血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白与白三烯B4联合预测支气管哮喘患儿预后的临床价值*

孙果，徐洋，陈雨华，邵思超

（江南大学附属儿童医院 1.检验科，2.儿呼吸内科，江苏 无锡 214023）

支气管哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，儿童是其主要易感人群之一。虽然哮喘症状可以通过药物治疗得到缓解，但是仍存在复发风险，长期的治疗和监测可以促进患儿病情恢复，保障患儿健康成长[1-2]。因此，寻找一种简单、可靠的生物学指标，用于预测哮喘患儿的预后，具有重要的临床意义。相关研究表明，炎症反应与患儿气道高反应性的发生、持续密切相关[3-4]。血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（eosinophil cationic protein，ECP）及白三烯B4（leukotriene B4，LTB4）是炎症反应的重要组成部分，已被证实与哮喘发病和病情严重程度密切相关[5-6]。研究表明，当哮喘患者受到呼吸气道刺激时，免疫细胞会聚集到气道周围，释放包括ECP 在内的多种炎症因子，导致气道炎症反应，而ECP 可诱导平滑肌细胞、气道上皮细胞等释放炎性介质，加重气道炎症[7-8]；LTB4 是一种与炎症反应有关的白三烯类物质，由响应炎性介质的白细胞产生，让白细胞活化并依附在内皮上，参与气道的炎症反应。且LTB4 能够诱导形成活性氧类，促进溶酶体中酶的释放，引起气道壁的肿胀、痉挛，促使黏液分泌增多，并出现一系列哮喘的临床表现，加重哮喘炎症反应，增加哮喘发作的风险[9-10]。因此，探究ECP 和LTB4 联合检测预测支气管哮喘患儿预后的临床价值，将有助于为儿科医师提供更有效的、综合性的评估工具，从而更好地指导儿童支气管哮喘的治疗和监测。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2020年12月—2022年12月江南大学附属儿童医院收治的支气管哮喘患儿80 例作为研究对象。其中，女童44 例，男童36 例；年龄3～12 岁，平均（6.21±1.50）岁；病程2～15 个月，平均（6.27±2.09）个月。纳入标准：①符合《儿童支气管哮喘诊断与防治指南（2016年版）》[11]的支气管哮喘的诊断标准；②年龄3～12 岁；③入院后各项检查资料、治疗资料及病情记录资料清晰、完整；④处于临床缓解期。排除标准：①先天性心、肺功能不全；②气管、支气管发育不良；③合并肺结核感染；④肝、肾功能指标检测结果异常；⑤依从性差，无法配合完成研究；⑥入组前3 个月使用激素、抗生素、免疫抑制类药物治疗。本研究通过医院医学伦理委员会审核批准，研究取得患儿监护人同意，并签订知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 临床资料收集收集并整理所有患儿的临床资料，包括性别、年龄、病程、父母哮喘史、家庭饲养宠物、过敏史、呼吸道反复感染史等。

1.2.2 治疗方案参考《儿童支气管哮喘诊断与防治指南（2016年版）》[11]中推荐的治疗方案，并结合患儿病情予以对症治疗。将2 mL 布地奈德混悬液（连云港正大天晴药业集团股份有限公司，规格：2 mL∶1 mg，国药准字：H20203063）加入3 mL 0.9%生理盐水中，雾化吸入治疗，每次雾化15 min 左右，2 次/d，维持治疗1 周。同时口服孟鲁司特钠咀嚼片（石家庄石药集团欧意药业有限公司，规格：5 mg，国药准字：H20203048）5 mg/次，1 次/d，维持治疗28 d 后检测肺功能指标，并维持口服孟鲁司特钠咀嚼片用于长期控制和预防哮喘发作。

1.2.3 肺功能指标检测 治疗28 d 后，采用QuarkPET3 型肺功能仪（意大利科时迈公司）检测患儿呼吸峰流量（peak expiratory flow，PEF）百分比和第1 秒用力呼气量占预计比值（forced expiratory volume in one second，FEV1）。

1.2.4 血清ECP、LTB4 检测入院时采集患儿外周空腹静脉血2 mL，3 000 r/min 高速离心12 min（离心半径13.5 cm），吸取上清液，采用酶联免疫吸附试验检测血清ECP、LTB4 水平。ECP 试剂盒购自上海雅吉生物科技有限公司，LTB4 试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。

1.2.5 儿童哮喘控制测试（childhood asthma control test,C-ACT）C-ACT 包括症状、胸闷和呼吸困难、运动能力、夜间症状、采用急救药物的频率5 个维度，分值总计27 分，20～23 分为部分控制、＜20 分为未控制、＞23 分为控制[12]。

1.2.6 预后分组治疗28 d 后，依据肺功能指标改善状况及C-ACT 结果将患儿分为病情控制良好组和控制不佳组。治疗28 d 后，C-ACT ≥ 20 分，肺功能指标恢复正常，停药后随访3 个月内无哮喘复发计入控制良好组，反之计入控制不佳组。

1.3 统计学方法

数据处理采用SPSS 19.0 统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较采用t检验；计数资料以构成比或率（%）表示，比较采用χ2检验。影响因素的分析采用多因素逐步Logistic 回归模型；绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 预后结局

80 例支气管哮喘患儿中控制不佳17 例，患儿病情控制良好且未见复发63 例。

2.2 两组患儿的临床资料比较

两组患儿的性别、年龄、病程、父母哮喘史、家庭饲养宠物、入院时PEF 及入院时FEV1比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。两组患儿的过敏史、呼吸道反复感染史占比及血清ECP、LTB4 水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）；控制不佳组过敏史、呼吸道反复感染史占比及血清ECP、LTB4 水平均高于控制良好组。见表1。

表1 两组患儿的临床资料比较

2.3 影响患儿支气管哮喘病情控制的多因素分析

表2 赋值表

表3 影响患儿支气管哮喘病情控制的多因素分析

2.4 血清ECP、LTB4对支气管哮喘患儿预后的预测效能

ROC 曲线分析结果显示，血清ECP、LTB4 单一及联合预测支气管哮喘患儿预后的敏感性分别为73.6%、77.1%和88.5%，特异性分别为80.3%、66.9%和76.4%，AUC 分别为0.786、0.743 和0.834。见表4和图1。

图1 血清ECP、LTB4预测支气管哮喘患儿预后的ROC曲线

表4 血清ECP、LTB4对支气管哮喘患儿预后的预测效能分析

3 讨论

支气管哮喘是儿童常见的呼吸道疾病，诱发因素较多且发生机制复杂，随着病情反复可诱导气道高反应性、气道黏液分泌增加等生理特征，加重呼吸功能障碍，甚至对呼吸系统造成不可逆的损伤，严重影响患儿的身体健康[13-14]。现代医学研究表明，哮喘发作时气道的炎症反应会引起气道壁的肿胀、收缩和黏液分泌，导致呼吸道的狭窄和通气障碍，而气道狭窄导致空气在呼吸道流动受阻，同时氧气的供应也受到影响，这可能是导致哮喘反复的原因[15-16]。此外，研究发现，哮喘患者的气道中常常存在过度敏感的免疫系统，这些免疫细胞和细胞因子产生的变化会导致炎症反应和气道肌肉的收缩，进而引起哮喘症状[17-18]。目前，气道炎症控制、放松气道平滑肌、支持性治疗、呼吸道物理治疗等是针对支气管哮喘患儿的主要治疗方案，虽有助于缓解支气管哮喘患儿的临床症状，但由于病因仍然存在，部分患儿的病情迁延难愈或反复发作，成为困扰临床医师的难题。因此，正确评估支气管哮喘患儿预后具有重要的临床意义。

研究发现部分炎症因子在哮喘发作时表达水平明显升高，且对气道痉挛和咳嗽反射的发生具有增强作用，可能是诱导患儿支气管哮喘发作的重要机制[19-20]。ECP 作为一种由嗜酸性粒细胞分泌的蛋白质，是哮喘发作时的早期指标之一，其具有基于炎症反应的敏感性，可以反映炎症活性和病情程度。RYDELL 等[21]在验证气道炎症与哮喘的关联性研究中证实，ECP 辅助诊断儿童哮喘的敏感性和特异性分别为70.3%和81.4%，表明患儿哮喘的发生可能是引起ECP 表达水平变化的诱因。与ECP 类似，LTB4 是一种由炎性介质产生的白三烯类物质，可以增强咳嗽反射和引起气道痉挛，同时还能刺激黏膜分泌和炎症细胞浸润。郑华月等[22]研究表明，LTB4 表达水平升高是诱导儿童支气管哮喘的独立危险因素。因此，笔者认为血清ECP 和LTB4 可能是预测支气管哮喘患儿病情严重程度或预后的潜在生物学标志物。本研究结果显示，控制不佳组患儿血清ECP、LTB4 表达水平高于控制良好组，且多因素逐步Logistic 回归分析结果显示血清ECP、LTB4 水平升高均是患儿支气管哮喘病情控制不佳的危险因素，提示血清ECP、LTB4 表达水平与患儿病情进展及预后密切相关。研究分析，支气管哮喘是一种免疫介导的疾病，而ECP 是嗜酸性粒细胞释放的一种细胞因子，对免疫细胞的活化、趋化和增殖等过程都具有重要作用，ECP可通过直接杀死细菌、病毒等感染性病原体，参与免疫球蛋白E 介导的过敏反应及调节其他细胞的免疫活性等方式，参与支气管哮喘炎症的发生和发展[23]。其次，ECP 可以诱导气道上皮细胞、平滑肌细胞和基质细胞释放多种炎症介质，如白细胞介素-5、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α、转化生长因子-β 等，从而加重气道炎症和收缩性细胞的作用，而这些炎性介质可引起气道壁的肿胀、痉挛和黏液分泌增多等哮喘的临床表现，可能是ECP 影响支气管哮喘患儿预后的原因[24]；LTB4 作为一种由嗜中性粒细胞、巨噬细胞、单核细胞等炎症细胞产生的白细胞趋化因子，能够引起气道平滑肌收缩和黏液分泌增加，导致气道狭窄和阻塞，从而诱发哮喘症状[25]。当气道受到刺激时，炎性介质会促使嗜中性粒细胞等炎症细胞聚集在气道周围，释放出LTB4 等趋化因子。这些趋化因子会吸引更多的炎症细胞涌入气道，进一步释放出大量的LTB4，从而形成一个恶性循环。LTB4 作为一种强效的趋化因子，会诱导更多的炎症细胞涌入气道，促进气道炎症的持续和加重，最终导致气道狭窄和阻塞。此外，LTB4 还能够刺激气道平滑肌收缩和黏液分泌增加，进一步加重哮喘症状，这可能是LTB4 影响支气管哮喘患儿预后的原因。本研究ROC 曲线分析结果显示，血清ECP、LTB4单一及联合预测支气管哮喘患儿预后的效能良好，进一步证实血清ECP、LTB4 可用于预测支气管哮喘患儿的预后。但本研究采用单中心随机样本研究，纳入研究的样本量有限，结论可能与临床实际存在偏差，后续研究中仍需完善大样本、多中心研究证实本研究结论；此外，ECP、LTB4 与支气管哮喘患儿发病及预后的病理机制探析较少，后续研究仍需不断完善。