测试,共同对洗发水的功效和安全性进行了评价。发束的干发梳理最大荷载显著降低、光泽度显著提升,头发的毛鳞片修复明显。受试者使用产品28 d后,头皮水分含量显著提高19.02%,TEWL显著减少了19.80%,结合受试者主观评价结果,说明该产品具有很好的保湿、护发和修护的功效。