麸炒六神曲炮制工艺及质量标准研究

赵志君,杨莹莹,张 璐*,李晓燕,张 娇,赵静宇,吕鼎豪,闫舒雅

(1山西省药品审评中心,太原 030006;2山西省药品检查中心;*通讯作者,E-mail：735938703@qq.com)

六神曲是一味传统的中药曲剂,由辣蓼、青蒿、苦杏仁、赤小豆和苍耳草等药加工后与面粉或麸皮混和,经发酵而成。现行质量标准收载于《卫生部药品标准中药成方制剂第十九册》[1]、《山西省中药材标准》(1987年版)[2],具有健脾和胃、消食调中的功效,用于脾胃虚弱、饮食停滞、胸痞腹胀、呕吐泻痢、小儿积食[3,4],临床应用广泛。

用麦麸炒六神曲和焦神曲多用于健脾和胃、消积化食,经麸炒和炒焦后消化酶降低,助消化止泻作用增强[5]。王秋红等[6]进行六神曲抗菌作用研究,表明麸炒六神曲有较强的抑菌和杀菌能力,可能和缓解细菌引起的腹泻相关。麸炒品和炒焦品能增强胃动力功能,增强和胃之功效,且炒神曲和焦神曲中不含或少含草酸钙,可减少体内结石的产生,起到增效减副之功[7,8]。

神曲的炮制方法多为炒制[9-14]。传统炮制方法常为麸炒六神曲[15],麸炒六神曲为山西省常用中药品种,麸炒工艺[16,17]临床应用广泛,用药历史悠久[18,19],大山楂丸[20]、人生再造丸、小儿百寿丸[21]等中成药中均含有该饮片。分析各省中药材标准和炮制规范,发现各地的神曲制备工艺均存在一定差异,各省地方炮制标准也不尽相同,直接使用他省标准也不现实。《山西省中药材标准》(1987年版)收录了六神曲、焦六神曲、炒六神曲,但没有收录麸炒六神曲。对山西省麸炒六神曲的标准研究未见有文章报道,为有效控制山西省麸炒六神曲的质量,本研究根据《中国药典》2020年版对炮制饮片的检查要求,开展了麸炒六神曲质量标准的研究,为制定山西省麸炒六神曲饮片的质量标准提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验样品 项目组共收集15批生六神曲,分别来自山西华康药业、山西天生制药和山西国泰中药股份有限公司3家企业,具体信息见表1。按照部颁标准中药成方制剂第十九册“六神曲”项下的要求进行检验,均符合要求,麸炒后的六神曲经过原省药品检验所专家李民生鉴定符合规定。

表1 饮片来源及批号

1.1.2 实验仪器 FA3204B电子天平(上海精科天美科学仪器有限公司),多功能暗箱式紫外分析仪(北京赛百奥科技有限公司),BH2-Olympus显微镜(上海通灏光电科技有限公司),CYQ-900自控温燃气炒药机、S-49型旋振筛。

1.1.3 实验试剂 苦杏仁苷对照品(批号：110820-202109)、苦杏仁对照药材(批号：121554-201204)、青蒿素对照品(批号：100202-202107)、青蒿对照药材(批号：121016-202007)、赤小豆对照药材(批号：121725-202103)均购自中国食品药品检定研究院;甘油(批号：199202,浙江省兰溪县化工总厂);甲酸、甲醇、无水乙醇、石油醚、水合氯醛(分析纯,天津市科密欧化学试剂有限公司);冰醋酸(分析纯,无锡市晶科化工有限公司);甲酸(批号：20140611,天津市兴复科技发展有限公司);二氯甲烷(批号：20090828,天津市化学试剂三厂)。硅胶G板50 mm×100 mm(批号：20150302,青岛海洋化工厂分厂),硅胶G板100 mm×200 mm(批号：20141004,烟台江友硅胶开发有限公司),硅胶G板100 mm×200 mm(批号：20150302,青岛海洋化工厂分厂)。

1.2 实验方法

1.2.1 炮制工艺因素考察 分别称取同一批大小均匀的生六神曲(华康产,批号HZ20200507)3份,炒制温度分别为文火110 ℃、中火130 ℃、大火150 ℃,炒制12 min,麸皮用量10%,以性状、浸出物为评价指标,考察不同炒制温度对麸炒六神曲的影响。

分别称取同一批大小均匀的生六神曲(华康、批号HZ20200507)6份,炒制温度130 ℃,麸皮用量10%,分别在炒制8,10,12,14,16,18 min时取样,以性状、浸出物为评价指标,考察不同炒制时间对麸炒六神曲的影响。

分别称取同一批大小均匀的生六神曲(华康,批号HZ20200507)2份,炒制温度130 ℃,炒制12 min,麸皮用量分别为10%和15%,以性状、浸出物为评价指标,考察不同麸皮用量对麸炒六神曲的影响。

1.2.2 性状观察 通过考察15批麸炒六神曲的形状、表面颜色、气味和质地确定“麸炒六神曲”的性状。

1.2.3 显微鉴别 取各批次药材适量置于载玻片上,分别采用《中国药典》2020年版四部通则2001-药材显微制片(粉末制片法)进行制片,之后置于显微镜下观察。对处方中的赤小豆、苦杏仁、麦麸进行显微鉴别。

1.2.4 水分限度制定 按照《中国药典》2020版四部通则0832第二法,测定15批次“麸炒六神曲”的水分,拟定限度范围。

1.2.5 总灰分限度制定 按照《中国药典》2020版四部通则2302,测定15批次麸炒六神曲的总灰分,拟定限度范围。

1.2.6 酸不溶性灰分限度制定 按照《中国药典》2020版四部通则2302,测定15批次麸炒六神曲的酸不溶性灰分,拟定限度范围。

1.2.7 浸出物试验条件考察 按照《中国药典》2020版醇溶性浸出物测定法(通则2201)项下的冷浸法,测定15批次麸炒六神曲的浸出物,拟定限度范围。

2 结果

2.1 炮制工艺

选择炒制时间12 min,麸皮加入量10%,炒制温度分别为110,130,150 ℃时,得到的浸出物结果分别为22.02%,23.25%,21.93%,不同温度炒制样品的性状结果见图1,随着温度升高浸出物呈先升高后降低的趋势。综合性状和浸出物的结果,选择炮制温度为130 ℃为最佳温度。

图1 不同温度麸炒样品Figure 1 Bran-fried samples under different stir frying temperature

选择麸皮加入量10%,炒制温度130 ℃,炒制时间分别为0,8,10,12,14,16,18 min时,得到的浸出物结果分别为25.04%,22.54%,23.22%,23.26%,23.86%,22.59%,21.79%,不同炒制时间样品的性状结果见图2,结果表明,随着炒制时间的延长,浸出物含量呈先上升再下降的趋势。综合性状和浸出物的结果,选择炒制时间12 min为最佳。

图2 不同时间麸炒样品Figure 2 Bran-fried samples under different stir frying time

选择炒制时间12 min,炒制温度130 ℃,麸皮加入量10%和15%,浸出物结果为23.25%和23.29%,不同麸皮加入量样品的性状结果见图3,由结果可见,不同麸皮加入量样品的性状和浸出物测定结果差异不明显。考虑成本问题,最后选择麸皮加入量为10%。

图3 不同麸皮加入量炒制样品Figure 3 Bran-fried samples with different addition amounts of bran

2.2 性状

用优选出的最佳工艺对山西省企业生产的15批生六神曲进行炮制,性状如下：立方形小块或圆柱条形段,表面棕黄色,质坚脆,有麦麸香气;易断,断面不平整,类白色,可见未被粉碎的褐色残渣及发酵后的空隙(见图4);具陈腐气,味苦;以身干、陈久、无虫蛀、杂质少者为佳。

2.3 显微鉴别结果

对15批麸炒六神曲进行显微鉴别,结果显示样品粉末黄白色或黄棕色;处方中麦麸的果皮表皮细胞紧密排列呈不规则片状,单细胞非腺毛散生(见图5);淀粉粒多单粒,呈球形,脐点点状,层纹明显;苦杏仁和赤小豆的石细胞黄色或白色,单个散在或数个相连,胞腔黑色;赤小豆的种皮栅状细胞胞腔含淡红棕色物,光辉带明显。

1-4.石细胞;5.淀粉粒;6.种皮栅状细胞;7.非腺毛;8.果皮表皮细胞图5 麸炒六神曲显微鉴别图Figure 5 Microscopic identification of bran-fried Massa Medicata Fermentata

2.4 水分测定

15个批次麸炒六神曲的水分含量波动范围在2.3%～7.5%之间(见表2),均值为4.55%,根据测定结果,按照最高值上浮20%计算,水分为9.0%。但考虑到不同时间、不同地点空气湿度的影响,并参考药典及相关地方标准中水分的限度(不得过10.0%),暂定本品水分不得过10.0%。

表2 麸炒六神曲水分、总灰分、酸不溶灰分、浸出物测定结果

2.5 总灰分测定

15批次六神曲(麸炒)的总灰分波动范围在3.2%～4.1%之间(见表2),均值为3.69%,根据测定结果的最高值上浮20%计算,总灰分为4.9%。参考相关地方标准的限度,因此暂定总灰分的限度为不得过5.0%。

2.6 酸不溶性灰分测定

15批次六神曲(麸炒)的酸不溶性灰分波动范围在0.01%～0.06%(见表2),平均值为0.03%,远低于其他省市地方标准规定的限度范围(不超过2.0%),因此暂定酸不溶灰分不得过2.0%。

2.7 浸出物测定

本研究采用50%乙醇作为提取溶剂,对15批“麸炒六神曲”进行浸出物(冷浸法)测定,结果在21.67%～24.6%之间(见表2),均值为22.97%,根据测定结果的最低值下浮20%计算,浸出物为17.33%。暂定浸出物限度不得少于17.0%。

3 讨论

通过测定山西省3家企业15批炮制后的麸炒六神曲样品,得到水分、灰分、酸不溶灰分、浸出物实际测定的范围值,通过搜集、整理了国内六神曲相关的现行标准,比较了部颁标准和部分地方标准的内容,通过查阅炮制及标准的相关文献资料[22-24],拟定了我省的麸炒六神曲质量标准。通过试验研究发现六神曲处方中赤小豆、苦杏仁和青蒿素的含量很低,难以用薄层色谱法进行鉴别,因此本研究标准中不加入薄层鉴别项。因为15批次样品的测定结果不能完全代表所有样品的质量,因此后续需要继续积累数据,制定更为合理的标准限度。