脑脊液Tau 蛋白、血脂在MCI 和AD 中的表达及其诊断价值

朱彤 闫世勇 白雪

轻度认知障碍（Mild cognitive impairment，MCI）常见于老年群体，是一种认知障碍症候群，与同年龄健康老人相比，MCI 患者多表现为认知功能衰退，但其日常生活未有显著影响［1］。MCI 被认为是阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）的前驱阶段，可以说MCI 是介于正常衰老与AD 之间的一种临床过渡状态。相关数据显示，每年约有15%的MCI 患者进展为AD，53%的MCI 患者在患病3 年后可能进展为AD［2-3］。因此，将MCI 作为AD 的早期防治突破口是临床研究热点之一。Tau 蛋白是目前已知含量最高的微管相关蛋白，能够维持微管稳定性，降低微管蛋白分子解离。已有大量研究证明，AD 患者脑中Tau 蛋白总量较健康群体明显增多，其与AD 病理发生有紧密联系［4］。有学者［5］认为，外周血血脂代谢紊乱能够致使脑内β-淀粉样蛋白异常沉积，从而导致机体出现AD 病理样改变，但该结论尚存在较大争议。本研究以上述理论为基础，从Tau 蛋白、外周血血脂水平单独与联合应用角度出发，综合性分析其与机体认知水平的关系以及在MCI、AD 中的评估价值，以期为临床MCI、AD 预防提供一定支撑，现将研究结果汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从ADNI 数据库中随机选出42 例MCI 患者（MCI 组），选取2021 年1 月至2022 年6 月于周至县人民医院体检的40 名健康者（对照组），根据MCI 患者年龄、性别匹配同时段于本院治疗的AD 患者42例为AD 组。其中，对照组女性30 名，男性10 名；年龄平均（74.38±6.17）岁；受教育年限平均（10.43±2.15）年。MCI 组女性31 例，男性11 例；年龄平均（73.88±6.16）岁；受教育年限平均（10.29±2.19）年。AD 组女性30 例，男性12 例；年龄平均（74.93±5.60）岁；受教育年限平均（10.26±2.14）年。三组患者性别、年龄、受教育年限比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究已通过院医学伦理委员会批准。

1.2 诊断标准

以《阿尔茨海默病源性轻度认知障碍诊疗中国专家共识2021》［6］为导向拟定AD、MCI 入组标准。MCI 入组标准：①主症为记忆障碍，且家属或其他照护人可证实；②年龄在60 周岁以上；③病情超过6 个月；④痴呆评定量表（Clinical Dementia Rating，CDR）在0.5 分以内（含0.5 分）；⑤日常生活正常，排除痴呆。AD 入组标准：①年龄在60 周岁以上；②简易精神状态量表（Mini-Mental State Examination，MMSE）［7］得分小于26 分；③Hachin-ski缺血指数量表（Hachinsk ilnchemic Score，HIS）［8］得分在4 分以内；④存在至少两个认知域损害：学习、记忆，言语、听写，推理、判断，执行、视空间，可伴随人格或行为转变；⑤日常生活、工作受到影响；⑥患者家属对研究知情同意，知晓相关利弊，已签署同意书。排除标准：①合并家族性精神疾病史；②合并恶性肿瘤，脑梗死、脑出血等其他心脑血管疾病导致的认知障碍；③合并甲状腺素减少引发的痴呆，合并麻痹性痴呆等其他原因导致的痴呆；④合并自身免疫系统异常引发的相关疾病，入组前未接受相关免疫抑制治疗；⑤配合度差，无法完成相应研究；⑥中途退出研究。

1.3 方法

采用MMSE、Addenbrooke 改良认知评估量表（Addenbrooke cognitive examination，ACE-R）评估所有受试者认知水平。于入组后24 h 内对MCI 组、AD 组患者和对照组个体Tau 蛋白表达水平进行检测，同时检测血脂指标［总胆固醇（Total Cholesterol，TC）、甘油三脂（Triglyceride，TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL-C）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）］水平。所有入选者在入组后分别行腰椎穿刺术抽取脑脊液2 mL 分别装置-70℃冰箱冻存待测。采用双抗夹心酶联免疫吸附试验试剂盒tau 蛋白，试剂盒购自比利时innogenetics NV 公司。抽取晨起安静状态下静脉血3 mL，离心10 min，转速为2 500 r/min（离心半径为10 cm），分离血清标本，放置于-20℃下保存待测。TG 采用氧化酶法测定，TC 采用CHOD-PAP 法测定，HDL 和LDL 采用一步酶法测定，试剂盒购自上海科艾博生物技术有限公司。

1.4 观察指标

①MMSE 评分，量表包括定向、记忆力、注意力、计算以及回忆与语言5 个维度，共30 项，总分为0～30 分，分数越高认知水平越高［8］；②ACE-R 评分，量表包含5 方面认知：定向力、记忆、表达、语言、视觉空间认知，总分为100 分，分数越高认知功能越好。

1.5 统计学处理

采用统计软件SPSS 22.0 进行数据处理，计数资料使用n（%）表示，行χ2检验；计量资料采用（）表示，多组比较用单因素ANOVA 方差分析，两两比较用LSD-t 检验；相关性分析采用Pearson 相关分析。建立受试者工作曲线（ROC）评估诊断、鉴别价值。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组Tau 蛋白表达水平比较

对照组Tau 蛋白表达水平为（146.16±100.45）pg/mL，MCI 组为（357.98±156.37）pg/mL，AD 组为（432.49±178.42）pg/mL，三组Tau 蛋白表达水平：AD 组＞MCI 组＞对照组，差异有统计学意义（F=40.262，P＜0.05）。见图1。

图1 三组Tau 蛋白表达水平比较Fig. 1 Comparison of Tau protein expression levels among the three groups

2.2 三组血脂水平比较

三组TG、LDL-C 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；三组TC 水平：AD 组＞MCI 组＞对照组，三组HDL-C 水平：AD 组＜MCI 组＜对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 三组血脂水平比较（）Table 1 Comparison of blood lipid levels among the three groups（）

表1 三组血脂水平比较（）Table 1 Comparison of blood lipid levels among the three groups（）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与MCI 组比较，bP＜0.05。

2.3 三组认知水平比较

三组MMSE、ACE-R 评分：AD 组＜MCI 组＜对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 三组认知水平比较［（），分］Table 2 Comparison of cognitive levels among the three groups［（），scores］

表2 三组认知水平比较［（），分］Table 2 Comparison of cognitive levels among the three groups［（），scores］

注：与对照组比较，aP＜0.05；与MCI 组比较，bP＜0.05。

2.4 Tau 蛋白、血脂水平与认知功能的相关性分析

MMSE、ACE-R 评分与TG、LDL-C 水平无显著相关性，与Tau 蛋白、TC 呈负相关性，与HDL-C呈正相关性（P＜0.05）。见表3。

表3 Tau 蛋白、血脂水平与认知功能的相关性分析Table 3 Correlation analysis of Tau protein，lipid levels and cognitive function

2.5 Tau 蛋白、血脂水平单独、联合诊断MCI 的ROC 曲线分析

Tau 蛋白、TC、HDL-C 水平联合诊断高于单-诊断P＜0.05。见表4、图2。

表4 Tau 蛋白、血脂水平单独、联合诊断MCITable 4 Separate and combined diagnosis of MCI by Tau protein and blood lipid levels

图2 Tau 蛋白、血脂水平单独、联合诊断MCI 的ROC 曲线Fig. 2 ROC Curve of Tau Protein，Lipid Levels for Single or Combined Diagnosis of MCI

2.6 Tau 蛋白、血脂水平单独、联合鉴别AD 的ROC 曲线分析

Tau 蛋白、TC、HDL-C 水平联合诊断高于单-诊断（P＜0.05）。见表5、图3。

表5 Tau 蛋白、血脂水平单独、联合鉴别ADTable 5 Tau protein and blood lipid levels alone and jointly identify AD

图3 Tau 蛋白、血脂水平单独、联合鉴别AD 的ROC 曲线Fig. 3 ROC Curve of Tau Protein，Lipid Levels for Single，Combined identification AD

3 讨论

AD 是一种好发于老年、老年前期群体以认知功能障碍为典型表现的中枢性神经系统退行性疾病［9］。AD 患者早期可能仅存在记忆受损表现，随着病情加重其学习、保存知识的能力衰退，甚至可能逐渐丧失言语能力，无法完成日常简单事项，严重影响生活质量［10］。MCI 是AD 发病的临床前阶段，是一种处于健康与AD 患病之间的认知损害状态。作为AD 发病前的预警信号，MCI 一直是临床研究的热点。通过对正常群体、MCI 群体以及AD群体进行鉴别与分析，能够为AD 高危患者争取到适当干预时间。

Tau 蛋白属于含磷酸基蛋白，MCI、AD 患者脑内Tau 蛋白会出现异常过度磷酸化，导致其丧失正常生物功能，出现相应神经元退行性病变与认知障碍［11］。本研究结果与许欣茹等人研究结果一致［12］。说明MCI、AD 患者Tau 蛋白水平较健康群体异常高表达。通过相关性分析可知，脑脊液Tau 蛋白表达水平与MMSE、ACE-R 评分呈负相关性，说明Tau 蛋白水平与机体认知功能有相同变化趋势，进一步证实了Tau 蛋白参与了认知功能障碍的发生与发展。

邱聪龙等［13］在对AD 患者血脂进行研究时发现，AD 患者认知功能与其血脂表达水平有正相关性。黄小彦等［14］发现血脂升高是老年人出现轻度认知障碍的危险因素。同时，经相关性分析可知，MMSE、ACE-R 评分与TC 呈负相关性，与HDL-C呈正相关性，说明血脂表达与机体认知功能存在一定联系。Gibbons 等［15］认为，血脂表达与机体认知功能的关系在于，神经元细胞膜中存在大量脂肪，当载脂蛋白异常时可引发血脂水平升高，致使Tau 蛋白磷酸化，诱发全脑沉积，产生认知障碍，进而发展为AD。

此外，本研究进一步结果说明Tau蛋白与血脂水平在诊断、鉴别MCI、与AD方面有一定临床价值。

综上所述，MCI、AD 患者脑脊液TAU 蛋白及血脂水平存在异常表达，且其异常表达程度可随认知水平降低而加重，脑脊液TAU 蛋白与相关血脂指标单独、联合对诊断、鉴别MCI 与AD 有一定临床应用价值。