于鹏飞
(建昌县现代农业发展服务中心动物疫病预防控制中心,辽宁 建昌 125300)
牛布鲁氏菌病的病原是布鲁氏菌,为革兰阴性菌,呈球形或是短杆状,长度为0.5~1.5微米,宽为0.5~0.7微米。主要感染牛,也可以感染猪、羊、人等,不同菌株的细菌致病力和宿主的特异性存在较大差异,牛布鲁氏菌的毒力较弱,疾病症状较其他菌株症状较轻,一般不导致牛死亡,导致病牛生殖障碍大批淘汰,影响养殖户经济效益,病牛死亡原因多为继发感染其他病菌或病毒。布鲁氏菌离开宿主后可存活,但不可进行繁殖。布鲁氏菌不耐热,60℃以上条件下15~30分钟可全部被杀死,不能生存在pH小于4.5的环境下,在阳光和干燥的环境下存活时间短,在潮湿寒冷的环境可存活2~3个月,在水中可存活3~4个月。布鲁氏菌对常规消毒剂抵抗力弱,在0.1%的新洁尔灭中可存活30秒,在2%的来苏儿中能存活1~3分钟。
牛布鲁氏菌病四季均可发病,无明显季节特性,但养殖管理不当、营养供给不足、环境骤变的时候,牛免疫降低更易感病。该病可发生于不同品种、性别和年龄的牛,常见于成年牛,犊牛发病少见,该病的发病率随牛的年龄增长而增高,初产母牛比经产母牛更易染病。牛布鲁氏菌病的传染源为病牛和带菌牛,病原主要通过消化道、生殖道和皮肤黏膜途径传播,飞沫以及吸血昆虫等也可传播该病,母牛流产后的胎儿、羊水、奶水等以及公牛的精液也都带有病原菌。布鲁氏菌病为人畜共患病,阳性病牛未及时无害化处理可传染给人。发病牛一般都会终身带菌,并随时排毒,病牛免疫力提高后有可能自行康复。
牛布鲁氏菌病主要感染性成熟的成年牛,导致牛繁殖障碍,多为隐性感染。该病可能有2~3周的潜伏期,该病最典型的症状就是母牛流产,病原菌感染牛后,损害牛生殖系统,乳房、子宫、腹膜、关节、睾丸、淋巴结等出现炎症。该病易发生于妊娠5~8个月的母牛,导致母牛流产,产出死胎或病弱牛犊,母牛精神萎靡,进食量下降,阴唇肿胀,有黏液流出,极易出现乳房炎、子宫内膜炎、产后棕红色或雾灰色的恶露不断、胎衣不下等症状,有时还会引发子宫积脓致使母牛长期不孕。部分母牛流产后可以继续受孕和产犊,但所产犊牛病弱,短期内就会死亡。公牛主要表现为睾丸炎和附睾炎,可能还有阴茎红肿的现象,生殖能力下降,如果疾病发病急,可出现高热。母牛和公牛染病后都易出现关节炎和滑囊炎,牛四肢可出现水肿的症状,导致病牛喜卧、跛足、行走困难等。
剖检患病母牛发现,病变的部位主要是卵巢、子宫等生殖器官。子宫体肥大,子宫内膜充血肿胀,绒毛膜充血肿大呈紫红色,可见部分灰色脓液和黄色坏死灶,间隙有胶状渗出物,胎膜表面附着脓液和纤维素,胎膜水肿,厚度增加。病牛卵巢出现硬化和发炎的症状,有的病牛有不同程度的卵巢囊肿。剖检流产胎儿可见明显败血症症状,胎儿支气管炎症状显著,脾脏和淋巴结肿大,肝脏有大量坏死灶。剖检患病公牛可见公牛睾丸明显肿大,可出现坏死性或化脓性睾丸炎,阴茎红肿,黏膜上有小而硬的结节,为坏死灶和化脓点。
无菌环境采集病牛的尿液、血液、脓液、乳汁、胎衣和阴道分泌物等进行涂片,使用沙黄美兰染色,在油镜下发现红色细菌即可确诊牛布鲁氏菌病。
检测牛布鲁氏菌病的常用凝集方法有虎红平板试验法、试管凝集法、平板凝集法和全乳环状试验。虎红平板试验是在病牛尾巴腹侧采集3~5毫升血液,分离血清进行虎红平板试验,试验阳性即可确诊为牛布鲁氏菌病。虎红平板试验操作简便、快速,适合基层大范围开展的方法,为国家标准的初检方法。试管凝集法主要是按比例稀释病牛血清样本,加入稀释后的抗原混匀后置于37℃恒温箱中20~22小时后取出,常温静置2小时后查看结果,试管内出现凝集即为阳性,确诊为布鲁氏菌病,若为阴性需在3~4周后重复试验,结果还是阴性才能判定牛未受到布鲁氏菌的侵染。试管凝集法为国家标准的复检方法,价格便宜,但操作较为复杂。平板凝集法是在无菌玻璃平板上画出的边长为4厘米的格子里均匀的滴加待测血清和抗原,室温下放置5~8分钟后观察是否有凝集块和颗粒状物质,如果出现凝集则为阳性,且凝集程度与病毒感染数量呈正相关。全乳环状试验是指无菌条件下取病牛乳汁置于试管中,加入抗原混匀后置于37℃恒温箱中培养1小时后,根据凝集状况进行结果判定,阳性可确诊为牛布鲁氏菌病。除了常用的凝集实验,还可使用ELISA、补体结合试验和胶体金免疫层析技术,但实验价格昂贵,使用不广泛。
分子生物学常用的检测方法就是PCR法,取病牛的乳汁、分泌物和排泄物或是病死牛的器官进行检测,加入生理盐水研磨后离心,取上清液进行核酸提取,进行扩增和检测。该方法操作难度较高,不适用于大规模检测。
牛布鲁氏菌病暂无特效药可以治疗,一般采用抗生素和维生素相结合的方法进行治疗,使该病得到控制。为避免牛感染布鲁氏菌病,导致养殖户经济损失,做好日常预防措施、提高牛抵抗力尤为重要。最直接有效提高牛对布鲁氏菌的免疫力的措施是接种疫苗,常用的疫苗分猪种布氏菌S2株苗、牛种布氏菌A19株苗,S2刺激性较弱,适合奶牛接种,在犊牛3~5月龄之间进行首次接种,一年以后再接种一次,免疫力可维持数年,A19毒性稍强,得到显著的免疫效果,肉牛更适合接种A19,只需在每年3~4月接种一次。牛布鲁氏菌疫苗不可与牛口蹄疫疫苗同时接种,会出现免疫失败或免疫抑制,降低疫苗免疫效果。牛布鲁氏菌活疫苗有一定毒性,养殖人员在注射疫苗时也应做好防护,避免感染布鲁氏菌病。引进病牛或隐性带毒牛是牛布鲁氏菌病大面积发生的重要原因,尽量坚持自繁自养原则,如必须引进种牛,一定要做好调查,不在疫区引进种牛。引进健康种牛,引进后要隔离饲养20~30天,着重观察其精神状态、饮食和排泄情况,观察无异常后再与其他牛合群混养。不饲喂变质饲料,青贮饲料pH较低,布鲁氏菌不能生存,饲喂青贮饲料可降低感染的风险。定期消毒,并选取牛布鲁氏菌敏感的消毒剂,如,新洁尔灭、来苏儿、氢氧化钠和二氯异氰脲酸钠等。养殖场门口设立消毒池,人员和车辆都要进行消毒,谢绝无关人员进入。及时清理牛的排泄物和垫料,每日做好通风和阳光照射也可以起到一定的消毒效果。牛布鲁氏菌病为人畜共患病,饲养人员要做好防护工作,为病牛接生时要穿好防护服和一次性口罩手套,避免感染,并定期进行体检。