血清lncRNA p21 表达水平与PCI 治疗急性心肌梗死患者预后的关系

王亮 李伟 李涛 耿山山 袁国良

急性心肌梗死是由心肌细胞缺血缺氧导致的心肌损伤及坏死性疾病，该病在临床具有较高的发病率及死亡率［1］。经皮冠状动脉介入术（percu⁃taneous coronary intervention，PCI）是治疗急性心肌梗死患者的主要方法之一，其可改善心肌缺血症状［2］。但是PCI 属于侵入性操作，可能会引发心室结构及功能的改变，进而诱发一系列并发症的发生。心脏彩超及心肌损伤标记物可用于评估急性心肌梗死患者PCI 术后预后情况，但肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CK⁃MB）及肌钙蛋白I（cardiac troponin⁃I，cTnI）水平单独检测的灵敏度不足［3］。长链非编码RNA（long noncoding RNA，lncRNA）在心血管疾病中的作用是近年来研究的热点，其在基因表达及蛋白功能调节方面发挥了重要作用［4］。lncRNA p21是p53 依赖型转录基因，有研究显示，lncRNA p21在脑动脉粥样硬化患者血清中表达水平较正常者降低［5］。研究证实［6］，lncRNA p21具有内源性竞争性RNA 的作用，可发挥调节心肌细胞、内皮细胞生物学功能，在急性心肌梗死、心力衰竭的发生发展中也有重要作用。基于上述研究背景，本研究将探究lncRNA p21表达水平与PCI 治疗急性心肌梗死患者预后关系，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年1 月至2020 年12 月沭阳县中医院收治的102 例PCI 治疗的急性心肌梗死患者，患者术后随访1 年，根据急性生理与慢性健康评分（Acute Physiology and Chronic Health Evaluation⁃Ⅱ，APACHE⁃Ⅱ）［7］将患者分为预后良好组和预后不良组，预后良好组（APACHE⁃Ⅱ＜30 分）72 例，预后不良组（APACHE⁃Ⅱ≥30 分）30 例。本研究经院医学伦理委员会批准通过。

纳入标准：①患者年龄范围44～77 岁；②患者均符合《临床疾病诊断与疗效判断标准》中急性心肌梗死诊断标准［8］；③近期未服用过抗凝药物；④患者及家属同意并签署知情同意书。

排除标准：①心力衰竭病史患者；②精神障碍患者；③伴有恶性肿瘤患者；④肝肾功能异常患者；⑤近1 年内有胸部手术史患者。

1.2 方法

一般资料收集：统计患者年龄、性别、身体质量指数（Body Mass Index，BMI）、合并高血压、合并糖尿病、合并高脂血症、吸烟史、甘油三酯（Triglyc⁃eride，TG）、总胆固醇（Total cholesterol，TC）、左室射血分数（Left ventricular ejection fraction，LVEF）百分比、高密度脂蛋白胆固醇（High density lipoprotein cholesterol，HDL⁃c）、低密度脂蛋白胆固醇（Low den⁃sity lipoprotein cholesterol，LDL⁃c）、血运重建、收缩压、舒张压、前白蛋白（prealbumin，PA）、既往心绞痛、合并（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）、早发冠心病、合并自身免疫疾病等。

入院次日早晨7 点抽取5 mL 静脉血，离心（3 000 r/min，10 min，离心半径10 cm）后收集血清，检测cTnl、CK⁃MB 水平，所用仪器为i1000SR型全自动化学发光分析仪（美国雅培公司）。

患者入院12 h 内及PCI 术后3 天分别采集患者静脉血，血清获取方式与上述过程一致。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）检测lncRNA p21水平。具体方法如下：按照RNA 提取试剂盒（北京索莱宝科技有限公司）说明提取总RNA，随后检测RNA 浓度。依照日本TAKARA 公司提供的反转录试剂盒说明书进行反转录，获取cDNA。使用美国ABI 公司生产的7300 型实时荧光定量PCR 仪扩增lncRNA p21，以GAPDH为内参。引物由上海生工合成。反应条件：95℃，3 min；95℃，30 s；61℃，30 s；72℃，40 s；lncRNA p21扩增进行38 个循环。lncRNA p21/GAPDH（lncRNA p21相对表达量）用2⁃ΔΔCT法计算。

1.3 APACHE⁃Ⅱ评分规则［7］

APACHE⁃Ⅱ评分由急性生理学评分（acute physiology score，APS）、年龄评分以及慢性健康评分3 部分组成，三部分之和为最终得分。最高分为71 分，分值越高表示病情越重，预后效果越差。

1.4 统计学方法

采用统计学软件SPSS 25.0 分析整理数据，计量资料采用（）表示，符合正态分布的两两比较行t检验；计数资料采用n（%）表示，行χ2检验；多因素采用Logistic 回归模型；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较

两组患者性别、BMI、合并高血压、合并糖尿病、合并高脂血症、吸烟史、TG、TC、LVEF 百分比、HDL⁃c、LDL⁃c、血运重建、收缩压、舒张压、PA、既往心绞痛比较，差异无统计学意义（P＞0.05），两组患者年龄、合并COPD、早发冠心病、合并自身免疫疾病比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组一般资料对比［（），n（%）］Table 1 Comparison of the two groups of general data［（），n（%）］

表1 两组一般资料对比［（），n（%）］Table 1 Comparison of the two groups of general data［（），n（%）］

2.2 两组入院时cTnl、CK⁃MB 水平比较

预后良好组入院时cTnl、CK⁃MB 水平均低于预后不良组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组入院时cTnl、CK⁃MB 水平对比（）Table 2 cTnl and CK⁃MB levels between the two groups（）

表2 两组入院时cTnl、CK⁃MB 水平对比（）Table 2 cTnl and CK⁃MB levels between the two groups（）

2.3 两组治疗前后血清lncRNA p21 表达水平比较

治疗前预后良好组lncRNA p21表达水平高于预后不良组，治疗后两组lncRNA p21表达水平升高且预后良好组高于预后不良组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 两组治疗前后血清lncRNA p21 表达情况比较（）Table 3 Comparison of serum lncRNA p21 expression between the two groups before and after treatment（）

表3 两组治疗前后血清lncRNA p21 表达情况比较（）Table 3 Comparison of serum lncRNA p21 expression between the two groups before and after treatment（）

注：与同组治疗前比较，aP＜0.05。

2.4 多因素分析结果

将年龄（＞60 岁赋值1、≤60 岁赋值0）、是否合并肺源性心脏病（合并肺源性心脏病赋值1，不合并肺源性心脏病赋值0）、是否合并自身免疫疾病（合并自身免疫疾病赋值1，不合并自身免疫疾病赋值0）、是否早发冠心病（早发冠心病赋值1。非早发冠心病赋值0），lncRNA p21/GAPDH（＞0.60 赋值0，≤0.059 赋值1）、cTnl（＞5.00 赋值1，≤5.00 赋值0）、CK⁃MB（＞60.00 赋值1，≤60.00 赋值0）水平作为自变量，急性心肌梗死患者预后是否良好作为因变量（预后不良赋值1，预后良好赋值0），进行Logistic 回归分析，结果显示：高水平lncRNA p21/GAPDH表达是PCI 治疗急性心肌梗死患者预后的保护因素，预后＞60 岁、合并COPD、早发冠心病、合并自身免疫疾病以及高水平CK⁃MB 是PCI 治疗急性心肌梗死患者预后的危险因素（P＜0.05）。见表4。

表4 多因素分析结果Table 4 Results of the multivariate analysis

3 讨论

PCI 技术可有效改善急性心肌梗死患者生存期，但是其也有引发心肌缺血及心力衰竭的风险。有研究表明［9］，动脉粥样硬化患者的lncRNAp21呈现低表达。lncRNAp21也可以通过调节相关基因及蛋白表达来发挥调控心功能的作用。

COPD 患者常合并有肺部炎症，可增加冠脉病变的发生风险。有研究指出［10］，肺部感染患者炎症反应的加剧会增加冠脉斑块破裂的几率，此外，该类患者血氧水平低，易出现左心功能下降，不利于患者预后。一项回顾性研究发现［11］，合并COPD 的冠心病患者3 年死亡率高达21%。本研究结果显示：预后良好组患者合并COPD、早发冠心病、合并自身免疫疾病百分比显著低于预后不良组。分析原因如下：COPD、冠心病与急性心肌梗死可相互作用，导致患者的病情加重。合并有COPD 患者存在慢性缺氧及反复感染的情况，其心肌收缩力下降。合并有冠心病的患者左心功能异常，增加了其左心室的厚度，促进左心室重构，对患者预后造成影响。

合并有自身免疫性疾病的患者机体内免疫复合物介导血管损害，造成内皮细胞坏死、冠状动脉炎，促进冠状动脉内血栓形成，这也是患者PCI 术后预后不良的发生机制［12］。本研究未发现合并心绞痛病史患者的预后较差，可能是心绞痛患者长期服用抗凝、稳定斑块等治疗药物。本研究也发现，早发冠心病的AMI 患者PCI 术后死亡的风险更高，分析是因为该类患者冠脉已有病理基础，增加了介入治疗预后不良的风险。

PCI 术后心肌细胞损伤是患者不良预后的危险因素。cTnI、CK⁃MB 是常用的心肌损伤指标，其水平与心肌受损程度呈正相关［13］。本研究结果显示：预后良好组入院时cTnl、CK⁃MB 水平显著低于预后不良组。cTnI、CK⁃MB 水平升高说明心肌细胞膜通透性增加，心肌受损程度增大，增加了心律失常、休克或心力衰竭等合并症的发生率。

本研究结果显示：治疗前预后良好组lncRNA p21表达水平高于预后不良组，治疗后两组lncRNA p21表达水平升高且预后良好组高于预后不良组。提示血清lncRNAp21表达增高是预后保护因素。有研究证明［14］，在氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞损伤模型、心肌缺氧损伤模型中，LncRNA⁃p21的表达水平均明显降低，降低LncRNA⁃p21水平能够促进机体炎症反应、氧化应激反应。在心肌细胞和内皮细胞中，LncRNA⁃p21低表达会加重心肌细胞及内皮细胞受损程度，而内皮细胞损伤在冠脉疾病的发生发展中具有重要作用，其可能加重冠脉狭窄，不利于患者预后。

本研究Logistic 回归分析结果显示：年龄、合并COPD、早发冠心病、合并自身免疫疾病、lncRNAp21/GAPDH 以及CK⁃MB 水平均是PCI 治疗急性心肌梗死患者预后的影响因素。提示临床需要对具有上述影响因素的患者进行重点关注，以期改善患者预后。

综上所述，LncRNA⁃p21低表达可以加重心肌细胞及内皮细胞受损程度，内皮细胞损伤可能加重冠脉狭窄，不利于急性心肌梗死患者预后，血清高水平lncRNA p21表达水平是PCI 治疗急性心肌梗死预后的保护因素，lncRNAp21有望成为评估AMI 病情及预后的标志物。