肺癌患者GASP-1、LCN2 和TPX2 的表达水平及其与TNM 分期和预后的相关性分析

黄彦泽，文英娟

肺癌是我国患病率相对较高的恶性肿瘤，近年来患病率呈逐年上升趋势，且病死率居恶性肿瘤的首位。肺癌患者早期症状不典型，且具隐匿性，极易有漏诊与误诊的情况出现，进而延误最佳治疗时机，增加死亡风险［1］。临床通常用TNM（tumor-nodemetastasis classification）分期对恶性肿瘤的病理进行分类，明确TNM 分期后实施对症干预，可抑制癌性病灶扩散，延长生存期限［2］。G 蛋白偶联受体相关分选蛋白1（G protein-coupled receptor-associated sorting protein 1， GASP-1）是G 蛋白偶联受体膜蛋白家族的重要成员，主要在细胞膜、细胞质中表达，研究发现GASP-1 具有促血管内皮生长因子受体调控恶性肿瘤的作用［3］。脂质运载蛋白-2（lipocalin-2， LCN2）的表达水平与胰岛素抵抗、细胞凋亡、血管病变等多个生理、病理过程密切相关，研究发现LCN2 表达水平上调与恶性肿瘤进展相关［4］。相关文献报道，Xklp2 靶蛋白（targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2， TPX2）表达下调可抑制癌细胞增殖，促进癌细胞凋亡［5］。本研究着重探究肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平及其与TNM 分期和预后的相关性，旨在为肺癌病理分期的明确和预后判断提供思路。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2019 年4 月至2022 年5 月南部战区总医院接受治疗的肺癌患者92 例作为观察组。选取同期92 例健康体检者作为对照组。将观察组按预后情况分为预后良好组和预后不佳组。纳入标准：（1）符合中华医学会《肺癌临床诊疗指南（2022 版）》中诊断标准［6］；（2）TNM 分期经细胞学或病理学明确；（3）均首次诊断、确诊为非小细胞癌；（4）预计生存期限≥6 个月；（5）肺癌患者入院前未接受靶向治疗、放化疗等；（6）入院后接受4 个周期的卡瑞利珠单抗化疗；（7）病理资料完整。排除标准：（1）伴自身免疫系统疾病；（2）合并其他器官恶性肿瘤；（3）伴有认知、语言障碍或精神类疾病，难以配合完成检查。观察组男性58 例（63.04%）、女性34 例（36.96%），年龄49～75 岁［（63.49 ± 7.52）岁］，TNM 分期Ⅰ期16 例（17.39%）、Ⅱ期24 例（26.09%）、Ⅲ期30 例（32.61%）、Ⅳ期22 例（23.91%）。对照组男性56 例（60.87%）、女性36 例（39.13%），年龄48～74 岁［（65.14 ± 7.82）岁］。2 组研究对象年龄、性别等基础资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法 采集观察组入院前、4 个化疗周期结束后以及对照组外周静脉血样6 ml，血样置于37 ℃恒温水浴中30 min，以LDL-5L 型低速离心机离心15 min，转速3 000 r/min（r=8 cm），取血清，盛装于EP 管中，贮存于冰箱中待检［7］。采用ELISA 法及配套试剂盒检测血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平，其中GASP-1 试剂盒来自上海研尊生物科技有限公司，LCN2 试剂盒来自上海西唐生物科技有限公司，TPX2 试剂盒来自上海泽叶生物科技有限公司。预后情况评价参考疗效评价标准［8］，完全缓解（complete response， CR）为肿瘤病灶完全消除，无其他临床表现；部分缓解（partial response， PR）为病灶缩小＞50%，未出现新病灶；疾病稳定（stable disease， SD）为症状未好转，病灶缩小25%～50%；疾病进展（progressive disease， PD）为肿瘤病灶增大或出现新病灶，增大＞25%。预后良好为CR 及PR，预后不佳为SD 及PD。评价时间为化疗周期结束后随访5 个月。

1.3 统计学处理 数据通过SPSS 22.0 软件处理。计量资料以±s 描述，组间比较采用t或F检验；计数资料以例数和百分比（%）描述，采用χ2检验。相关性采用Spearman 分析。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组与对照组治疗前血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平比较 治疗前观察组血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 观察组与对照组治疗前血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平比较（±s）

表1 观察组与对照组治疗前血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平比较（±s）

注：GASP-1 为G 蛋白偶联受体相关分选蛋白1，LCN2 为脂质运载蛋白-2，TPX2 为Xklp2 靶蛋白

TPX2（ng/μl）6.89 ± 1.85 2.96 ± 0.34 12.870＜0.001组别观察组对照组t 值P 值例数92 92 GASP-1（ng/ml）163.49 ± 20.34 31.56 ± 6.71 44.251＜0.001 LCN2（ng/ml）205.11 ± 46.25 86.59 ± 16.24 35.201＜0.001

2.2 不同TNM 分期的患者治疗前血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平比较 TNM 分期为Ⅱ期的肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平与TNM分期Ⅰ期的肺癌患者比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；TNM 分期为Ⅲ期、Ⅳ期的肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平高于TNM 分期为Ⅰ期、Ⅱ期的肺癌患者（P＜0.05）；且TNM 分期为Ⅳ期的患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平均高于TNM 分期Ⅲ期患者（P＜0.05）。见表2。

表2 治疗前不同TNM 分期的肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平比较（±s）

表2 治疗前不同TNM 分期的肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平比较（±s）

注：与Ⅰ期比较aP＜0.05；与Ⅱ期比较bP＜0.05；与Ⅲ期比较cP＜0.05。GASP-1 为G 蛋白偶联受体相关分选蛋白1，LCN2 为脂质运载蛋白-2，TPX2 为Xklp2 靶蛋白

TPX2（ng/μl）3.80 ± 0.69 3.97 ± 1.02 7.81 ± 1.62ab 10.62 ± 2.01abc 197.533＜0.001 TNM分期Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期F 值P 值例数16 24 30 22 GASP-1（ng/ml）128.64 ± 26.12 130.11 ± 24.27 178.08 ± 19.63ab 202.33 ± 20.17abc 113.567＜0.001 LCN2（ng/ml）169.47 ± 21.86 174.32 ± 22.03 216.35 ± 23.68ab 240.32 ± 41.20abc 5.260＜0.001

2.3 肺癌患者治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平与预后的关系 92 例肺癌患者中预后良好者49 例、预后不佳者43 例。预后良好组患者治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平均低于预后不佳组（P＜0.05）。见表3。

表3 预后良好组与预后不佳组患者的治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2 水平比较（±s）

表3 预后良好组与预后不佳组患者的治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2 水平比较（±s）

注：GASP-1 为G 蛋白偶联受体相关分选蛋白1，LCN2 为脂质运载蛋白-2，TPX2 为Xklp2 靶蛋白

TPX2（ng/μl）6.25 ± 1.07 10.32 ± 2.06 21.305＜0.001组别预后良好组预后不佳组t 值P 值例数49 43 GASP-1（ng/ml）141.32 ± 22.31 211.35 ± 34.71 34.528＜0.001 LCN2（ng/ml）175.33 ± 16.25 243.56 ± 45.31 32.014＜0.001

2.4 肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平与TNM 分期和预后的相关性 肺癌患者治疗前血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平均与TNM 分期呈正相关，相关系数r为0.547、0.545、0.539（P＜0.05）；肺癌患者治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平均与预后呈负相关，相关系数r为-0.512、-0.509、-0.522（P＜0.05）。

3 讨论

肺癌的发生、进展是多因素、多途径共同作用的结果。当前临床多以癌性病灶的影像学特征进行肿瘤的初步诊断、判断，但影像学检查图像受检测者的主观影响，可能存在误诊及漏诊情况，加之肺穿刺活检、纤维支气管镜等检查对部分伴禁忌证患者而言难以实施［9-10］。而血清学检查的优势明显，取材便捷、创伤性小、费用相对偏低，在恶性肿瘤病理分期预判方面具有一定的应用价值［11］。

本研究着重探究肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平及其与TNM 分期和预后的相关性，旨在为肿瘤临床肺癌病理分期的明确和预后判断提供思路，结果发现，相比于对照组，观察组患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 水平均升高（P＜0.05），表明肺癌患者血清中GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平高于健康人。GASP-1 是近年来新发现的潜在恶性肿瘤标志物，有望成为肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤的灵敏标志物。TPX2 基因严格调控极光激酶A（Aurora-A）的活性，精确控制细胞有丝分裂进程，其在乳腺癌、肺癌、膀胱癌等中的表达水平高度异常，癌组织与癌旁组织相比，TPX2 表达水平显著升高，且其过表达与癌症预后不良密切相关。LCN2 在肺癌患者血清中高表达，与病理组织的分化、分期及淋巴结转移相关，有望成为一种潜在的用于临床诊断的新型肺癌肿瘤标志物。

分析治疗前不同TNM 分期肺癌患者的血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平，结果显示，观察组TNM 分期为Ⅲ、Ⅳ期的肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平高于TNM 分期为Ⅰ、Ⅱ期的肺癌患者（P＜0.05），且TNM 分期为Ⅳ期的患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平均高于TNM 分期为Ⅲ期的患者（P＜0.05）。上述结果表明，GASP-1、LCN2、TPX2 可作为判断肺癌患者TNM 分期的肿瘤标志物。经统计，92 例肺癌患者预后良好者49 例、预后不佳者43 例。相比于预后不佳组，预后良好组患者治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平均下降（P＜0.05），表明当肺癌患者预后良好时，血清GASP-1、LCN2、TPX2 表达水平会降低，而预后不佳时则会升高。

相关性分析发现，肺癌患者治疗前血清GASP-1、LCN2、TPX2 水平均与TNM 分期呈正相关（P＜0.05），肺癌患者治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2水平均与预后呈负相关（P＜0.05）。上述结果表明，肺癌患者入院时血清GASP-1、LCN2、TPX2 水平高于正常值，则TNM 分期通常在Ⅲ期与Ⅳ期，经过治疗后患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 水平降低，一定程度上能反映患者预后情况。GASP-1 对肿瘤细胞增殖有一定的促进作用，当GASP-1 高表达，其通过负向竞争作用降解组织细胞，从而起到促进血管内皮生长因子受体调节肿瘤的作用，加之癌性肿瘤生长会诱使GASP-1 高表达，进一步将相关转录调控元件激活，加速癌性细胞迁移［12］。LCN2 通过促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移而促进肿瘤的进展，且可调节肿瘤微环境，其介导的细胞内铁含量抑制肿瘤细胞的凋亡，并能通过与其他蛋白的相互作用调控肿瘤的进展［13］。TPX2 属于微管相关蛋白，参与微管的形成，在一定程度上可促癌性细胞增殖，且具有调控细胞分裂周期的作用，TPX2 可下调钙黏蛋白E 水平，提升癌性细胞侵袭能力。TPX2 高表达会进一步激活强化TLR4 信号，抑制癌性细胞凋亡，提升细胞侵袭能力，在肺癌发生与进展中作用显著［14］。

综上所述，通过检测肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2 的表达水平，可判断出其TNM 分期，在对症治疗后检测上述血清指标，可在一定程度上反映患者预后情况，为临床医师判断病情与预后提供参考。