海南地区3 ～14 岁人群乳酸脱氢酶参考区间分析

赵艳宏 傅 琳 刘 彪 肖美芳

（海南省妇女儿童医学中心检验科，海南 海口 570100）

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）是糖酵解反应的末端酶，催化丙酮酸与乳酸间的相互转换[1]。因亚基组成的不同，LDH以5种同工酶（LDH1、LDH2、LDH3、LDH4、LDH5）的形式广泛存在于心脏、肝脏、肾脏、横纹肌等人体器官或组织中[2]。LDH在生物体能量代谢[3]与微环境调控[4]中有重要作用，临床上常被作为心肌梗死、肝脏疾病（急性肝炎、肝硬化）、血液病（白血病、溶血性贫血）、骨骼肌损伤、进行性肌萎缩等疾病[5-6]和肿瘤免疫代谢状态[7]的辅助诊断指标。在我国，LDH参考区间的建立主要经历了2个阶段：1）第1阶段，引用英国生化学家King于1959年基于比色法、100例17～85岁健康成人样本建立的血清LDH参考区间，为225～540 U/L[8]，这一参考区间直至2000年仍在采用[9]。2）第2阶段，随着我国检验医学的快速发展，一些实验室尝试应用改进的检测方法、先进的自动化仪器对LDH参考区间进行验证，发现225～540 U/L对于中国人群来说明显偏高，继而相继建立不同区域人群LDH参考区间[10]，目前采用较多的是109～245 U/L[11-13]。然而，目前建立的LDH参考区间仅适用于成人，临床仍缺乏低龄少年儿童的标准。少年儿童与成人之间，少年儿童不同年龄段、不同性别之间LDH的参考区间是否可通用，目前尚未见相关报道，这无疑会阻碍临床一线对少年儿童相关疾病的诊疗工作。为此，本研究拟通过对海南地区3～14岁人群进行大样本调查，分析该年龄段LDH的参考区间，以期为我国少年儿童LDH的临床应用提供参考，助力我国儿科医学的进步。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2020年12月—2021年9月海南省妇女儿童医学中心行健康体检的3～14岁少年儿童36 945名，其中男18 597名、女18 348名。纳入标准：健康、无基础疾病、适龄。排除标准：血清样本外观异常（溶血、黄疸、脂浊）。按年龄分为3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14岁共12个年龄段。本研究经海南省妇女儿童医学中心伦理委员会审批通过（HNWCMC伦审2023年第[92]号）。

1.2 样本采集及LDH测定

采用分离胶促凝管采集所有研究对象肘部静脉血2～3 mL，3 000×g离心10 min，分离血清。LDH试剂（乳酸底物法）和校准品均购自北京北检·新创源生物技术有限公司，检测仪器为BS-2000全自动生化分析仪（深圳迈瑞公司）。质控血清（批号1398UN & 1070UE）购自英国朗道公司。

1.3 统计学方法

采用SPSS 26.0软件进行统计分析。采用单样本Kolmogorov-Smirnov检验评估LDH数据的正态性。呈非正态分布的计量资料以中位数（M）[四分位数（P25～P75）]表示，不同年龄组间比较采用多个独立样本的Kruskal-Wallis秩和检验，各年龄段不同性别间的比较采用两独立样本的Wilcoxon秩和检验。采用百分位数法[第2.5百分位数（P2.5）～第97.5百分位数（P97.5）]建立3～14岁人群LDH的参考区间。少年儿童与成人参考区间的比较：假设成人LDH参考区间109～245 U/L为基于正态分布法求得，即成人-1.96s=109 U/L，成人+1.96s=245 U/L，成人LDH中位数的估值为177 U/L。采用单样本资料的Wilcoxon秩和检验进行比较。以P＜0.05为差异有统计学意义。不同年龄组间两两比较采用校正后的检验水准α'=0.05/[n×（n-1）/2]=0.000 76，即以P＜0.000 76为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄段和不同性别少年儿童血清LDH水平的比较

2.1.1 不同年龄段少年儿童血清LDH水平比较

不同年龄段少年儿童血清LDH水平差异有统计学意义（χ2=2 583.19，P＜0.001）。两两比较结果显示，除3～7岁相邻2个年龄段之间、4岁与6、7、8岁之间、5岁与7、8、9岁之间血清LDH水平差异无统计学意义外（P＞0.000 76），其他各年龄段之间血清LDH水平差异均有统计学意义（P＜0.000 76）。见表1。

表1 不同年龄段和不同性别少年儿童血清LDH水平比较

2.1.2 不同性别少年儿童血清LDH水平比较

3～5岁年龄段男性与女性之间血清LDH水平差异无统计学意义（P＞0.05）；6～14岁年龄段男性血清LDH水平高于女性（P＜0.05）。

2.2 3～14岁人群LDH参考区间

鉴于不同年龄段少年儿童LDH水平差异有统计学意义，6～14岁男性与女性之间LDH水平差异有统计学意义，因此需建立3～14岁少年儿童LDH参考区间。见表2。

表2 3～14岁人群LDH参考区间 U/L

2.3 少年儿童与成人LDH参考区间的比较

3～14岁人群总体的LDH参考区间为158～358 U/L，与成人（109～245 U/L）相比，差异有统计学意义（Z=-30.769，P＜0.001）。

3 讨论

通过对36 945例样本的检测，本研究总结了海南地区3～14岁人群LDH的医学参考区间。结果表明：现行的成人LDH参考区间不适用于3～14岁人群。在少年儿童时期，LDH水平会随年龄的增加呈现降低的趋势，不同年龄段、同一年龄段不同性别之间LDH差异均有统计学意义。作为对我国海南地区非成人群体LDH医学参考区间的首次报道，本研究结论有助于临床对LDH相关儿科疾病的辅助诊断，有助于启迪少儿发育过程中有关能量代谢的基础研究。

在对结果的分析中，本研究有了一些新的发现，3岁儿童的LDH水平除与4岁儿童差异无统计学意义（P＞0.000 76）外，与5～14岁的任一年龄段均存在差异（P＜0.000 76），与同处学龄前期的4岁、5岁形成鲜明对比。这提示与其他年龄相比，3岁儿童的LDH水平可能仍处于能量代谢机制的“上一阶段”，这需要结合新生儿（0～28 d）、婴幼儿（0～3岁）的LDH水平作出结论。其他一些发现还包括6～7岁时LDH水平的短暂跃升、6岁前不同性别间LDH水平差异无统计学意义（P＞0.05）、8岁后每个年龄段间LDH水平差异均有统计学意义（P＜0.000 76）。这些现象的背后，一定有其深层的生理学原因，可能还受到社会因素（入学、青春期等）的影响，需要更深入的探索。

本研究样本来源为海南地区3～14岁人群建立的LDH参考区间是否具有广泛的适用性，还需不同地区同类研究的验证。