血清SCCA、HE4表达与宫颈癌MRI征象的相关性

王成双 王华杰 李婵婵 郭成

(青岛大学附属青岛市中心医院 1妇瘤二科,山东 青岛 266042;2妇科;3分子影像科)

宫颈癌是较为常见的女性生殖系统肿瘤,可发生淋巴结转移,严重影响患者生存情况〔1〕。及早诊断、及时给予宫颈癌患者适当治疗,是提高患者生存率的关键。随着影像学发展,磁共振成像(MRI)逐渐用于宫颈癌诊断,其可辅助评估患者预后,判定淋巴结转移、宫旁浸润情况〔2〕。另外,鳞状细胞癌抗原(SCCA)在宫颈癌患者血清中上调,具有辅助诊断宫颈癌的潜在价值〔3〕;人附睾上皮分泌蛋白(HE)4在宫颈癌患者血清中呈高水平,有利于诊断宫颈癌、评估患者病情及预后〔4〕。但血清SCCA、HE4水平与宫颈癌患者MRI征象的关系鲜有研究。本研究拟分析两者与MRI征象的关系。

1 资料与方法

1.1临床资料 选取2019年6月至2020年1月青岛大学附属青岛市中心医院宫颈癌患者55例为宫颈癌组,其中年龄62～74岁,平均(68.00±3.06)岁;另选取同期体检健康女性55例为健康组,其中年龄60～73岁,平均(66.50±3.32)岁。两组年龄差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈癌根据《宫颈癌及癌前病变规范化诊疗指南》相关宫颈癌判定标准进行诊断〔5〕。纳入标准:(1)患者均符合宫颈癌有关诊断标准,经病理检查确诊为宫颈癌;(2)患者病历检查资料均完整,均有清晰的MRI征象;(3)年龄60～74岁;(4)患者术前均未行放化疗。排除标准:(1)其他免疫系统疾病、感染性疾病、恶性肿瘤者;(2)合并严重肝、肾功能障碍者;(3)失访者。受试者及其家属均签署知情同意书。本研究已获青岛大学附属青岛市中心医院伦理委员会批准。

1.2主要试剂与仪器 人SCCA酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(货号:DRE11971)购于上海邦奕生物科技有限公司,人HE4 ELISA试剂盒(货号:JLC20037)购于江西江蓝纯生物试剂有限公司。酶标仪(型号:CLARIOstar Plus)购买于伯齐科技有限公司,超导磁共振检查仪(型号:Achieva 1.5T)购买于飞利浦公司。

1.3样本收集 利用采血管收集宫颈癌患者行MRI检查前、健康女性体检当日清晨空腹外周血3～4 ml,室温自然凝集35 min,4 000 r/min离心6 min,分离出血清,保存于-20 ℃冰箱中,用于检测血清SCCA、HE4水平。

1.4ELISA检测血清SCCA、HE4水平 从冰箱中取出人SCCA、HE4 ELISA试剂盒内配带的标准品,按相应说明书将其标准品配制成不同浓度溶液,检测各标准品溶液吸光度值,制作SCCA、HE4的标准回归曲线;将血清解冻,平衡至室温,于酶标板中加适量血清,置于37 ℃培养箱中,孵育25 min,加生物素工作液(含SCCA、HE4抗体),37 ℃孵育约45 min,弃反应液,用磷酸缓冲液洗2次;加显色液,37 ℃孵育约30 min,加终止液,于450 nm处测各样本的吸光度,计算血清SCCA、HE4浓度。

1.5MRI检查 利用8US TORSOPA线圈及3.0T超导磁共振检查仪(型号:Discovery MR 750 plus 3.0 T,美国GE公司)进行MRI检查。参数:矢状T2WI 序列:TE为98 ms,TR为4 235 ms,矩阵为320×256,DFOV为26×40 cm,层距1 mm,层厚4.5 mm;轴位T2WI序列:TE为985 ms,TR为6 280 ms,矩阵为320×320,DFOV为36×56 cm,层距1 mm,层厚5 mm;轴位T1WI序列:TE为1.96 ms,TR为4.33 ms,矩阵为320×256,DFOV为42×65 cm,层距1 mm,层厚5 mm;轴位DWI序列:TE为64.9 ms,TR为2 000 ms,矩阵为128×128,层距1 mm,层厚5 mm,b=1 000。

由两名资深磁共振医生利用双盲法对MRI进行分析。于各序列观察宫颈癌患者MRI学征象,评估肿瘤直径、宫旁浸润、宫颈浸润、盆壁受侵、阴道受侵、远处转移及淋巴结转移情况。在国际妇产科学联合会(FIGO)基础上进行MRI判断,在T2WI上见宫颈肿瘤组织高信号,测定肿瘤直径,以4 cm为界限;宫颈病灶外缘模糊、不规则或有软组织,则判断为宫旁受侵;病灶局限于宫颈内,其周围显示正常宫颈间质低信号环完整,若低信号环不完整则判断为宫颈间质受侵(宫颈浸润);宫腔T2WI显示正常,而宫颈壁三层结构显示消失,则判断为盆壁受侵(宫体受侵);肿瘤突破阴道,阴道T2WI显示略低信号,则判断为阴道受侵;T2WI或压脂序列中呈高信号,DW1呈高信号,且淋巴结直径>10 cm,则判断为淋巴结转移。

1.6统计学方法 采用SPSS25.0软件进行t检验。

2 结 果

2.1两组血清SCCA、HE4水平比较 与健康组相比,宫颈癌组血清SCCA、HE4水平明显升高(P<0.001)。见表1。

表1 两组血清SCCA、HE4水平比较

2.2宫颈癌患者不同参数间血清SCCA、HE4水平比较 宫颈癌患者血清SCCA、HE4水平与其临床分期及肿瘤分化程度有关(P<0.05)。见表2。

表2 宫颈癌患者不同参数间血清SCCA、HE4水平比较

2.3宫颈癌患者影像学表现 宫颈明显增粗,T1WI稍低信号,T2WI略高信号,DWI序列为明显高信号病灶大小清晰可见,下端侵犯阴道,见图1。

图1 宫颈癌侵犯阴道

2.4血清SCCA水平与宫颈癌患者MRI征象的关系 与肿瘤直径<4 cm者、宫旁浸润阴性者、宫颈浸润阴性者、盆壁受侵阴性者、阴道受侵阴性者、远处未转移者、淋巴结转移阴性者相比,宫颈癌患者肿瘤直径≥4 cm、宫旁浸润阳性者、宫颈浸润阳性者、盆壁受侵阳性者、阴道受侵阳性者、远处转移者、淋巴结转移阳性者血清SCCA、HE4水平均明显升高(P<0.001)。见表3。

表3 血清SCCA、HE水平与宫颈癌患者MRI征象的关系

3 讨 论

宫颈癌发生率较高,其晚期生存率较低,对女性健康构成极度威胁〔6,7〕。目前,宫颈癌发病相关因素尚未阐述完全,但学者认为其发病与人乳头瘤病毒(HPV)感染、免疫功能异常、多孕多产、信号传导异常、细胞异常增殖等密切相关〔8,9〕。此外,MRI可有效评估原发肿瘤、阴道浸润、宫旁侵犯、淋巴结转移及术后情况〔10〕。因此,寻找与宫颈癌发病及MRI征象相关的指标,对诊治宫颈癌有一定积极意义。

SCCA是一种糖蛋白,可抑制肿瘤细胞程序性死亡,通过调节信号传导,进而促进肿瘤细胞生长、增殖,可作为妇科肿瘤的血清指标〔11〕。研究发现,SCCA在宫颈癌患者血清中水平升高,其可能参与宫颈癌病变过程,有利于判定宫颈癌患者病理分级〔12〕;此外,SCCA在宫颈癌患者中表达失调,其与肿瘤分化程度、病理类型、预后复发关系密切,SCCA有望成为诊断、评估宫颈癌患者预后的标志物〔13〕。以上研究表明,SCCA水平异常可能与宫颈癌病理发展显著相关。本研究中宫颈癌组血清SCCA水平明显高于健康组,与王燕翔等〔12〕研究结果相符,提示SCCA可能在宫颈癌发病进展中具有重要作用,推测高水平SCCA可能通过调节相关信号通路,进而促进宫颈癌细胞增殖、迁移,抑制凋亡,从而在宫颈癌发生发展中发挥促进作用,但其具体作用机制有待进一步研究证实。另外,HE4在肿瘤细胞染色质组装、合成中起重要作用,其水平在宫颈癌患者血清中显著升高,HE4可作为诊断宫颈癌的辅助指标,有助于临床筛查宫颈癌患者〔14〕。本研究中宫颈癌患者血清HE4水平明显高于体检健康者,与邓冰彬等〔4〕研究结果一致,提示HE4可能与宫颈癌发生发展有关,究其原因,高水平HE4可能通过调节有关靶基因及信号传导,影响机体免疫应答,促进血管新生、宫颈癌细胞增殖,抑制宫颈癌细胞凋亡,从而在宫颈癌发病进程中起作用,但仍需深入探究其作用机制。且宫颈癌患者血清SCCA、HE4水平与其临床分期及肿瘤分化程度均有关,宫颈癌患者临床分期越晚、分化程度越高,其血清SCCA、HE4水平越高,提示SCCA、HE4与宫颈癌患者临床进展有关,关于其具体机制还需进一步探究。

MRI可多方位、多序列成像,具有较高组织分辨率,正常组织与肿瘤组织影像学信号存在明显差异,其不仅可显示病灶大小、位置、形态,还可显示肿瘤向周围侵犯情况〔15,16〕。既往研究发现,宫颈癌患者行MRI检查,其宫颈区表现为不规则分叶状或类圆形的软组织肿块影,T2WI呈中高信号,T1WI呈等信号/稍低信号,DWI序列呈高信号,压脂序列呈略高信号,有助于判断腹股沟、盆腔区淋巴结影、盆壁及宫旁侵犯,对宫颈癌具有较高诊断价值〔17〕。另外,魏荣富等〔2〕研究表明宫颈癌患者血清SCCA水平与盆腔淋巴结转移、宫旁浸润相关,其有利于预测宫颈癌患者预后;邓冰彬等〔4〕研究认为宫颈癌患者血清HE4水平与淋巴结转移、肿瘤浸润深度相关,HE4参与并影响宫颈癌病变进程。本研究结果显示,MRI可清晰显示病灶大小,且血清SCCA、HE4水平与肿瘤大小、宫旁浸润、宫颈浸润、盆壁受侵、阴道受侵、远处转移、淋巴结转移显著相关,进一步提示SCCA、HE4可能在宫颈癌发展过程中发挥重要作用,宫颈癌患者血清SCCA、HE4水平与MRI征象密切相关。但本研究未深入探究SCCA、HE4在宫颈癌中的作用机制,且未评估SCCA、HE4、MRI对宫颈癌的诊断价值,后期将扩大样本量进行深入探讨。

综上,宫颈癌患者血清SCCA、HE4水平均显著升高,两者均可能参与并影响宫颈癌病理进程,与MRI征象关系密切,检测血清SCCA、HE4水平有利于临床筛查宫颈癌患者。