发酵中草药渣对文昌鸡生长、屠宰性能和免疫机能的影响

包瑞莹， 王闫宇， 刘晓烜， 张海文， 王学梅 ， 冯 昆

（1.海南大学动物科技学院，海南海口 570228；2.遵义医科大学珠海校区，广东珠海 519041）

中草药是我国的特色药材，例如党参、黄芪、皇竹草等已有数千年的发展历史（Xu 等，2017）。作为饲料添加剂， 中草药可以通过改善动物的免疫状态、促进动物的生长性能来提高其生产力，因此被广泛用于畜禽生产（Gong 等，2014）。 中草药渣是中草药经加工提取、 煎煮制剂后产生的大量废弃物， 受提取工艺的限制， 其中还含有30% ～50%的药用活性物质 （Huang 等，2021；Meng 等，2017）。 目前常用的中草药渣处理方法有填埋、焚烧、 堆放等， 造成了严重的环境污染和资源浪费（孟祥才等，2018）。发酵技术已应用于非常规饲料原料处理多年，以此扩大饲料资源，解决饲料短缺问题，其中常用的发酵菌种有乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌和药用真菌等 （吴军龙等，2022；Li 等，2020）。 张玉千（2020）研究发现，日粮中添加发酵中草药渣可以提高断奶仔猪的生产性能。 梁丽芬（2022）使用发酵罗汉果渣饲喂肉鸡发现，其屠宰性能得到了显著改善。安琦等（2021）研究表明，植物乳杆菌发酵的黄芩药渣可以显著提高断奶仔猪的生长性能和免疫功能。 然而发酵中草药渣作为饲料添加剂对家禽的相关研究报道有限。

文昌鸡是海南地方鸡品种，具有皮薄肉嫩、风味独特、营养丰富等特点，年产值约120 亿元，对海南省畜禽养殖业发展具有重要支撑作用（宋彦亭等，2021）。本试验以发酵中草药渣为原料，研究其不同添加量对文昌鸡生长、 屠宰性能和免疫机能的影响， 从而为发酵中草药渣作为饲料添加剂提供可行性方向和理论支撑， 对提高文昌鸡饲养效率等方面具有实践意义。

1 材料与方法

1.1 试验材料 灵芝菌：由本课题组筛选鉴定。发酵中草药渣的成分及处理方式：22%党参药渣，22%黄芪药渣，44%皇竹草，11%麦麸，1%生石膏，65%蒸馏水。 经121 ℃高压灭菌20 min 后，接种灵芝菌有氧发酵30 d 所得发酵产物烘干粉碎制成。

1.2 试验设计与饲养管理 试验在海南大学动物科技学院动物养殖基地进行， 试验鸡由谭牛文昌鸡种鸡场提供。选择192 只43 日龄的文昌鸡母鸡，随机分为4 组，每组8 个重复，每个重复6 只鸡。 对照组（CK 组） 饲喂基础日粮，T1、T2、T3组的基础日粮中分别添加0.5%、1.0%、1.5%的发酵中草药渣替代麦麸。 试验共持续28 d，试验鸡采取笼养的方式，期间自由采食和饮水，自然通风和光照。 基础日粮的配制符合中国禽类的饲养标准（NY/T 33-2004），基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生长性能 记录每个重复的投料量和剩余料量。 试验第14 天和第28 天晚清空料槽内的剩余饲料，并在试验鸡空腹12 h 后进行称重，以重复为单位记录总重。计算平均日增重、平均日采食量、料重比，公式如下。 每日观察各组试验鸡的健康状态，统计死亡率。

平均日增重/（g/d）=（末重-初重）/试验天数；

平均日采食量/（g/d）=饲料消耗量/试验天数；

料重比=平均日采食量/平均日增重。

1.3.2 屠宰性能 试验结束后， 每个重复随机选取2 只体型相近的空腹试验鸡， 称重后静脉放血处死。 测定活体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、腹脂重、左侧腿肌重、左侧翅膀重，并通过所得数据计算屠宰率、半净膛率、全净膛率、腹脂率、腿比率、翅膀率，具体方法参照《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》（NY/T 823-2020）。 从试验鸡尾根部切线向上沿第一切线剥离两侧皮肤， 使用游标卡尺测量脂肪带的宽度，得到皮下脂肪厚度。

屠宰率/%=胴体重/活体重×100；

半净膛率/%=半净膛重/活体重×100；

全净膛率/%=全净膛重/活体重×100；

腹脂率/%=腹脂重/（全净膛重+腹脂重）×100；

腿比率/%=腿肌重/全净膛重×100；

翅膀率/%=翅膀重/全净膛重×100。

1.3.3 免疫器官指数 文昌鸡屠宰后， 取胸腺和脾脏（剔除脂肪和系膜）分别称重，计算免疫器官指数。

脾脏指数=脾脏重/活体重；

胸腺指数=胸腺重/活体重。

1.3.4 免疫组织形态 试验结束后每个处理随机选取1 只文昌鸡取胸腺和脾脏组织， 利用多聚甲醛固定，制作石蜡组织切片，经H.E.染色法处理后，显微镜下观察其淋巴细胞数量变化。

1.3.5 血清免疫指标 分离血清后， 使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）检测血清免疫球蛋白A （IgA）、 免疫球蛋白G （IgG）、 免疫球蛋白M（IgM）含量。

1.4 数据处理和分析 使用Excel 2007 对数据进行初步整理， 再通过SPSS 17.0 软件进行单因素方差分析，P ＜0.05 为差异显著，P ＜0.01 为差异极显著。 结果以“平均值±标准误”表示。

2 结果与分析

2.1 发酵中草药渣对文昌鸡生长性能的影响如表2 所示，饲料中添加发酵中草药渣后，试验第1 ～14 天，T1、T2、T3 组平均日增重较CK 组分别提高了9.73%、5.64%、2.25%，其中T1、T2 组差异显著（P ＜0.05）。 各处理组间的平均日采食量、料重比无显著差异（P ＞0.05）；试验第15 ～28 天，各生长性能指标均无显著差异（P ＞0.05）。整个试验期间无试验动物死亡。

表2 发酵中草药渣对文昌鸡生长性能的影响

2.2 发酵中草药渣对文昌鸡屠宰性能的影响由表3 可知， 用一定比例的发酵中草药渣替代部分基础日粮后， 与CK 组相比，T1、T2、T3 组腿比率分别提高了5.04%、6.74%、7.67%（P ＜0.05），试验组的屠宰率呈递增趋势，T1、T2 组翅膀率有所增加，但是差异均不显著（P ＞0.05）。 各处理组间的全净膛率、腹脂率、皮下脂肪厚度均无显著差异（P ＞0.05）。

表3 发酵中草药渣对文昌鸡屠宰性能的影响

2.3 发酵中草药渣对文昌鸡免疫机能的影响

2.3.1 发酵中草药渣对文昌鸡免疫器官发育的影响 由表4 可见，T1、T2、T3 组脾脏质量较CK 组分别提高了8.53%、21.33%、5.69%，其中T2 组差异显著（P ＜0.05）。 各试验组的脾脏指数、胸腺质量和胸腺指数均有增长的趋势， 且T2 组增加最高，但是无显著差异（P ＞0.05）。观察图1 可知，试验组中文昌鸡脾脏和胸腺组织中的淋巴细胞数量明显多于CK 组。

图1 发酵中草药渣对文昌鸡脾脏、胸腺组织中淋巴细胞数量的影响

表4 发酵中草药渣对文昌鸡免疫器官质量和指数的影响

2.3.2 发酵中草药渣对文昌鸡血清免疫蛋白的影响 如表5 所示， 添加一定含量的发酵中草药渣后，T1、T2、T3 组文昌鸡血清中的IgA、IgG 含量均高于CK 组，分别提高了26.75%、35.31%、26.54%和41.60%、55.33%、33.42%， 其中T1、T3 组增加显著（P ＜0.05），T2 组增加极显著（P ＜0.01）。 各处理组间血清中的IgM 含量无显著差异 （P ＞0.05）。

表5 发酵中草药渣对文昌鸡血清免疫蛋白的影响 μg/mL

3 讨论

3.1 发酵中草药渣对文昌鸡生长性能的影响中草药渣中含有大量纤维素、脂肪和蛋白质、多糖等生物活性成分 （马逊风等，2004； 吴纯洁等，1998）。 在发酵过程中，微生物可以将中草药渣中的大分子物质分解为小分子物质， 释放其药用活性成分， 降解中草药渣中的有毒物质以减少其副作用，从而更利于被动物直接吸收，微生物产生的大量代谢产物还可以促进动物的生长发育（刘晓烜等，2021；Chen 等，2012；Himmel 等，2007）。 闫先超（2016）研究发现，在青脚麻鸡的饲粮中添加黄芪药渣发酵物后， 其平均日增重得到了显著提高，生长性能得到了改善。卢浪（2022）将野生艾草和不同浓度黑曲霉发酵的艾草饲喂肉仔鸡发现，发酵艾草提高了其生长性能且效果优于野生艾草。 谭雁婷（2022）发现，3%的香菇发酵料可以有效促进黄羽肉鸡的生产性能。本研究结果中，试验第1 ～14 天，饲喂发酵中草药渣提高了文昌鸡的平均日增重， 其中0.5%、1.0%的添加量组差异显著，而各组的平均日采食量和料重比无显著差异。试验第15 ～28 天，各指标均无显著差异，整个试验阶段无死亡。 说明发酵中草药渣对文昌鸡无明显副作用， 且对其生长发育起到了一定的促进作用。 可能是发酵中草药渣的活性物质和微生物代谢产物改善了文昌鸡的肠道功能， 促进其消化吸收营养物质的能力， 而试验后期文昌鸡的生长逐渐达到平缓阶段，基础日粮已满足自身需求（徐辉等，2021）。

3.2 发酵中草药渣对文昌鸡屠宰性能的影响屠宰性能是反映禽类胴体品质的重要指标， 其中屠宰率和全净膛率是衡量禽类产肉性能的主要指标。 一般认为屠宰率高于80%、 全净膛率高于60%的禽类肉用性能良好（张红等，2004）。腿比率和翅膀率越高说明禽类的腿和翅膀所占比率越大，产肉性能越好。腹脂率和皮下脂肪厚度反映了家禽的脂肪在腹部和皮下的沉积能力， 而脂肪沉积过多会导致鸡的屠宰率和饲料转化率降低，腹脂率和皮下脂肪厚度值越高， 则说明产肉率越小（张颖等，2022；韩文朋等，2019）。张强等（2022）研究发现， 基础饲粮中添加3%的发酵穿心莲粉可以显著提高番鸭的屠宰率和胸肌率， 产肉性能得到了改善。高凤磊（2022）研究表明，在黄花鸡的基础日粮中添加5%发酵剑麻渣可以显著提高屠宰率。 本试验结果表明， 所有处理组的屠宰率大于87%，全净膛率大于65%，说明试验所用文昌鸡肉用性能良好。 在饲料中添加发酵中草药渣对半净膛率、腹脂率、皮下脂肪厚度均无显著影响，但是提高了屠宰率，显著增加了腿比率，0.5%、1.0%的发酵中草药渣提高了文昌鸡的翅膀率， 说明发酵中草药渣有利于文昌鸡的器官发育， 可以提高其屠宰性能，改善产肉能力。

3.3 发酵中草药渣对文昌鸡免疫机能的影响在家禽的生长发育过程中， 胸腺和脾脏是免疫系统中主要的免疫器官， 在抵抗外来病原微生物入侵的作用上起着不可取代的作用。 胸腺是中枢免疫器官，是免疫细胞发生、发育、分化与成熟的场所， 同时对外周免疫器官的发育起到主导作用。脾脏是外周免疫器官， 是参与免疫反应的重要部位，主要免疫功能是产生抗体（栾维民，2008）。 免疫器官质量增加是免疫力加强的表现， 免疫器官指数是免疫器官质量占活体重的比例， 值越高则代表免疫器官的相对发育情况越好， 相应免疫功能也越完善（江彦等，2018；余祖华等，2016）。陈柯源等（2020）使用枯草芽孢杆菌发酵当归、黄芪药粉发现，其可以显著增加肉鸡的免疫器官指数。张晓静等（2018）研究发现，发酵黄芪-甘草水提物增强817 肉鸡免疫功能的效果优于未发酵产物。家禽血液中淋巴细胞的主要来源是胸腺， 淋巴细胞对抗原刺激进行免疫应答主要在脾脏中进行，且血清中免疫球蛋白的主要来源是淋巴细胞，因此淋巴细胞的数量可在一定程度上评估家禽的免疫能力（杜平，2022；董淑珍等，2011）。 姜云瑶等（2016）使用扁灵芝发酵浸膏发现，可以促进肉鸡淋巴细胞的增殖。郑全等（2013）研究发现，虫草真菌固态发酵添加剂可以促进加肉仔鸡免疫组织淋巴细胞的成熟，增加其数量。 本研究结果显示，饲喂发酵中草药渣后文昌鸡的免疫器官质量均有提高， 其中1.0%的添加水平显著增加了脾脏质量，各试验组的免疫器官指数均高于对照组，且1.0%发酵中草药渣组值最高， 并且发酵中草药渣能够明显增加文昌鸡淋巴细胞的数量。 说明在饲料中添加发酵中草药渣对免疫器官的发育、 免疫活性细胞的增殖具有明显促进作用， 增强了机体的抗病力，提高机体免疫功能，其中添加量为1.0%时效果最佳。

IgA、IgG、IgM 是家禽血清中重要的抗体，当细菌或病毒入侵机体时， 可以与相应的抗原进行特异性结合，激活体液免疫，达到清除细菌、病毒、致病物质的作用，对机体有保护和防御功能，因此IgA、IgG、IgM 的含量越高代表家禽免疫功能越强（解军亮等，2022）。 IgA 参与黏膜免疫，在局部损伤中发挥作用；IgG 是血清中含量最高、最重要的免疫球蛋白，在体液免疫中起主导作用；IgM 是机体受到抗原刺激时产生的第一种抗体， 在早期防御中起着重要作用 （Song 等，2020； 马玉芳等，2008）。 范作良等（2016）研究发现，日粮中发酵后的中草药制剂可以极显著提高蛋鸡血清中的I-gA、IgG、IgM 含量。许栋等（2021）在产蛋后期的蛋鸡饲料中添加发酵中草药发现， 其球蛋白含量有极显著的提高。 谢全喜等（2016）使用鼠李糖乳杆菌发酵紫茎泽兰脱毒草粉和麸皮， 联合枯草芽孢杆菌饲喂黄羽肉鸡发现，其盲肠内容物sIgA 和血清IgG 含量得到显著增加。本研究结果显示，各处理组IgM 含量差异不显著，推测可能是试验末期文昌鸡已渡过早期免疫阶段， 因此发酵中草药渣对抗原刺激诱导的免疫应答产生的IgM 水平影响不大，其机理还有待进一步研究。而饲料中添加0.5%、1.5%的发酵中草药渣显著提高了文昌鸡血清中的IgA、IgG 含量，1.0%的发酵中草药渣有极显著的提高， 说明添加发酵中草药渣能够提高文昌鸡的免疫抗体水平， 从而进一步加强其免疫功能，且1.0%的添加量效果最佳，可能是发酵所使用的灵芝真菌与各中草药渣成分发生协同作用，具有增强免疫力的功效， 且中草药渣经发酵后多糖等活性成分的增加也会引起免疫指标水平的升高（解军亮等，2022；陈柯源等，2020）。

4 结论

本研究结果表明， 在饲料中添加发酵中草药渣可以显著改善文昌鸡的生长性能、 屠宰性能和免疫机能， 以添加1.0%的发酵中草药渣效果最优。