TVCDS 联合ki-67、AFU 及AFP 检测在卵巢肿瘤性质诊断中的应用价值

蒋霞 侯莉 赵晶 李金燕 方敏★

卵巢癌早期无明显特异性症状，因此临床漏诊及误诊率较高。及时对卵巢肿瘤性质做出评估，对患者临床诊疗有积极意义［1］。影像学检查、血清标志物检测可为肿瘤早期诊断、治疗方案选择、预后评估提供参考依据。经阴道彩色多普勒超声（transvaginal color Doppler ultrasonography，TVCDS）有助于了解患者病灶部位血流情况并进行量化分析，对卵巢肿瘤诊断有积极参考价值［2］。细胞核增殖抗原（Nucleus proliferation antigen，ki-67）、α-L-岩藻糖苷酶（Alpha-L-fucosidase，AFU）、甲胎蛋白（α-fetal protein，AFP）均是与肿瘤相关的因子。ki-67 是一种核蛋白，可反映肿瘤细胞增殖活性，以往研究指出，ki-67 与卵巢恶性肿瘤患者预后不良密切相关［3］。AFU、AFP 为肝癌标志物，两者联合检测可提高原发性肝癌诊断率［4］。本研究旨在分析TVCDS 联合ki-67、AFU 及AFP 检测在卵巢肿瘤良、恶性诊断中的应用价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2020 年1 月至2023 年3 月德州市妇女儿童医院收治的200 例卵巢肿瘤患者的临床资料。纳入标准：①患者及家属均知晓本次研究；②经B 超、MRI 等确诊，且符合《妇产科学·第8 版》［5］中有关卵巢肿瘤诊断标准，且病理检查确诊为卵巢良性或恶性肿瘤；③临床资料完整；④均进行TVCDS 检查。排除标准：①合并感染或传染性疾病者；②凝血功能异常、严重心肺功能不全者；③合并生殖系统炎症、其他生殖系统肿瘤等。本研究经院医学伦理委员会批准通过。

1.2 方法

1.2.1 TVCDS 检查

所有患者在入院时均进行TVCDS 检查，检查仪器为美国GE 公司的Voluson E8/E10 型彩色多普勒超声仪，已婚者选择阴道超声探头，频率为5～9 MHz，未婚为腹部探头，频率为2～5 MHz。取膀胱截石位，经阴道或腹部耻骨联合部位放置探头，检查子宫附件，发现病灶后观察其位置、大小、形态、边界、包膜等情况，并观察病灶内部回声、血流中心信号等。

恶性肿瘤评估标准［6］：超声可见肿瘤内部有丰富血流，搏动指数＜0.1，阻力指数＜0.5；Alaczar 超声评分≥6 分，同时符合上述标准判定为恶性肿瘤。

1.2.2 ki-67、AFU 及AFP 检测

获取患者空腹时静脉血液5 mL，离心机离心（3 000 r/m，10 min，离心半径10 cm）后获取血清待检，采用GC25 底物法检测（迈瑞BS-800 全自动生化分析仪及北京世纪沃德生物科技有限公司AFU试剂盒）AFU，使用化学发光法测定［罗氏Cobase602型电化学发光分析仪（瑞士）及配套罗氏诊断公司试剂盒］AFP。获取患者病理组织标本进行ki-67检测：采用10%甲醛固定标本，常规处理后进行免疫组织化学实验，选择鼠抗人单克隆抗体（1∶50）。

ki-67、AFU 及AFP 阳性结果评估：细胞核中出现黄色沉淀记为ki-67 阳性表达细胞，ki-67 阳性细胞占细胞总数的百分数≥30%，认为是ki-67 阳性表达［7］；AFU＞40 U/L 为恶性［8］；AFP＞20 μg/L 判定为恶性［9］。诊断效能评估［10］：灵敏度=［真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）］×100%，特异度=［真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）］×100%，准确度=［（真阳性+真阴性）例数/总例数］×100%。

1.3 观察指标

获取患者病理检查结果，对比良、恶性患者ki-67、AFU、AFP 以及TVCDS 血管分型、血流参数情况，并分析TVCDS、ki-67、AFU、AFP 单独及联合诊断对卵巢肿瘤良、恶性诊断效能。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 软件进行统计分析，计量资料采用（）描述，行t检验，计数资料以n（%）表示，行χ2检验，等级资料使用秩和检验（Z）；一致性采用Kappa值，其中Kappa值≤0.20 为极低一致性，0.21～0.40 为一致性一般，0.41～0.60 为一致性中等，0.61～0.80 为高度一致性，0.81～1.00 为几乎完全一致；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病理检查结果

经病理检查结果可知，200 例患者中恶性16例，其中浆液性囊腺癌10 例，卵巢子宫内膜样癌6 例；良性184 例，其中成熟型囊性畸胎瘤88 例，浆液性囊腺瘤43 例，黏液性囊腺瘤31 例，纤维瘤22 例。

2.2 良、恶性患者ki-67、AFU、AFP 比较

恶性组ki-67阳性率、AFU、AFP水平均明显高于良性组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1、图1。

图1 ki-67 免疫组化染色图示（400×400）Fig. 1 Immunohistochemical staining diagram of Ki-67（400×400）

表1 良、恶性患者ki-67、AFU、AFP 比较［n（%），（）］Table 1 Comparison of ki-67，AFU and AFP between benign and malignant patients［n（%），（）］

表1 良、恶性患者ki-67、AFU、AFP 比较［n（%），（）］Table 1 Comparison of ki-67，AFU and AFP between benign and malignant patients［n（%），（）］

2.3 良、恶性患者TVCDS 血管分型情况比较

良、恶性患者TVCDS 血管分型情况比较差异有统计学意义（P＜0.05），恶性组患者以3 型（68.75%）为主，良性组则以1型为主（65.76%）。见表2。

表2 良、恶性患者TVCDS 血管分型情况比较［n（%）］Table 2 Comparison of TVCDS vascular classification between benign and malignant patients［n（%）］

2.4 良、恶性患者TVCDS 血流参数情况比较

恶性组患者PSV、EDV 值均高于良性组，而RI值则明显低于良性组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 良、恶性患者TVCDS 血流参数情况比较（）Table 3 Comparison of TVCDS blood flow parameters between benign and malignant patients（）

2.5 不同检测对卵巢肿瘤良、恶性的鉴别诊断效果

联合检测与病理检查结果几乎完全一致（Kappa=0.851），TVCDS、AFP 一致性中等（Kappa=0.560，Kappa=0.480）、AFU、ki-67 一致性一般（Kappa=0.291，Kappa=0.358），且联合检测对卵巢肿瘤良、恶性诊断准确度为97.50%、灵敏度为97.28%、特异度76.19%，高于TVCDS、ki-67、AFU、AFP 单独检测（P＜0.05）。见表4、5。

表4 TVCDS、ki-67、AFU、AFP 单独及联合诊断卵巢肿瘤性质结果与病理结果的对照Table 4 Comparison between the results of TVCDS，ki-67，AFU and AFP alone and in combination for diagnosing ovarian tumor properties and pathological results

表5 TVCDS、ki-67、AFU、AFP 单独及联合诊断对卵巢肿瘤良、恶性的诊断效果Table 5 Diagnostic efficacy of TVCDS，ki-67，AFU and AFP alone and in combination for benign and malignant ovarian tumors

3 讨论

据相关数据显示，卵巢肿瘤发病占女性肿瘤的14%左右，且其早期症状并不明显，多数患者在就诊时多为晚期，预后差［］。早期明确诊断卵巢肿瘤并进行针对性治疗对患者尤为重要。

随着分子诊断在临床中的不断发展，血清肿瘤标志物也逐渐受到重视。本研究结果显示，与良性组相比，恶性组患者Ki-67 阳性率及AFU、AFP 表达水平明显升高。Ki-67 是细胞增殖相关蛋白，其表达情况与细胞增殖状态密切相关，研究显示，Ki-67 阳性率越高，肿瘤的增殖情况越活跃，Ki-67 可作为预测肿瘤临床行为、评估治疗效果、预测预后的重要参数［12］。也有研究显示，在卵巢癌患者中Ki-67 阳性率明显升高，且与患者临床分期密切相关，与本研究结果类似［13］。AFU 是一种溶酶体酸性水解酶，在细胞和体液中广泛存在，可参与含岩藻糖基的蛋白、糖脂类生活性大分子的代谢，以往研究显示，其与女性生殖器肿瘤发生、发展存在相关性。AFP 为最早发现的肿瘤标志物，常用于肝癌诊断中。研究显示，卵巢癌与卵巢良性肿瘤患者中AFP 水平表达存在差异，其在卵巢癌中表达明显升高，可作为临床辅助诊疗手段［14］。

超声检查为临床多种肿瘤诊断的重要方式，TVCDS则是妇科肿瘤检查中常用的一种，具有操作方便、无创、重复性好等优点。临床发现，卵巢良性病变新生血管多在周边形成，恶性病变则从肿瘤中央开始，在超声中表现为血流丰富、生长迅速等特点。在TVCDS检查中，盆腔内结构处于超声近场，获得图像清晰度高，利用彩色多普勒显像技术可直观地了解患者病灶部位血流差异，对良、恶性肿瘤鉴别有积极意义。本研究通过对比两组患者血管分型及血流参数情况可知，恶性组患者恶性组患者以3型（68.75%）为主，良性组则以1 型为主（65.76%），恶性组PSV、EDV 值均高于良性组，而RI 值则明显低于良性组，与上述研究结果相符。恶性肿瘤患者RI值降低，提示在癌变过程中随着患者病情加重，癌细胞对营养的需求增大，癌细胞内部的血流量也明显增加。以往研究通过分析超声检查血流参数与卵巢癌恶性程度相关性，结果显示，血流速度加快、血流量/血容量上升、局部血流阻力降低者其恶性程度越明显，与本研究结果一致［15］。

为提高对肿瘤性质鉴别准确性，临床常以多项指标联合检测来弥补单项检查不足，以此提高诊断准确性。本研究结果显示，TVCDS、ki-67、AFU、AFP 单独检测与病理检查一致性不高，而联合检测与病理检查结果几乎一致，提示联合检测可提高对卵巢肿瘤性质鉴别的诊断效能。从影像学检查中可获得患者病灶基本情况，结合血清学检查查漏补缺，可为临床提供更为准确的参考信息。郝淑琴［16］等人研究也同样证实超声检查联合多种肿瘤标志物对卵巢肿瘤性质鉴别的可靠性。

综上所述，TVCDS 联合血清ki-67、AFU 及AFP 可提高卵巢肿瘤性质鉴别的准确度、灵敏度及特异度，降低漏诊及误诊风险。