西藏子午莲种子萌发和幼苗生长研究

王书妹，王忠红，曾秀丽

（1.西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所，西藏 拉萨 850032；2.西藏农牧学院，西藏 林芝 860000；3.乐山市农业科学研究院，四川 乐山614000）

睡莲是睡莲科（Nympaeaceae）睡莲属（NympHaea）多年水生草本植物，有热带寒睡和耐寒睡莲两种生态类型。睡莲有广热带睡莲亚属（Brachyceras）、澳大利亚睡莲亚属（AnecpHya）、广温带睡莲亚属（NympHaea）、古热带睡莲亚属（Lotos）和新热带睡莲亚属（Hydrocallis）5 个亚属［1］。全球原生种约50 余种，我国有5 种，分别为白睡莲（N.alba）、雪白睡莲（N.candida）、睡莲（N.teragona）、柔毛齿叶睡莲（N.lotus var.pubescens）、延药睡莲（N.stellata）。睡莲属植物色彩丰富，花色艳丽，花期持续时间长，观赏价值较高，居世界名花之列，是重要的水生花卉。睡莲不仅可以食用，也可作为肥皂、护肤品原料，具有较高的经济价值。睡莲根茎具有降压凉血、消暑清肺、安神解毒的功效。此外，睡莲作为水生植物，其根系能够吸收水中的铅、汞等有毒物质，对水中的磷、氮有明显的还原和净化作用，是园林景观净化水体、美化环境的植物［2］。西藏分布的子午莲（Nympaeaceae tetragona）（图1），是睡莲属中一个小型植株的种，耐寒，只能通过种子繁殖，不能无性繁殖，但其指型块茎可多年生。多数植株整体较小，花朵白色，结实能力较强［3］。

图1 西藏子午莲

西藏地区分布的野生睡莲目前初步判定为子午莲（Nympaeaceae tetragona），属于易濒危物种。目前，对子午莲的研究主要集中在栽培管理技术和新品种选育方面，对子午莲种子萌发和幼苗生长条件的研究较少。开展西藏子午莲资源研究对丰富国内外睡莲资源有重要意义。为保护西藏子午莲种群，可采取人为干预的方式进行子午莲育苗。子午莲种子发芽所需环境条件苛刻，必须要有充足的水分和适宜的温度才能打破睡莲休眠期，促使种子发芽［3］。通过对西藏子午莲种子进行不同处理的发芽试验，探讨西藏子午莲种子发芽率和幼苗移栽后的生长适宜条件，为西藏子午莲育苗提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 材料

随机选取籽粒饱满、整齐度高、较为完整的子午莲种子900粒。2种不同基质：水、育苗基质。基质的组成为：发酵羊粪、泥炭、木屑、泡沫球、氮磷钾肥（尿素、磷酸二氢钾）等。

主要器材：ROX-1500B 智能人工气候箱、玻璃瓶器皿、镊子、烧杯、玻璃培养皿、无菌水、2%双氧水、玻璃棒等。

1.2 方法

1.2.1 种子发芽实验

剥去果实外部表皮后装入纱袋用手反复揉搓，再装入玻璃器皿，放入清水，冲走浮在表面的种子外衣，反复过滤数遍直到清洗干净，用纱袋装好并放入自封袋，做好标记。

1）种子的处理：本次试验选取种子900 粒，放入18 个培养皿内，用常温蒸馏水清洗2 遍，倒入适量的2%双氧水，浸泡5 min，期间用玻璃棒轻轻搅动数次，再用无菌水清洗2次。

2）培养瓶准备：试验前将90 个玻璃瓶用清水冲洗干净，表面用干净毛巾擦干水分。试验准备分两组进行：一是将育苗基质与自来水搅拌，放入育苗基质至45 个培养瓶，并将瓶口擦拭干净；二是倒入自来水于45个玻璃瓶中。

3）人工气候箱准备：在种子放置前，调试好3个气候箱，使温度保持在20 ℃、25 ℃和30 ℃，且光照强度和湿度一致（光照强度为5级，湿度为40%）。

将选出的子午莲种子平均分成18 份，每份50 粒，每个玻璃瓶分别装10 粒种子，共计90 瓶。参考借鉴黄国振等［3］睡莲种子育苗方法，在以上3个不同温度、两种不同基质的人工气候箱内进行发芽试验。6 个处理如表1 所示。每处理重复3 次，于萌发后第4天和第12天分别统计种子发芽势、发芽率、发芽指数［4］。

表1 试验设计

1.1.3 置床培养

种子放入时保证种子之间有一定的距离、均匀较整齐地摆放于基质表面，良好地接触水分使其种子发芽条件一致，盖上盖子放入人工气候箱进行发芽试验。于第4 天开始每日9-10 点对每组每个重复的种子发芽数量进行记录。种子萌发时限按国际种子检验规程统计种子发芽势、发芽率，发芽指数。计算方法：发芽率=12天累积发芽种子数/供试种子总数×100%；发芽势（%）=Gpt/Dpt×100%。Gpt表示达到高峰日时的发芽量，Dpt 表示达到高峰值的天数，用来评价种子发芽速度和发芽整齐度的指标；发芽指数（Gi）=ε（Gt/Dt）（Gt 为在时间t 天的发芽数，Dt为相应的发芽天数）［5］。

1.2.2 不同处理对幼苗生长的影响试验

发芽后，根据种子发芽情况将其移栽到装有淤泥的花盆中。于9月23日移栽，每隔7 天浇水一次，10月24日、11月24日、12月24日测定每个处理睡莲的叶片数、叶长、叶宽、根数、根长、株高。

1.2.3 数据处理

用Excel记录处理后，DPS软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同温度与基质对睡莲种子萌发的影响

2.1.1 不同处理子午莲发芽率的影响（表2、表3）

表2 不同处理子午莲种子的发芽情况

表3 发芽率的方差分析结果

由表2 和表3 可知，子午莲种子在水培T1、T2处理下，发芽率最高达到93.33%，T5、T6 发芽率最低，为81.33%。不同处理发芽率大小顺序排列为：T1=T2>T3>T4>T5=T6，水培发芽率均高于基质培。从方差分析结果可以看出，各处理组合间T1、T2与T5、T6 差异显著，T1、T2、T3、T4 之间差异不显著；T3、T4、T5、T6 之间差异也不显著。A 因素间差异极显著；B 因素间差异不显著；不同因素间差异不显著，各培养温度水培发芽势达到高峰期时间明显早于基质培养。

2.1.2 不同处理对子午莲发芽势的影响

从表2、表4 可知，在T2 处理下，发芽势最高达到80%，T6 发芽势最低，为48.67%。水培平均发芽势达到72.67%，高于基质培15.11%。不同处理发芽势大小顺序排列为T2>T3>T4>T1>T5>T6。其他处理之间差异不显著，可见T2 处理发芽势最好，其次为T3。通过方差分析得出，各处理间T2 与T6达到差异显著，其余处理间差异不显著。A 因素间、B因素间、AB因素间发芽势差异均不显著。

表4 发芽势的方差分析结果

2.1.3 不同处理对子午莲发芽指数的影响

由表2、表5 可知，在T3 处理下，发芽指数最高达到63.61，T4 发芽指数最低，为19.51。可见在20 ℃到30 ℃之间，发芽指数随着温度增加而上升。不同处理发芽指数大小顺序排列为T3>T2>T1>T6>T5>T4。通过方差分析得出，T1 与T2、T3、T4、T5、T6达到差异极显著；T2与T3差异不显著；T2、T3与其他处理差异极显著；T4 与其他处理差异极显著；T5 与T6 差异不显著；T5、T6 与其他处理差异极显著。A 因素间达到差异极显著水平，B 因素间达到显著水平，AB因素间差异不显著。

表5 发芽指数的方差分析结果

2.2 不同温度与基质对子午莲幼苗生长的影响（表6）

表6 幼苗不同时期生长情况

幼苗不同处理研究表明温度在30℃时育苗，睡莲种子长叶最早：30℃育苗，在播种后第10 天长叶1 片，第13 天部分长叶2 片；25℃育苗，在播种后第11 天长叶1 片，第15 天部分长叶2 片；20℃育苗，在播种后第16天才部分长叶1片。在水培中，睡莲叶片呈淡紫色，略透明，根系较细长，浮于水面。在基质培中，睡莲叶片呈翠绿色，叶肉饱满，叶柄较粗壮，叶片边缘往外翻，叶片整体斜向上舒展。

图2 水培子午莲幼苗

图3 基质培子午莲幼苗

本次睡莲幼苗均在9月23日移栽，每7 天浇水1 次，每30 天测量睡莲生长指标。由表6 可知，移栽1个月后，植株单株叶片数量为1～3片，随着生长时间变化，植株逐渐长出新的叶片，叶片数量也随之增多。叶长范围在9.6～20.81 mm之间，叶宽范围在7.38～14.04 mm 之间；植株株高范围在31.01～176.71 mm 之间；生根量多数为3～4 根，最高达7根；根长范围在23.26～70.65 mm 之间。通过叶长、叶宽的方差分析可知，10月24日30 ℃基质、30 ℃水培移栽后由于长势较慢，未测量到3 次重复数据；在11月24日时测量植株长势，25 ℃水培与30 ℃基质达到差异显著水平，其余处理差异不显著；在12月24日测量植株生长情况时发现各指标有下降趋势，初步推断由于冬季气温骤降导致植株生长缓慢，甚至出现消苗现象。

3 讨论

近年来，睡莲研究重点主要在新品种选育、栽培技术、表型特性方面，对西藏子午莲的发芽、幼苗培养尚未见报道。黄国振等［3］指出，人工育苗时催芽温度在26～30 ℃时种子会很快发芽长苗。本研究建议发芽和幼苗生长在25 ℃水培条件下育苗较好，移栽后30 ℃基质幼苗生长较好。张燕青等［6］研究表明，根据不同基质对睡莲生长的影响，田园土加有机肥的栽培基质效果更佳。由此可见，本文结果与其研究结果基本相符。

4 结论

本试验通过水培、基质培，在20 ℃，25 ℃，30 ℃对睡莲种子进行发芽试验研究。整体来看，在25 ℃、30 ℃水培为最适宜的萌发条件，睡莲种子能快速发芽，且发芽率较高；幼苗移栽后30 ℃基质幼苗植株叶片大小、生根量、根长优于水培，表现出较好的生长优势。因此，子午莲种子适宜的幼苗培养条件为20～30 ℃基质培，幼苗移栽后30 ℃基质幼苗生长较好。对比基质催芽和水催芽的实验可知，以上处理表明基质育苗移栽后植株长势明显优于水培。基质培养时要注意及时移栽，避免发芽温度过高导致叶片出现焦苗、腐烂等现象。本研究探讨了提高西藏子午莲种子发芽率及幼苗生长适宜的条件，可为西藏子午莲育苗提供借鉴。