孙 爽,赵青平,张嘉娇,韩灿宇,余世锋,童 超
(1.南阳师范学院生命科学与农业工程学院,南阳 473000;2.河南健羊牧业有限公司,南阳 473000;3.河南农业大学动物医学院,郑州 450000)
同期发情技术可实现奶山羊怀孕、产羔、泌乳的规范化集中管理,降低养殖成本、提高繁殖效率,满足畜牧业发展需求[1-3]。同期发情常用的药物包括孕酮、卵泡刺激素(FSH)等[4-5]。孕酮由卵巢黄体细胞分泌,可抑制卵泡发育、维持卵巢黄体的生物活性[6]。在奶山羊繁殖生产中,常用阴道海绵栓塞法进行孕酮处理。将孕酮海绵栓塞入母羊阴道,孕酮可缓慢释放,使卵巢进入黄体期暂停卵泡发育。放置一定时间后撤出孕酮栓,可使原本受抑制的卵泡集中发育,促使母畜集中发情并排卵[7]。
孕酮栓的长期放置可损伤山羊阴道内环境,引发阴道炎,典型特征为撤栓时栓上有血迹、化脓性阴道分泌物或大量阴道白细胞[8]。阴道炎是阻碍生殖健康的重要疾病,主要由阴道受损或继发感染而引起,可导致生殖道菌群紊乱,严重时继发盆腔、子宫等处的炎症感染,降低繁殖性能[9]。孕酮栓放置时间过长,还可增加养殖的时间成本与人力成本,最终造成养殖场的经济损失[10]。
为探究一种同期发情效果好,副作用少的处理方案,本研究将336 只山羊分为4 组,分别放置阴道孕酮栓8、10、12、14 d进行同期发情处理。通过比较不同阴道栓放置时间对奶山羊繁殖性能的影响,为奶山羊产业的高质量发展提供理论参考。
本试验共选用336 只位于河南省南阳市西峡县健羊牧业的2~4岁、未患有生殖炎症、同质性好的健康雌性奶山羊,于2019 年9 月中旬开始对试验羊只进行同期发情处理,试验期间采用半舍饲半放牧管理方式,日粮由精饲料、苜蓿干草和全株青贮玉米组成,每日定量饲喂,自由饮水。每日机器挤奶2次。
孕酮海绵栓与放栓枪,购自美国Pharmacia& Upjohn 公司;卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH),购自宁波三生生物科技股份有限公司。
将336 只奶山羊分为A、B、C、D 四组,每组84 只。各组试验羊放置阴道孕酮海绵栓的时间不同,其中A组放置8 d、B组放置10 d、C组放置12 d、D组放置14 d。各组羊在撤栓前12 h肌内注射25 IU FSH,撤栓时再次注射25 IU FSH。具体操作流程如下:将羊只保定,使其自然站立;将孕酮栓装入放栓枪内,在放栓枪顶端醮取加有红霉素的甘油润滑剂,将放栓枪缓缓插入母羊阴道直至前端完全没入,随后按压放栓枪末端将孕酮栓打入阴道深处。放置完成后孕酮海绵栓尾部的棉线露在母羊阴道外。待放栓结束时,将棉线拉出即可撤栓。
撤栓时,根据Martins 等[8]所拟定的标准判断母羊是否患有阴道炎。观察从试验羊只体内撤出的海绵栓,健康母羊阴道内取出的孕酮栓应形态完整、较湿润、无异常分泌物附着;若撤出的海绵栓存在红色或棕褐色血迹,或粘有混浊、黏着性或豆腐渣样的分泌物,即可判断为生殖道炎症。阴道炎患病率=撤栓时发现阴道炎的羊只数/接受同期发情处理的羊只总数×100%。
使用甲哨唑氯化钠注射液(安徽国森药业有限公司)对患阴道炎的山羊进行阴道灌洗,每日灌洗2 次,直至痊愈。
在撤栓后0~72 h,每隔12 小时进行发情检测。试情时,首先将所有母羊成排保定好,牵拉公羊缓慢地在母羊身后走过,逐一对母羊试情。当母羊出现频繁摇尾、暴露阴门、接受爬跨且静止不动的行为时,即可判断为发情。
发情率=撤栓后0~72 h表现出发情行为的母羊数/接受同期发情处理的总羊只数×100%;发情起始时间=自CIDR栓撤栓时至羊只发情开始的时间;发情持续时间=撤拴后羊只表现发情行为所持续的时间;返情率=指配种后一定时间内表现发情的母羊只数占配种母羊总只数的百分比。
撤栓后,如果母羊初次发情在早上,则当天下午进行第1 次人工授精,第2 天早上进行第2 次人工授精;如果母羊初次发情在下午,则第2天早上进行第1次人工授精,下午进行第2 次人工授精。采用假阴道法采集种公羊精液,所采集的原精中,精子活力>85%,精子密度>2×109/mL,精子畸形率<5%的精液,无异味、无异常颜色和污染物方可用于人工授精。使用添加了青霉素和链霉素的脱脂鲜羊奶对原精进行3 倍稀释。所有发情羊只均采用子宫颈口输精的方法进行2次输精。
使用SPSS 26.0 软件分析试验数据。百分率数据使用卡方检验进行分析。除百分率外的所有数据均采用单因素方差分析(One-way ANOVA)进行显著性检验,结果以平均值±标准差表示。
由表1 可知,放栓14 d 的D 组羊阴道炎患病率显著高于放栓8 d 的A 组(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05)。
表1 不同内置孕酮栓时间对试验羊阴道炎患病率的影响
由表2 可知,放栓8 d 的A 组母羊的发情率显著低于放置12 d 的C 组羊和14 d 的D 组羊(P<0.05)。发情起始时间A组羊显著高于B、C、D组(P<0.05),其余各组间均差异不显著(P>0.05);试验羊只的发情持续时间各组间均不存在显著差异(P>0.05)。
表2 不同内置孕酮栓时间对试验羊只发情反应的影响
如表3所示,C组羊的受胎率显著高于A组羊和B组羊(P<0.05),与D组差异不显著(P>0.05)。C组羊的返情率显著低于A组羊和B组羊(P<0.05),与D组差异不显著(P>0.05);A组羊返情率显著高于C组和D组(P<0.05),与B组差异不显著(P>0.05)。各组试验羊的流产率、产羔率、公羔率、母羔率间均不存在显著差异(P>0.05)。
表3 不同内置孕酮栓时间对试验羊只产羔性能的影响
如表4 所示,C 组母羊分娩的羔羊断奶重显著高于A组(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05);各组试验羊所产羔羊的出生重和断奶成活率均不存在显著差异(P>0.05)。
表4 不同内置孕酮栓时间对羔羊生长发育的影响
本研究中,放栓8、10、12、14 d 的试验羊阴道炎患病率分别为0%、1.19%、2.38%、7.14%,放栓14 d 的试验羊阴道炎患病率显著高于放栓8 d 的羊。作为物理性刺激,孕酮栓放置时间过长会导致母畜阴道内生物菌群发生改变,易导致葡萄球菌的感染[10]。此外,同期发情处理后母畜体内的生殖激素含量发生了较大变化,使生殖道更易受病原微生物的侵害,导致阴道炎患病率的增加[11]。本研究结果表明,试验羊的阴道炎患病率随放栓时间的延长呈上升趋势,并且放栓时间过长会增加养殖成本,因此在不影响繁殖性能的基础上,放栓时间更短的同期发情方案更具有应用价值[12]。
在本试验中放栓8 d的A组羊发情率仅为88.10%,显著低于C 组(100.00%)和D 组(96.43%)。山羊完整的发情周期为(20±1)d,推测孕酮栓放置时间过短无法使山羊形成一个较完整的黄体期,从而造成发情率的下降。放栓8 d 的A 组羊平均在撤栓后41.53 h 开始发情,发情起始时间显著大于其他各组。这可能是由于部分放栓时间较短的母羊撤栓后体内仍有一定量的孕酮残留,从而抑制了雌激素的分泌,导致发情率降低和发情起始时间推迟。前人研究发现,短期放栓的同期发情方案撤栓时母畜体内的孕酮浓度较高,致使发情时间推迟,这一结果与本研究结果相似[13]。本试验羊只平均发情持续时间均在37 h 以上,但各组间差异不显著,说明阴道栓的放置时间对发情集中度不造成影响。
受胎率是反映母畜繁殖性能的重要指标[2]。在本试验中,放栓12 d 的C 组羊受胎率最高(89.29%),D 组羊次之(80.95%),且两组羊的受胎率均显著高于放栓8 d的A 组(63.10%)。发情山羊接受人工授精处理后,成功受孕的山羊一般不再返情;而部分未孕山羊在下一情期,表现发情并排卵。本试验对返情山羊及时补配并统计返情率,结果表明,放栓12 d的C组羊的返情率(4.76%)最低;放栓8 d 的A 组羊返情率(20.27%)最高。这是由于A组受胎率低,返情羊只最多。此外,各组都存在少数山羊未受胎也不返情的现象,这可能是由于本试验时间在繁殖季节的中后期,少数未受孕的山羊在逐渐进入非繁殖季节后不表现发情,最终导致了当年的空怀。
在本试验中,各试验组羊的繁殖力良好,产羔率均可达到161%以上。此外,试验羊的产羔率、公羔率、母羔率、出生重,以及断奶时羔羊的成活率各组间均无显著差异(P>0.05)。
羔羊断奶重与断奶后的生产性能呈正相关,断奶体重大的动物通常抗病能力强、体质好。在本研究中,A 组羊所产羔羊90 d 断奶时的体重(20.05 kg)显著低于C 组(21.24 kg),说明C 组母羊所产羔羊具有更优的体况。
相较而言,放栓12 d 同期发情处理组奶山羊的发情率、受胎率最高,且阴道炎的发病率未见显著增加,具有最优的繁殖性能;该方案比传统的放栓14 d 的同期发情方案更为节省时间和成本,具有更高的应用价值。该方案可在山羊繁殖生产中广泛应用。