血清T淋巴细胞亚群水平变化与狼疮性肾炎患者疾病转归的相关性

李飞，常洁，董少卿

（河南科技大学第一附属医院 肾内科，河南 洛阳 471003）

系统性红斑狼 疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种累及肾脏、神经、肺脏、皮肤等多系统的自身免疫性结缔组织病，狼疮性肾炎（lupus nephritis,LN）属于SLE 常见并发症，其发病率占据SLE 的50%～80%［1］。临床常采用糖皮质激素等免疫抑制剂治疗，但不同患者病情转归不同，因而寻找新型非侵入性标志物对改善病情具有重要意义。CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+属于T 淋巴细胞亚群，其中CD4+、CD3+、CD19+属于特异性免疫应答，CD16+/CD56+属于非特异性免疫应答，可参与自身免疫性疾病发生过程［2］。CD19+属于Ⅰ型跨膜糖蛋白，可刺激B 细胞分化，促进浆细胞分泌抗体，还可分泌细胞因子，进而调控免疫应答［3-4］。目前关于T 淋巴细胞亚群与LN 疾病转归相关性尚未明确，本研究将检测其水平变化对疾病转归的预测价值，为LN 治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年1 月至2022 年3 月河南科技大学第一附属医院收治的82 例LN 患者为研究对象，依据病情严重程度［5］分为轻度21 例、中度32 例、重度29 例。治疗6 个月后根据疾病转归情况分为转归良好组65 例、转归不良组17 例。转归良好组：男25 例，女40 例；年龄24～42 岁，平均（32.16±2.72）岁；体重指数22～26 kg/m2，平均（24.01±0.52）kg/m2；病程1～3 年，平均（1.52±0.14）年。转归不良组：男10 例，女7 例；年龄23～43 岁，平均（33.52±2.85）岁；体重指数21～27 kg/m2，平均（23.85±0.41）kg/m2；病程1～2 年，平均（1.46±0.11）年。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经院伦理委员会批准。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：符合LN 诊断标准［6］且病理类型均为Ⅲ型及以上狼疮；无血液疾病者；无过敏性疾病者；首次确诊者；签署知情同意书。排除标准：自身免疫性溶血性贫血者；合并其他肾病者；凝血功能异常者；精神障碍者；合并恶性肿瘤者；近3 个月内发生严重感染或发热者；近期接受抑制机体免疫反应药物治疗者。

1.3 方法

1.3.1 治疗方法 所有患者接受糖皮质激素治疗，口服醋酸泼尼松片（辅仁药业集团有限公司，国药准字H20073323，规格：5 mg），1 mg/（kg·d）；口服免疫抑制剂霉酚酸酯（上海罗氏制药有限公司，国药准字H20031240，规格：0.25 g），1 g/次，2 次/d，连续治疗6 个月。治疗结束后评价疾病转归情况，转归良好定义为：临床症状基本消失，尿蛋白含量降低50%，血清蛋白水平≥30 g/L，血肌酐恢复至正常水平，否则视为转归不良［7］。

1.3.2 检测血清T 淋巴细胞亚群水平 分别于治疗前、治疗1 个月、3 个月后采集空腹外周静脉血5 mL，放入含有肝素抗凝采血管内，分别加入CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+标记的荧光抗体（美国Abnova 公司），使用FACSAriaⅡ流式细胞仪（美国贝克曼库尔特公司）检测CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+。

1.4 观察指标

①比较入组时两组不同生化指标：包括血清白蛋白、血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白、补体C3、补体C4、白细胞、红细胞沉降率（ESR）、尿沉渣红细胞数。②比较治疗前、治疗1 个月、3 个月后两组及不同病情严重程度（入组时）患者血清T淋巴细胞亚群水平。③分析各指标与生化指标、病情严重程度相关性。④分析治疗1 个月、3 个月后各指标对疾病转归的预测价值。

1.5 统计学方法

采用SPSS 24.0 软件处理数据。计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（）表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析（两两间比较采用LSD-t检验）；应用Pearson 分析T淋巴细胞亚群与生化指标的相关性；应用Spearman 分析T 淋巴细胞亚群与病情严重程度相关性；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析T淋巴细胞亚群水平对疾病转归的预测价值，不同方案间的曲线下面积（AUC）比较采用DeLong 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组生化指标比较

转归不良组血清白蛋白、补体C3、补体C4水平低于转归良好组，血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白水平，尿沉渣红细胞数高于转归良好组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组生化指标比较（）

表1 两组生化指标比较（）

2.2 两组治疗前后血清T 淋巴细胞亚群水平比较

治疗1 个月、3 个月后两组CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于治疗前，CD19+低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗1 个月、3 个月后转归良好组CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于转归不良组，CD19+低于转归不良组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组治疗前后血清T 淋巴细胞亚群水平比较（）

表2 两组治疗前后血清T 淋巴细胞亚群水平比较（）

注：1）与治疗前比较，P＜0.05；2）与治疗1 个月后比较，P＜0.05。

2.3 不同病情严重程度患者各指标水平

随着病情严重程度增加，CD4+、CD3+、CD16+/CD56+降低，CD19+升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同病情严重程度患者各指标水平（）

表3 不同病情严重程度患者各指标水平（）

注：1）与轻度比较，P＜0.05；2）与中度比较，P＜0.05。

2.4 各指标与生化指标、病情严重程度相关性分析

CD4+、CD3+、CD16+/CD56+与白蛋白、补体C3、补体C4 呈正相关，而与尿素氮、病情严重程度呈负相关（P＜0.05）；CD19+与白蛋白、补体C3、补体C4 呈负相关，而与尿素氮、病情严重程度呈正相关（P＜0.05）。见表4。

表4 各指标与生化指标、病情严重程度相关性分析

2.5 ROC 分析各指标对疾病转归的预测价值

以转归不良组17 为阳性样本，以转归良好组65 例为阴性样本，绘制ROC 曲线，结果显示，治疗1 个月、3 个月后各指标联合预测疾病转归的AUC 大于单项预测（P＜0.05），且治疗3 个月后各指标联合预测疾病转归的AUC 大于治疗1 个月（P＜0.05）。见表5。

表5 ROC 分析各指标对疾病转归的预测价值

3 讨论

LN 发病机制与免疫复合物形成、炎性反应、遗传、免疫应答等有关，免疫细胞因子异常分泌可引起机体免疫功能紊乱，进而引发自身免疫系统疾病，其病情进展与疾病转归密切相关，因而寻找LN 发生发展相关分子标志物对疾病转归具有重要指导意义［8-9］。

CD3+与T 细胞受体结合，可传递T 细胞受体、抗原结合的信号，促进机体免疫抑制形成，可积极参与机体应对刺激、感染等过程；CD4+T 淋巴细胞可进一步分化为辅助性T 细胞1（Th1）、辅助性T 细胞2（Th2）、辅助性T 细胞17（Th17）、调节性T 细胞（Treg）亚群，不同亚群细胞因子可互相转化，维持机体免疫平衡［10-11］。抗原刺激下T 淋巴细胞激活，可生成大量淋巴因子，并可维持机体免疫内环境稳定，若T 淋巴细胞亚群平衡异常可介导免疫性疾病发生过程［12-13］。本研究结果显示，治疗后两组CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于治疗前，CD19+低于治疗前，治疗后转归良好组CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于转归不良组，CD19+低于转归不良组，且CD4+、CD3+、CD16+/CD56+随着病情严重程度增加而降低，CD19+随着病情严重程度增加而升高，提示T 淋巴细胞亚群失衡可能促进LN 病情进展，并可增加LN 疾病转归不良发生风险。其原因可能为CD4+、CD3+、CD16+/CD56+水平降低主要为诱导细胞数目减少，促使机体中参与免疫抑制作用的细胞减少，破坏机体免疫平衡，降低其免疫抑制作用，进而激活自身反应性T 细胞；CD19+增加后可减弱T 抑制细胞功能，促使机体产生相应抗体，进而造成体液、细胞免疫异常，最终促进LN 转归不良。

补体是一种具有酶活性的球蛋白，补体C3、补体C4 水平降低表明补体活化功能异常，其水平变化与LN 疾病活动度呈负相关，研究表明免疫复合物可激活补体，促使SLE 肾脏受累［14］。尿蛋白、尿沉渣红细胞数可反映肾脏病变程度［15］。本研究结果显示，转归不良组血清白蛋白、补体C3、补体C4 水平低于转归良好组，血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白水平、尿沉渣红细胞数高于转归良好组，进一步研究发现CD4+、CD3+、CD16+/CD56+与白蛋白、补体C3、补体C4 呈正相关，与尿素氮、病情严重程度呈负相关，而CD19+与之相反，表明T 淋巴细胞亚群可能通过调节机体免疫反应、炎性反应，进而促进LN 转归不良。本研究中治疗后各指标联合预测疾病转归的AUC 大于单项预测，提示T 淋巴细胞亚群对LN 疾病转归具有一定预测价值。考虑其原因为T 淋巴细胞亚群可诱导Th1、Th2 等其他因子产生，引起LN 患者机体免疫调节功能异常，促进LN 病情进展，进一步影响疾病转归。

综上所述，CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+联合预测可提高对LN 患者疾病转归的预测价值，可为判断LN 病情进展及治疗方案制定提供科学依据。