■ 崔海燕
(1.驻马店幼儿师范高等专科学校,河南驻马店 463000;2.河南师范大学生命科学学院,河南新乡 453000)
γ-氨基丁酸,别名4-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,简称GABA),化学式是C₄H₉NO₂,在脊椎动物、植物和微生物中广泛存在[1]。GABA 作为一种抑制性神经递质,有着非常多的生理效应,主要作用于中枢神经系统,能够改善肝脏功能、肾脏功能,调节食欲等多种生理活性,GABA 很早就应用在医药和保健食品中[2]。GABA 对动物有很好的抗热应激效果,还能提高动物的生长速度,它是一种新型饲料添加剂[3],GABA 在畜禽上已经广泛应用。除此之外,GABA 能增加采食量、改善牲畜的生长性能,还能降低料重比。在热应激过程中,通过GABA 的加入,可以显著地减少热应激仔鸡的呼吸频率,显著提高肉鸡的日增重,改善料重比[4]。但GABA 对肉羊的作用研究相对较少。羔羊在断奶后的应激较为严重,本试验旨在研究断奶后过渡阶段肉羊基础日粮中添加不同剂量的GABA, 通过对生长数据指标、血清生化、抗氧化、免疫指标测定,为GABA的使用提供依据。
GABA购买自山东某企业。
试验地点在河南驻马店某养殖场,选择相同月龄的杜寒杂交绵羊120只,随机分为4组,每组共30只,每组分成6栏,每栏5只羊。对照组不添加GABA,试验1组添加60 mg/kg GABA,试验2组添加100 mg/kg GABA,试验3组添加140 mg/kg GABA。基础日粮原料组成及营养水平见表1。预试期3 d,正试期30 d。试验期内按养殖场要求进行日常管理,早、晚各饲喂一次。
表1 试验日粮配方及营养水平(风干基础)
1.3.1 生长数据检测
分别在开始和结束时间段,对试验羊进行称重,称重前空腹处理,记录每天的吃料量,通过以上数据计算平均日增重、平均日采食量、料重比。
平均日增重(g)=(末重-初重)/试验天数
平均日采食量(kg)=(投料量-剩料量)/试验天数
料重比=平均日采食量/平均日增重
1.3.2 血清生化指标检测
试验最后一天,采集血液10.0 mL 并分离血清。使用上海液质检测技术有限公司的试剂盒检测总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)含量以及谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性。血清试剂盒购买自上海液质检测技术有限公司。
1.3.3 抗氧化指标检测
使用上海液质检测技术有限公司的试剂盒检测总抗氧化能力,使用Fe3+还原法检测T-AOC 能力、使用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、使用比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、使用铂酸铰法检测过氧化氢酶(CAT)活性、使用硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量。
1.3.4 免疫指标检测
使用上海液质检测技术有限公司的试剂盒检测血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。
采用SAS 9.3 进行单因素方差分析,使用Duncan’s 法进行多重比较。以“平均值±标准差”标识数据。P<0.05表示差异显著,P>0.05表示差异不显著。
由表2可知,与对照组相比,试验2、3组的平均日增重、平均日采食量显著升高,料重比显著降低(P<0.05)。
表2 GABA对肉羊生长性能的影响
由表3可知,与对照组相比,试验2、3组肉羊血清TP、ALB 指标显著提高(P<0.05),AST、ALT 活性以及BUN含量显著降低(P<0.05)。
表3 GABA对肉羊血清生化指标的影响
由表4可知,与对照组相比,试验1、2、3组血清TAOC显著提高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。试验2、3组SOD、GSH-Px活性显著提高(P<0.05)。
表4 GABA对肉羊血清抗氧化指标的影响
表5 GABA对肉羊血清免疫指标的影响
由表5可知,与对照组相比,试验2、3组血清IgA、IgG、IL-2 含量显著升高(P<0.05);Ig(M)和TNF-α 试验组和对照组无显著差异(P>0.05)。
动物的采食量是影响生长的关键因素,受到中枢系统的调节。中枢神经系统会受到体液因素的影响,例如胃肠道功能、自身代谢的变化和其他因素会对中枢系统产生影响从而影响采食量[5]。GABA 也可以引起神经肽 Y 在血液中的浓度,可使采食中枢兴奋,提高动物采食意愿[6-7]。GABA 对葡萄糖磷酸化酯酶活性有积极影响,提高脑细胞兴奋度,增加乙酰胆碱的含量,从而有效提高动物采食量[8]。GABA 能够提升动物体内褪黑素及5-羟基色胺的分泌量,显著提升动物体内促甲状腺激素水平 ,从而有效的解决各种应激问题。GABA 能降低机体CCK 分泌,提高NPY 分泌,抑制α-MSH 分泌,从而提高CAMP 的浓度,加快动物生长速度[9]。
血清中TP、ALB 和尿酸或尿素的含量是衡量机体营养情况的重要指标[10]。机体肝脏出现问题时,AST 及ALT 指标会明显提高,所以肝脏健康的动物血清中的AST 及ALT 指标在合理范围内会保持较低的水平。未出现病变或损伤,肝脏解毒等功能越强[11]。血清中BUN 的含量越低代表蛋白质合成效率越高。本试验结果显示,添加100、140 mg/kg GABA 的试验2、3 组肉羊血清TP 和ALB 含量显著提高(P<0.05),ALT、AST活性和BUN含量显著降低。
根据动物代谢规律,动物机体氧化反应终产物是丙二醛(MDA),含量的高低直接反映了氧化反应强度,MDA 含量越高,说明动物机体细胞的损伤程度越大[12]。动物机体抗氧化过程中,SOD、GSH-Px 发挥了主要作用,而T-AOC 体现抗氧化酶促系统对动物机体损伤的抵抗能力,T-AOC、SOD、GSH-Px 活性越高,说明抗氧化能力越强[13]。GABA能够改善机体的氧化与还原的动态平衡,提高反刍动物消除自由基的能力,从而改善抗氧化功能。本研究中,肉羊日粮中添加100、140 mg/kg GABA 能够显著提升T-AOC、SOD、GSH-Px 活性, MDA含量则会显著下降。
IgG 可以激活补体和中和多种毒素,在免疫应答中起重要的作用[14-15]。IgA 抗体可以中和感染因子,在身体的黏膜表面发挥作用,由淋巴结中浆细胞和脾脏合成,这三种抗体含量反映了体液免疫的强度[16]。IL-2 主要由活化T 细胞产生,具有多源性和多向性,来自于趋化因子家族,对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用[17]。TNF-α主要是来自单核巨噬细胞,是重要的生物活性细胞因子。GABA 是一种非常重要的神经递质,对免疫系统有调节作用,它是通过与免疫细胞上相应受体结合起作用[18],从而对机体免疫系统产生影响。本研究对肉羊血清中各种免疫指标进行了检测,结果表明添加了GABA 的试验2、3 组IgA、IgG、IL-2 含量显著升高,说明GABA 在调节肉羊体液免疫与细胞免疫方面均具有明显的积极作用。
在本试验条件下,肉羊日粮中添加100、140 mg/kg的GABA 能够提升断奶后过渡阶段肉羊的生长指标,改善血清中相关生化指标、 抗氧化指标,提升肉羊的免疫水平。考虑生长性能指标及生产成本因素,GABA在肉羊中的经济添加量为100 mg/kg。